| 摘要 | 第8-13页 |
| Abstract | 第13-20页 |
| 1 引言 | 第21-42页 |
| 1.1 研究进展 | 第21-40页 |
| 1.1.1 果实成熟机理的研究进展 | 第21-36页 |
| 1.1.1.1 果实成熟与乙烯 | 第22-32页 |
| 1.1.1.2 多胺与果实成熟 | 第32-33页 |
| 1.1.1.3 成熟衰老相关的酶类与果实成熟 | 第33-36页 |
| 1.1.2 苦瓜果实采后生理和分子生物学研究现状与存在问题 | 第36-37页 |
| 1.1.3 均一化文库构建的研究进展 | 第37-38页 |
| 1.1.4 植物启动子的研究进展 | 第38-40页 |
| 1.2 本论文研究的目的意义与主要内容 | 第40-42页 |
| 1.2.1 研究的目的意义 | 第40页 |
| 1.2.2 主要研究内容 | 第40-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-55页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第42-43页 |
| 2.1.1 苦瓜果实成熟过程中生理指标测定的材料 | 第42页 |
| 2.1.2 均一化建库的苦瓜果实材料 | 第42-43页 |
| 2.1.3 亚细胞定位的植物材料 | 第43页 |
| 2.1.4 试剂 | 第43页 |
| 2.2 方法 | 第43-55页 |
| 2.2.1 不同基因型苦瓜果实生理指标的测定 | 第43页 |
| 2.2.2 苦瓜果实均一化文库构建 | 第43-45页 |
| 2.2.3 苦瓜果实成熟相关基因的克隆及结构分析 | 第45-49页 |
| 2.2.4 苦瓜果实成熟相关基因的表达分析 | 第49-51页 |
| 2.2.5 McACS5基因的瞬时表达 | 第51页 |
| 2.2.6 苦瓜McACS5、McACO2和McGal基因启动子的克隆和序列分析 | 第51-54页 |
| 2.2.7 MC/1C02启动子缺失区段载体构建和烟草瞬间表达 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-114页 |
| 3.1 成熟期3个基因型苦瓜硬度,乙烯、呼吸半乳糖苷酶变化差异分析 | 第55-59页 |
| 3.1.1 成熟期3个基因型苦瓜硬度变化 | 第55页 |
| 3.1.2 成熟期3个基因型苦瓜乙烯释放变化 | 第55-56页 |
| 3.1.3 成熟期3个基因型苦瓜果实呼吸速率变化 | 第56-57页 |
| 3.1.4 成熟过程3个基因型苦瓜半乳糖苷酶活性变化 | 第57页 |
| 3.1.5 成熟过程3个基因型苦瓜硬度,乙烯、呼吸、半乳糖苷酶活性相关分析 | 第57-59页 |
| 3.2 苦瓜果实均一化文库的构建 | 第59-62页 |
| 3.2.1 总RNA提取 | 第59页 |
| 3.2.2 全长cDNA的合成 | 第59页 |
| 3.2.3 全长cDNA文库均一化效果检测 | 第59-60页 |
| 3.2.4 文库质量鉴定 | 第60页 |
| 3.2.5 EST测序结果分析 | 第60-62页 |
| 3.3 7个苦瓜果实成熟相关基因全长cDNA克隆、结构分析 | 第62-97页 |
| 3.3.1 7个苦瓜果实成熟相关基因全长cDNA的获得 | 第62-69页 |
| 3.3.2 7个苦瓜果实成熟相关基因生物信息学分析 | 第69-80页 |
| 3.3.3 7个苦瓜果实成熟相关基因推导氨基酸序列的系统发育分析 | 第80-92页 |
| 3.3.4 7个苦瓜果实成熟相关基因亚细胞定位 | 第92-97页 |
| 3.4 McACS5、McACO2和McGal启动子的克隆及序列分析 | 第97-104页 |
| 3.4.1 McACS5基因启动子的克隆和序列分析 | 第97-99页 |
| 3.4.2 McACO2启动子的克隆和序列分析 | 第99-101页 |
| 3.4.3 McGal启动子的克隆和序列分析 | 第101-104页 |
| 3.5 7个苦瓜果实成熟相关基因的表达分析 | 第104-111页 |
| 3.5.1 McACS5与苦瓜ACS基因家族其它4个成员的表达差异分析 | 第104页 |
| 3.5.2 苦瓜McACO2、McACO1基因的表达差异分析 | 第104-105页 |
| 3.5.3 苦瓜McEIL2和McERF1的表达差异分析 | 第105-106页 |
| 3.5.4 苦瓜McSAMDC基因的表达差异分析 | 第106-107页 |
| 3.5.5 苦瓜McLOX2基因的表达差异分析 | 第107-108页 |
| 3.5.6 苦瓜McGal基因的表达差异分析 | 第108页 |
| 3.5.7 McACS5、McACO2和McGal启动子GUS表达分析 | 第108-111页 |
| 3.6 McACS5与McACO2基因功能的初步分析 | 第111-112页 |
| 3.7 McACO2启动子不同缺失区段的GUS定量分析 | 第112-114页 |
| 4. 讨论 | 第114-123页 |
| 4.1 苦瓜果实成熟与硬度、乙烯、呼吸和β-半乳糖甘酶的关系 | 第114-115页 |
| 4.2 苦瓜果实全长均一化文库的质量与保证 | 第115-116页 |
| 4.3 苦瓜果实成熟相关基因的结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径 | 第116-122页 |
| 4.3.1 McACS5结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径 | 第116-118页 |
| 4.3.2 McACO2结构与表达分析,推测其功能及可能的进化途径 | 第118-119页 |
| 4.3.3 乙烯信号转导因子McEIL2和反应因子McERF1结构及表达分析 | 第119-120页 |
| 4.3.4 McSAMDC结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径 | 第120-121页 |
| 4.3.5 McLOX2结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径 | 第121页 |
| 4.3.6 McGal结构与表达分析,推测其功能及可能的进化途径 | 第121-122页 |
| 4.4 McACO2基因表达可能调控机制 | 第122-123页 |
| 5 总结与展望 | 第123-130页 |
| 5.1 总结 | 第123-128页 |
| 5.2 创新点 | 第128-129页 |
| 5.3 展望 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
