| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 缩略语简表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-24页 |
| 1. 研究意义 | 第17页 |
| 2. 国内外研究现状及发展动态分析 | 第17-22页 |
| 2.1 非病毒类基因载体研究概况 | 第18-19页 |
| 2.2 SS-PAAs基因载体的研究现状 | 第19-22页 |
| 3. 本课题的设计思路和研究内容 | 第22-23页 |
| 附图 | 第23-24页 |
| 第一章 聚合物的合成与表征 | 第24-52页 |
| 1. 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 1.1 试剂 | 第24-25页 |
| 1.2 仪器 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-26页 |
| 2.1 聚合物的结构确证方法 | 第25-26页 |
| 3. 四种Gua-SS-PAAs聚合物基因载体的合成 | 第26-29页 |
| 3.1 CAR-/CHL-CBA聚合物基因载体的合成 | 第26-28页 |
| 3.2 AGM-/ARG-CBA聚合物基因载体的合成 | 第28-29页 |
| 4. 各步反应产物的结构确证 | 第29-41页 |
| 4.1 ~1HNMR结果分析 | 第29-39页 |
| 4.2 质谱分析 | 第39-41页 |
| 5. GPC测定四种聚合产物的分子量 | 第41-46页 |
| 5.1 单分散PEG制备标准曲线 | 第41-44页 |
| 5.2 GPC测定四种Gua-SS-PAAs聚合物的分子量 | 第44-46页 |
| 6. 讨论 | 第46-51页 |
| 7. 本章小结 | 第51-52页 |
| 第二章 基因/载体复合物的制备和表征 | 第52-74页 |
| 1. 材料与仪器 | 第52-54页 |
| 1.1 试剂 | 第52-53页 |
| 1.2 仪器 | 第53-54页 |
| 2. 方法 | 第54-60页 |
| 2.1 pcDNA3.1-EGFP质粒的扩增 | 第54页 |
| 2.2 pSliencer~(TM) 1-CMV-FANCF-shRNA质粒的构建 | 第54-58页 |
| 2.3 两种质粒扩增后的提取纯化 | 第58页 |
| 2.4 基因/载体复合物的构建 | 第58-59页 |
| 2.5 Hoechst 33342染色检测聚合物载体的包封率 | 第59页 |
| 2.6 动态光散射(DLS)法测定基因/载体复合物的Zeta电位和粒径 | 第59页 |
| 2.7 原子力显微镜(AFM)观察基因/载体复合物的相态学特征 | 第59-60页 |
| 3. pcDNA3.1-EGFP和pSliencer~(TM)4.1-CMV-FANCF-shRNA质粒的制备结果 | 第60-62页 |
| 3.1 pSliencer~(TM)4.1-CMV-FANCF-shRNA质粒的构建 | 第60-62页 |
| 4. Hoechst 33342测定聚合物载体的包封率 | 第62-64页 |
| 5. 马尔文动态光散射(DLS)测定基因/载体复合物的粒径和Zeta电位 | 第64-68页 |
| 6. AFM观察记录基因/载体复合物的形态学特征 | 第68-71页 |
| 7. 讨论 | 第71-73页 |
| 8. 本章小结 | 第73-74页 |
| 第三章 聚合物载体对外源基因的包载稳定性研究 | 第74-88页 |
| 1. 材料与仪器 | 第74-75页 |
| 1.1 材料 | 第74-75页 |
| 1.2 仪器 | 第75页 |
| 2. 方法 | 第75-77页 |
| 2.1 两种质粒的扩增和纯化 | 第75页 |
| 2.2 基因/载体复合物的构建 | 第75页 |
| 2.3 琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第75-76页 |
| 2.4 肝素置换实验 | 第76页 |
| 2.5 DNase Ⅰ酶稳定性试验 | 第76页 |
| 2.6 还原敏感性实验 | 第76-77页 |
| 3. 琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第77-79页 |
| 4. 肝素置换实验结果 | 第79-81页 |
| 5. DNase Ⅰ酶稳定性试验 | 第81-83页 |
| 6. 还原敏感性实验 | 第83-85页 |
| 7. 讨论 | 第85-87页 |
| 8. 本章小结 | 第87-88页 |
| 第四章 聚合物载体体外毒性和转染效率的考察 | 第88-104页 |
| 1. 材料与仪器 | 第88-89页 |
| 1.1 材料 | 第88页 |
| 1.2 仪器 | 第88-89页 |
| 2. 方法 | 第89-91页 |
| 2.1 两种质粒的扩增和纯化 | 第89页 |
| 2.2 基因/载体复合物的构建 | 第89页 |
| 2.3 细胞活力的测定 | 第89-90页 |
| 2.4 包载pcDNA3.1-EGFP后体外转染效率的测定 | 第90-91页 |
| 2.5 包载pSliencer~(TM)4.1-CMV-FANCF-shRNA后体外转染效率的测定 | 第91页 |
| 3. 四种聚合物载体包载两种质粒后所形成复合物的细胞活力测定结果 | 第91-94页 |
| 4. 四种聚合物载体包载两种质粒的体外转染效率研究 | 第94-100页 |
| 5. 讨论 | 第100-103页 |
| 6. 本章小结 | 第103-104页 |
| 第五章 基因/载体复合物转运机制的初步研究 | 第104-124页 |
| 1. 材料与仪器 | 第104-105页 |
| 1.1 材料 | 第104-105页 |
| 1.2 仪器 | 第105页 |
| 2. 方法 | 第105-108页 |
| 2.1 两种质粒的扩增和纯化 | 第105页 |
| 2.2 基因/载体复合物的构建 | 第105页 |
| 2.3 LSCM观察记录聚合物载体的体外细胞摄取过程 | 第105-106页 |
| 2.4 利用转运抑制剂考察基因/载体复合物的转运机制 | 第106-107页 |
| 2.5 基因/载体复合物的内涵体逃逸研究 | 第107页 |
| 2.6 基因/载体复合物的核定位效应观察 | 第107-108页 |
| 2.7 LDH释放实验评价细胞膜的完整性 | 第108页 |
| 3. 基因/载体复合物转运机制初步研究的结果 | 第108-120页 |
| 3.1 聚合物载体的体外细胞摄取过程 | 第108-110页 |
| 3.2 转运抑制剂考察基因/载体复合物的转运机制 | 第110-117页 |
| 3.3 LSCM观察基因/载体复合物的内涵体逃逸过程 | 第117页 |
| 3.4 FM观察基因/载体复合物的核定位效应 | 第117-118页 |
| 3.5 LDH释放实验考察细胞膜完整性 | 第118-120页 |
| 4. 讨论 | 第120-123页 |
| 5. 本章小结 | 第123-124页 |
| 全文结论 | 第124-126页 |
| 本文主要创新点 | 第126-127页 |
| 需进一步研究的后续问题 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-135页 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
