中文摘要 | 第8-12页 |
Abstract | 第12-17页 |
符号说明 | 第18-20页 |
第一章 前言 | 第20-37页 |
1.1 玉米适应磷匮乏的机制 | 第20-30页 |
1.1.1 磷缺乏限制农作物生产 | 第20-21页 |
1.1.2 植物适应低磷胁迫的根系形态重塑 | 第21-24页 |
1.1.3 生长素调控低磷诱导的根系构型变化 | 第24-25页 |
1.1.4 生长素极性运输和PIN蛋白 | 第25-28页 |
1.1.5 由PID和PP2A介导的蛋白磷酸化调控生长素级性运输 | 第28-30页 |
1.2 NF-Y家族基因调控植物生长发育和抗逆性 | 第30-35页 |
1.2.1 植物NF-Y类转录因子家族 | 第30-31页 |
1.2.2 NF-Y转录因子对植物生长发育的调控 | 第31-32页 |
1.2.3 NF-Y家族基因调控植物抗逆性 | 第32-34页 |
1.2.4 NF-YA家族 | 第34-35页 |
1.3 研究目的和意义 | 第35-37页 |
第二章 过表达ZmPP2AA1提高玉米低磷耐受性 | 第37-57页 |
2.1 材料与方法 | 第37-41页 |
2.1.1 ZmPP2AA1的生物信息学分析 | 第37-38页 |
2.1.2 ZmPP2AA1cDNA全长序列克隆 | 第38页 |
2.1.3 植物转基因表达载体和RNAi结构表达载体的构建 | 第38页 |
2.1.4 农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化 | 第38页 |
2.1.5 转基因玉米植株的分子鉴定 | 第38-39页 |
2.1.6 玉米小苗营养液培养 | 第39页 |
2.1.7 激素处理实验 | 第39-40页 |
2.1.8 缺磷土壤栽培实验 | 第40页 |
2.1.9 玉米植株生物量和磷含量测定 | 第40页 |
2.1.10 玉米根系参数分析和磷吸收动力学参数测定 | 第40页 |
2.1.11 IAA含量测定 | 第40页 |
2.1.12 统计分析方法 | 第40-41页 |
2.2 结果与分析 | 第41-54页 |
2.2.1 ZmPP2AA1的克隆及生物信息学分析 | 第41-42页 |
2.2.2 ZmPP2AA1响应低磷胁迫 | 第42页 |
2.2.3 转基因玉米植株的分子生物学检测 | 第42-44页 |
2.2.4 ZmPP2AA1影响玉米初生根和侧根的发育 | 第44-45页 |
2.2.5 ZmPP2AA1参与低磷诱导的根系构型重塑 | 第45-46页 |
2.2.6 过表达ZmPP2AA1增强玉米对低磷的耐受性 | 第46-47页 |
2.2.7 过表达ZmPP2AA1转基因植株积累较多的磷 | 第47-48页 |
2.2.8 过表达ZmPP2AA1植株具有改进的磷吸收速率 | 第48-49页 |
2.2.9 过表达ZmPP2AA1可提高玉米在低磷胁迫下的产量 | 第49-50页 |
2.2.10 玉米生长素含量分析 | 第50-51页 |
2.2.11 外源施加IAA和NPA对不同供磷条件下玉米根系形态的影响 | 第51-54页 |
2.3 分析与讨论 | 第54-57页 |
2.3.1 ZmPP2AA1响应低磷胁迫且过表达ZmPP2AA1提高玉米低磷耐受性 | 第54页 |
2.3.2 ZmPP2AA1通过改变生长素运输或分布影响玉米根系发育 | 第54-55页 |
2.3.3 低磷诱导的玉米根系构型变化与ZmPP2AA1相关 | 第55-57页 |
第三章 过表达ZmNF-YA1提高玉米抗旱性 | 第57-81页 |
3.1 材料和方法 | 第57-61页 |
3.1.1 玉米NF-YA家族基因生物信息学分析 | 第57-58页 |
3.1.2 植物材料 | 第58页 |
3.1.3 菌株、质粒 | 第58页 |
3.1.4 转基因植株和突变体植株的分子检测 | 第58页 |
3.1.5 三叶期玉米渗透胁迫、盐胁迫和离子毒害处理 | 第58-59页 |
3.1.6 五叶期玉米植株的干旱处理 | 第59页 |
3.1.7 ZmNF-YA1基因表达模式检测 | 第59-60页 |
3.1.8 盆栽玉米开花前期干旱处理 | 第60页 |
3.1.9 叶片相对含水量的测定 | 第60页 |
3.1.10 叶片细胞膜离子渗透率和丙二醛含量的测定 | 第60页 |
3.1.11 叶片可溶性糖和游离脯氨酸含量的测定 | 第60页 |
3.1.12 叶片抗氧化酶活性的测定 | 第60页 |
3.1.13 免疫共沉淀(CO-IP) | 第60-61页 |
3.2 结果与分析 | 第61-78页 |
3.2.1 ZmNF-YA1的生物信息学分析 | 第61页 |
3.2.2 ZmNF-YA1启动子分析 | 第61-63页 |
3.2.3 不同玉米器官中ZmNF-YA1的表达模式分析 | 第63页 |
3.2.4 玉米叶片中ZmNF-YA1响应不同非生物胁迫的表达模式 | 第63-64页 |
3.2.5 ZmNF-YA1过表达和Mu插入突变体植株的分子鉴定 | 第64-66页 |
3.2.6 ZmNF-YA1调节玉米植株生长和根系发育 | 第66-68页 |
3.2.7 盐胁迫、渗透胁迫及离子毒害对ZmNF-YA1过表达和Mu插入突变体苗期形态的影响 | 第68-72页 |
3.2.8 干旱胁迫对五叶期玉米植株表型的影响 | 第72页 |
3.2.9 开花前干旱胁迫对ZmNF-YA1过表达玉米植株生长发育及生理指标的影响 | 第72-76页 |
3.2.10 Co-IP检测ZmNF-YA1与ZmNF-YC17的互作 | 第76-78页 |
3.3 分析与讨论 | 第78-81页 |
3.3.1 ZmNF-YA1基因参与玉米生长和抗逆性调控 | 第78-79页 |
3.3.2 ZmNF-YA1基因影响玉米抗旱性的可能机制 | 第79-81页 |
第四章 总结与展望 | 第81-84页 |
4.1 过表达ZmPP2AA1提高玉米低磷耐受性 | 第81页 |
4.2 ZmNF-YA1在玉米生长发育和抗逆机制中的作用 | 第81-82页 |
4.3 本论文的主要创新点 | 第82页 |
4.4 本论文工作的不足 | 第82-83页 |
4.5 论文工作继续深入的几点看法 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-103页 |
附录 | 第103-119页 |
附录1 ZmPP2AA与AtPP2AA蛋白“HEAT”重复多序列比对 | 第103-104页 |
附录2 玉米、拟南芥、水稻、小麦、二穗短柄草PP2AA蛋白氨基酸序列比对 | 第104-105页 |
附录3 ZmPP2AA1cDNA全长序列克隆材料与方法 | 第105页 |
附录4 植物转基因表达载体和RNAi结构表达载体的构建方法 | 第105-108页 |
附录5 玉米转基因植株产生及筛选与纯合方法 | 第108-110页 |
附录6 转基因玉米植株的分子鉴定方法 | 第110-116页 |
附录7 玉米植株生理指标测定方法 | 第116-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第120-121页 |
附件 | 第121页 |