符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
1 前言 | 第16-37页 |
1.1 研究问题的由来 | 第16页 |
1.2 抗病力的免疫学和遗传学基础 | 第16-21页 |
1.2.1 抗病力的免疫学基础 | 第16-17页 |
1.2.2 抗病力的遗传学基础 | 第17-19页 |
1.2.3 抗病育种的方法 | 第19页 |
1.2.4 猪品种间抗病能力差异 | 第19-21页 |
1.3 血液 | 第21-25页 |
1.3.1 血液生理生化指标概述 | 第21页 |
1.3.2 血液生理生化指标的免疫和遗传能力 | 第21-22页 |
1.3.3 外周血单个核细胞及其免疫功能 | 第22-23页 |
1.3.4 树突状细胞 | 第23-25页 |
1.4 CpG ODN | 第25-28页 |
1.4.1 CpG的命名、基本结构及种属特性 | 第25页 |
1.4.2 CpG-ODN的类型及结构特点 | 第25-27页 |
1.4.3 CpG ODN的应用 | 第27-28页 |
1.5 Toll样受体概述 | 第28-31页 |
1.5.1 TLRs的结构、分布及其受体 | 第29页 |
1.5.2 TLRs信号传导途径 | 第29-31页 |
1.6 高通量测序 | 第31-33页 |
1.6.1 高通量测序简介 | 第31-32页 |
1.6.2 高通量测序基因组研究 | 第32页 |
1.6.3 转录组测序研究 | 第32-33页 |
1.7 猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第33-36页 |
1.7.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概述 | 第33页 |
1.7.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒特点 | 第33页 |
1.7.3 致病机理 | 第33-34页 |
1.7.4 PRRSV的免疫反应 | 第34-35页 |
1.7.5 PRRSV疫苗 | 第35-36页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-50页 |
2.1 试验材料 | 第37-40页 |
2.1.1 试验动物 | 第37页 |
2.1.2 细胞和毒株 | 第37页 |
2.1.3 主要试剂与药品 | 第37-38页 |
2.1.4 主要设备和仪器 | 第38-40页 |
2.2 试验方法 | 第40-50页 |
2.2.1 血液试验 | 第40页 |
2.2.2 CpG ODN刺激和测序 | 第40-45页 |
2.2.3 体外CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs | 第45-47页 |
2.2.4 荧光定量 PCR | 第47页 |
2.2.5 树突状细胞分离与培养 | 第47页 |
2.2.6 CpG ODN与PRRSV灭活不同组合感染MoDCs试验的试验方法 | 第47-48页 |
2.2.7 Western blot验证各实验处理组NF-κB p65蛋白的表达量 | 第48-50页 |
2.3 数据分析 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-67页 |
3.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理生化指标比较 | 第50-51页 |
3.1.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理指标比较 | 第50页 |
3.1.2 大蒲莲猪和长白猪血液生化指标比较 | 第50-51页 |
3.2 CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白后的免疫学指标比较 | 第51页 |
3.3 CpG ODN注射后大蒲莲猪和长白猪高通量结果 | 第51-58页 |
3.3.1 与参考序列比对结果 | 第51-52页 |
3.3.2 皮尔逊相关系数统计结果 | 第52页 |
3.3.3 差异表达基因的鉴定和分析 | 第52-55页 |
3.3.4 差异表达基因的GO和KEGG通路富集分析 | 第55页 |
3.3.5 差异表达基因COG功能分析 | 第55页 |
3.3.6 大蒲莲猪和长白猪免疫相关的差异基因鉴定 | 第55-57页 |
3.3.7 荧光定量验证高通量结果 | 第57-58页 |
3.4 体内qRT-PCR实验基因验证 | 第58-59页 |
3.5 大蒲莲猪和长白猪SNP和可变剪切事件分析 | 第59-61页 |
3.5.1 SNP统计分 | 第59页 |
3.5.2 可变剪切事件分析 | 第59-61页 |
3.6 CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs基因验证 | 第61-64页 |
3.6.1 TLR9和细胞因子基因表达特点 | 第61-63页 |
3.6.2 趋化因子基因表达特点 | 第63-64页 |
3.7 CpG ODN增强PRRSV灭活疫苗免疫力 | 第64-67页 |
3.7.1 PRRSV和CpG ODN处理MoDC后Th1和Th2细胞因子mRNA表达水平 | 第64-65页 |
3.7.2 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合感染MoDCs上清中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子蛋白表达水平 | 第65-66页 |
3.7.3 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合孵育MoDCs不同时间后TRIF、MyD88和NF-κB mRNA相对表达量的变化 | 第66-67页 |
3.7.4 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合孵育MoDCs不同时间后NF-κB P65蛋白相对表达量的变化 | 第67页 |
4 讨论 | 第67-75页 |
4.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理生化指标比较 | 第67-68页 |
4.2 CpG ODN体外刺激大蒲莲猪和长白猪全血比较 | 第68-69页 |
4.3 CpG ODN体内刺激大蒲莲猪和长白猪高通量测序 | 第69-71页 |
4.4 CpG ODN体外刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs | 第71-73页 |
4.5 CpG ODN体外增强树突状细胞对PRRSV免疫能力 | 第73-75页 |
5 结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-98页 |
附录 | 第98-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读学位论文期间发表论文情况 | 第101页 |