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CpG ODN诱导大蒲莲猪和长白猪免疫特点差异及对PRRSV灭活疫苗免疫力研究

符号说明第5-9页
中文摘要第9-12页
Abstract第12-15页
1 前言第16-37页
    1.1 研究问题的由来第16页
    1.2 抗病力的免疫学和遗传学基础第16-21页
        1.2.1 抗病力的免疫学基础第16-17页
        1.2.2 抗病力的遗传学基础第17-19页
        1.2.3 抗病育种的方法第19页
        1.2.4 猪品种间抗病能力差异第19-21页
    1.3 血液第21-25页
        1.3.1 血液生理生化指标概述第21页
        1.3.2 血液生理生化指标的免疫和遗传能力第21-22页
        1.3.3 外周血单个核细胞及其免疫功能第22-23页
        1.3.4 树突状细胞第23-25页
    1.4 CpG ODN第25-28页
        1.4.1 CpG的命名、基本结构及种属特性第25页
        1.4.2 CpG-ODN的类型及结构特点第25-27页
        1.4.3 CpG ODN的应用第27-28页
    1.5 Toll样受体概述第28-31页
        1.5.1 TLRs的结构、分布及其受体第29页
        1.5.2 TLRs信号传导途径第29-31页
    1.6 高通量测序第31-33页
        1.6.1 高通量测序简介第31-32页
        1.6.2 高通量测序基因组研究第32页
        1.6.3 转录组测序研究第32-33页
    1.7 猪繁殖与呼吸综合征病毒第33-36页
        1.7.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概述第33页
        1.7.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒特点第33页
        1.7.3 致病机理第33-34页
        1.7.4 PRRSV的免疫反应第34-35页
        1.7.5 PRRSV疫苗第35-36页
    1.8 本研究的目的和意义第36-37页
2 材料与方法第37-50页
    2.1 试验材料第37-40页
        2.1.1 试验动物第37页
        2.1.2 细胞和毒株第37页
        2.1.3 主要试剂与药品第37-38页
        2.1.4 主要设备和仪器第38-40页
    2.2 试验方法第40-50页
        2.2.1 血液试验第40页
        2.2.2 CpG ODN刺激和测序第40-45页
        2.2.3 体外CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs第45-47页
        2.2.4 荧光定量 PCR第47页
        2.2.5 树突状细胞分离与培养第47页
        2.2.6 CpG ODN与PRRSV灭活不同组合感染MoDCs试验的试验方法第47-48页
        2.2.7 Western blot验证各实验处理组NF-κB p65蛋白的表达量第48-50页
    2.3 数据分析第50页
3 结果与分析第50-67页
    3.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理生化指标比较第50-51页
        3.1.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理指标比较第50页
        3.1.2 大蒲莲猪和长白猪血液生化指标比较第50-51页
    3.2 CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白后的免疫学指标比较第51页
    3.3 CpG ODN注射后大蒲莲猪和长白猪高通量结果第51-58页
        3.3.1 与参考序列比对结果第51-52页
        3.3.2 皮尔逊相关系数统计结果第52页
        3.3.3 差异表达基因的鉴定和分析第52-55页
        3.3.4 差异表达基因的GO和KEGG通路富集分析第55页
        3.3.5 差异表达基因COG功能分析第55页
        3.3.6 大蒲莲猪和长白猪免疫相关的差异基因鉴定第55-57页
        3.3.7 荧光定量验证高通量结果第57-58页
    3.4 体内qRT-PCR实验基因验证第58-59页
    3.5 大蒲莲猪和长白猪SNP和可变剪切事件分析第59-61页
        3.5.1 SNP统计分第59页
        3.5.2 可变剪切事件分析第59-61页
    3.6 CpG ODN刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs基因验证第61-64页
        3.6.1 TLR9和细胞因子基因表达特点第61-63页
        3.6.2 趋化因子基因表达特点第63-64页
    3.7 CpG ODN增强PRRSV灭活疫苗免疫力第64-67页
        3.7.1 PRRSV和CpG ODN处理MoDC后Th1和Th2细胞因子mRNA表达水平第64-65页
        3.7.2 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合感染MoDCs上清中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子蛋白表达水平第65-66页
        3.7.3 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合孵育MoDCs不同时间后TRIF、MyD88和NF-κB mRNA相对表达量的变化第66-67页
        3.7.4 TLR9配体与PRRSV灭活抗原不同组合孵育MoDCs不同时间后NF-κB P65蛋白相对表达量的变化第67页
4 讨论第67-75页
    4.1 大蒲莲猪和长白猪血液生理生化指标比较第67-68页
    4.2 CpG ODN体外刺激大蒲莲猪和长白猪全血比较第68-69页
    4.3 CpG ODN体内刺激大蒲莲猪和长白猪高通量测序第69-71页
    4.4 CpG ODN体外刺激大蒲莲猪和长白猪PBMCs第71-73页
    4.5 CpG ODN体外增强树突状细胞对PRRSV免疫能力第73-75页
5 结论第75-76页
参考文献第76-98页
附录第98-100页
致谢第100-101页
攻读学位论文期间发表论文情况第101页

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