符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-34页 |
1.1 氟苯尼考研究综述 | 第15-21页 |
1.1.1 氟苯尼考的结构及作用机制 | 第15-17页 |
1.1.2 氟苯尼考的药动学与药效学 | 第17-19页 |
1.1.2.1 抗菌作用 | 第17-18页 |
1.1.2.2 抗炎作用 | 第18-19页 |
1.1.3 氟苯尼考的副作用及不良反应 | 第19-21页 |
1.2 线粒体与线粒体损伤 | 第21-31页 |
1.2.1 线粒体的结构 | 第21-22页 |
1.2.2 线粒体的功能 | 第22-25页 |
1.2.3 线粒体损伤机制 | 第25-27页 |
1.2.4 线粒体损伤与细胞命运 | 第27-31页 |
1.3 细胞周期与增殖调控 | 第31-33页 |
1.4 研究目的与意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-53页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第34-35页 |
2.2 实验仪器 | 第35页 |
2.3 试剂配制 | 第35-36页 |
2.4 实验方法 | 第36-52页 |
2.4.1 细胞准备 | 第36-37页 |
2.4.2 细胞生长曲线检测及绘制 | 第37-38页 |
2.4.3 CCK-8 细胞活力检测 | 第38-39页 |
2.4.4 EdU细胞增殖活性检测 | 第39-40页 |
2.4.5 细胞周期检测 | 第40-41页 |
2.4.6 Annexin V-PE/7-AAD检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
2.4.7 Caspase-3 活性测定 | 第42-43页 |
2.4.8 细胞培养上清中乳酸脱氢酶活性测定 | 第43-44页 |
2.4.9 胞内ATP水平测定 | 第44页 |
2.4.10 线粒体膜电位测定(JC-1 法) | 第44-45页 |
2.4.11 胞内活性氧簇(ROS)水平检测 | 第45-46页 |
2.4.12 线粒体复合体的活性测定 | 第46页 |
2.4.13 蛋白质提取及定量 | 第46-48页 |
2.4.14 蛋白质免疫印迹实验 | 第48-50页 |
2.4.15 LC3蛋白细胞免疫荧光实验 | 第50-51页 |
2.4.16 细胞衰老检测 | 第51页 |
2.4.17 透射电镜检查 | 第51-52页 |
2.4.18 数据统计分析及制图 | 第52页 |
2.5 技术路线 | 第52-53页 |
3 结果及分析 | 第53-68页 |
3.1 氟苯尼考抑制线粒体核糖体的翻译并引起线粒体结构损伤和功能异常 | 第53-56页 |
3.1.1 氟苯尼考抑制线粒体蛋白的表达并导致线粒体结构损伤 | 第53页 |
3.1.2 氟苯尼考诱导线粒体应激 | 第53-54页 |
3.1.3 氟苯尼考导致线粒体功能障碍 | 第54-56页 |
3.2 氟苯尼考能引起细胞增殖活性下降及G0/G1期阻滞 | 第56-58页 |
3.3 氟苯尼考引起的细胞增殖活性下降与其所致线粒体功能障碍有关 | 第58-60页 |
3.4 氟苯尼考的增殖抑制作用与细胞坏死和凋亡无关 | 第60-61页 |
3.5 氟苯尼考导致L细胞增殖抑制作用的分子机制 | 第61-63页 |
3.5.1 氟苯尼考导致的增殖抑制与AMPK/mTOR/p70S6K通路有关 | 第61-63页 |
3.5.2 氟苯尼考导致的增殖抑制过程中也伴随着ROS/p53/p21通路的活化 | 第63页 |
3.6 氟苯尼考导致线粒体自噬异常及衰老相关β-半乳糖苷酶活化 | 第63-66页 |
3.7 氟苯尼考所致线粒体自噬功能异常与Parkin蛋白向线粒体的转位抑制有关 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-74页 |
4.1 氟苯尼考抑制线粒体核糖体后对线粒体结构与功能的影响 | 第68-69页 |
4.2 氟苯尼考诱导的线粒体功能障碍对细胞增殖的抑制作用及其机制 | 第69-70页 |
4.3 细胞凋亡与死亡未参与到氟苯尼考所致的细胞增殖活性下降过程 | 第70-71页 |
4.4 氟苯尼考所致的线粒体损伤与线粒体自噬 | 第71-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
6 参考文献 | 第75-95页 |
7 致谢 | 第95-97页 |
8 个人简介 | 第97-98页 |
9 发表文章 | 第98页 |