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氟苯尼考致小鼠L细胞毒副作用的线粒体途径的研究

符号说明第5-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第15-34页
    1.1 氟苯尼考研究综述第15-21页
        1.1.1 氟苯尼考的结构及作用机制第15-17页
        1.1.2 氟苯尼考的药动学与药效学第17-19页
            1.1.2.1 抗菌作用第17-18页
            1.1.2.2 抗炎作用第18-19页
        1.1.3 氟苯尼考的副作用及不良反应第19-21页
    1.2 线粒体与线粒体损伤第21-31页
        1.2.1 线粒体的结构第21-22页
        1.2.2 线粒体的功能第22-25页
        1.2.3 线粒体损伤机制第25-27页
        1.2.4 线粒体损伤与细胞命运第27-31页
    1.3 细胞周期与增殖调控第31-33页
    1.4 研究目的与意义第33-34页
2 材料与方法第34-53页
    2.1 实验材料及试剂第34-35页
    2.2 实验仪器第35页
    2.3 试剂配制第35-36页
    2.4 实验方法第36-52页
        2.4.1 细胞准备第36-37页
        2.4.2 细胞生长曲线检测及绘制第37-38页
        2.4.3 CCK-8 细胞活力检测第38-39页
        2.4.4 EdU细胞增殖活性检测第39-40页
        2.4.5 细胞周期检测第40-41页
        2.4.6 Annexin V-PE/7-AAD检测细胞凋亡第41-42页
        2.4.7 Caspase-3 活性测定第42-43页
        2.4.8 细胞培养上清中乳酸脱氢酶活性测定第43-44页
        2.4.9 胞内ATP水平测定第44页
        2.4.10 线粒体膜电位测定(JC-1 法)第44-45页
        2.4.11 胞内活性氧簇(ROS)水平检测第45-46页
        2.4.12 线粒体复合体的活性测定第46页
        2.4.13 蛋白质提取及定量第46-48页
        2.4.14 蛋白质免疫印迹实验第48-50页
        2.4.15 LC3蛋白细胞免疫荧光实验第50-51页
        2.4.16 细胞衰老检测第51页
        2.4.17 透射电镜检查第51-52页
        2.4.18 数据统计分析及制图第52页
    2.5 技术路线第52-53页
3 结果及分析第53-68页
    3.1 氟苯尼考抑制线粒体核糖体的翻译并引起线粒体结构损伤和功能异常第53-56页
        3.1.1 氟苯尼考抑制线粒体蛋白的表达并导致线粒体结构损伤第53页
        3.1.2 氟苯尼考诱导线粒体应激第53-54页
        3.1.3 氟苯尼考导致线粒体功能障碍第54-56页
    3.2 氟苯尼考能引起细胞增殖活性下降及G0/G1期阻滞第56-58页
    3.3 氟苯尼考引起的细胞增殖活性下降与其所致线粒体功能障碍有关第58-60页
    3.4 氟苯尼考的增殖抑制作用与细胞坏死和凋亡无关第60-61页
    3.5 氟苯尼考导致L细胞增殖抑制作用的分子机制第61-63页
        3.5.1 氟苯尼考导致的增殖抑制与AMPK/mTOR/p70S6K通路有关第61-63页
        3.5.2 氟苯尼考导致的增殖抑制过程中也伴随着ROS/p53/p21通路的活化第63页
    3.6 氟苯尼考导致线粒体自噬异常及衰老相关β-半乳糖苷酶活化第63-66页
    3.7 氟苯尼考所致线粒体自噬功能异常与Parkin蛋白向线粒体的转位抑制有关第66-68页
4 讨论第68-74页
    4.1 氟苯尼考抑制线粒体核糖体后对线粒体结构与功能的影响第68-69页
    4.2 氟苯尼考诱导的线粒体功能障碍对细胞增殖的抑制作用及其机制第69-70页
    4.3 细胞凋亡与死亡未参与到氟苯尼考所致的细胞增殖活性下降过程第70-71页
    4.4 氟苯尼考所致的线粒体损伤与线粒体自噬第71-74页
5 结论第74-75页
6 参考文献第75-95页
7 致谢第95-97页
8 个人简介第97-98页
9 发表文章第98页

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