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四川阿坝地区药用植物内生拮抗放线菌的筛选及其防病促生机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第15-30页
    1 植物内生菌第15-16页
        1.1 植物内生菌的生态分布第15页
        1.2 植物—内生菌—环境的关系第15-16页
    2 植物内生放线菌第16-21页
        2.1 内生放线菌物种多样性第16-17页
        2.2 植物内生放线菌的分类鉴定第17-19页
            2.2.1 传统分类第18页
            2.2.2 化学分类第18-19页
            2.2.3 分子分类第19页
        2.3 内生放线菌代谢产物第19-21页
    3 内生放线菌生防机制研究第21-27页
        3.1 内生放线菌功能基因筛选第21-23页
            3.1.1 聚酮合酶基因筛选第22页
            3.1.2 非核糖体肽合成酶基因筛选第22-23页
        3.2 内生放线菌对病原菌的影响第23-24页
        3.3 内生放线菌诱导植物系统抗性第24-25页
        3.4 内生放线菌对宿主植物生长发育的影响第25-27页
        3.5 内生放线菌在宿主植物体内的定殖第27页
    4 研究的目的与意义第27-30页
第二章 药用植物内生放线菌的分离及抑菌促生活性筛选第30-47页
    1 材料与方法第30-37页
        1.1 供试材料第30-34页
            1.1.1 药用植物样品第30-31页
            1.1.2 供试植物病原菌第31-32页
            1.1.3 供试培养基及试剂第32-33页
            1.1.4 主要仪器设备第33-34页
        1.2 方法第34-37页
            1.2.1 药用植物样品采集及保存第34页
            1.2.2 药用植物内生放线菌的分离与纯化第34-35页
            1.2.3 内生放线菌的抑菌活性筛选第35-36页
            1.2.4 内生放线菌促生指标筛选第36-37页
    2 结果与分析第37-43页
        2.1 药用植物样品表面消毒处理结果第37页
        2.2 药用植物内生放线菌分离结果第37-40页
            2.2.1 分离培养基对内生放线菌分离数量和种类的影响第37-39页
            2.2.2 药用植物不同部位内生放线菌分离结果第39-40页
        2.3 内生放线菌对植物病原菌的抑菌活性筛选第40-42页
            2.3.1 初筛结果第40-41页
            2.3.2 复筛结果第41-42页
        2.4 药用植物内生拮抗放线菌促生指标筛选结果第42-43页
    3 讨论与结论第43-47页
        3.1 药用植物内生放线菌的分离第43-44页
        3.2 内生放线菌抑菌活性筛选第44-45页
        3.3 内生放线菌促生活性筛选第45-47页
第三章 内生生防放线菌鉴定第47-63页
    1 材料与方法第47-54页
        1.1 供试材料第47-50页
            1.1.1 供试菌株第47页
            1.1.2 供试培养基第47-48页
            1.1.3 试剂第48-49页
            1.1.4 主要仪器设备第49-50页
        1.2 方法第50-54页
            1.2.1 内生拮抗放线菌形态学观察第50页
            1.2.2 内生拮抗放线菌培养特征观察第50页
            1.2.3 内生拮抗放线菌生理生化特性测定第50-52页
            1.2.4 内生拮抗放线菌16S rDNA序列分析第52-54页
    2 结果与分析第54-61页
        2.1 内生放线菌形态学观察结果第54页
        2.2 内生拮抗放线菌培养特征结果第54-57页
        2.3 内生拮抗放线菌3-17、4-21、4-70菌株生理生化鉴定结果第57-58页
        2.4 内生拮抗放线菌16S rDNA序列分析第58-61页
            2.4.1 内生放线菌16S rDNA PCR扩增结果第58-59页
            2.4.2 内生放线菌16S rDNA序列系统发育分析第59-61页
    3 讨论与结论第61-63页
第四章 内生拮抗放线菌功能基因筛选第63-76页
    1 材料与方法第63-66页
        1.1 供试材料第63-64页
            1.1.1 供试菌株菌株第63页
            1.1.2 引物第63页
            1.1.3 试剂第63-64页
        1.2 方法第64-66页
            1.2.1 内生拮抗放线菌总DNA提取第64页
            1.2.2 PKSI、PKS11及NRPS基因的PCR扩增第64-65页
            1.2.3 PCR产物检测与纯化第65页
            1.2.4 回收DNA片段酶连接第65页
            1.2.5 转化第65页
            1.2.6 阳性克隆子检测第65-66页
            1.2.7 序列的比对与分析第66页
    2 结果与分析第66-73页
        2.1 内生放线菌Ⅰ型聚酮合酶PKSⅠ基因的分子筛选第66-69页
        2.2 内生放线菌Ⅱ型聚酮合酶PKSⅡ基因的分子筛选第69-71页
        2.3 内生放线菌非核糖体肽合成酶NRPS基因的分子筛选第71-73页
    3 讨论与结论第73-76页
第五章 内生放线菌与稻瘟病菌的相互作用第76-86页
    1 材料与方法第76-80页
        1.1 材料第76-77页
            1.1.1 供试菌株第76页
            1.1.2 供试培养基第76页
            1.1.3 供试试剂第76-77页
            1.1.4 主要仪器设备第77页
        1.2 方法第77-80页
            1.2.1 内生放线菌发酵液制备第77页
            1.2.2 内生放线菌对稻瘟病菌生长的抑制作用第77-78页
            1.2.3 内生放线菌对稻瘟病菌菌丝形态的影响第78页
            1.2.4 内生放线菌无细胞发酵液对稻瘟病菌生长的抑制作用第78页
            1.2.5 内生放线菌无细胞发酵液对稻瘟病菌孢子萌发的影响第78页
            1.2.6 内生放线菌产水解酶第78-80页
    2 结果与分析第80-84页
        2.1 内生放线菌对稻瘟病菌生长的抑制作用第80-81页
        2.2 内生放线菌对稻瘟病菌菌丝形态的影响第81-82页
        2.3 内生放线菌无细胞发酵液对稻瘟病菌生长的抑制第82-83页
        2.4 内生放线菌无细胞发酵液对稻瘟病菌孢子萌发的影响第83页
        2.5 内生放线菌产水解酶研究第83-84页
    3 讨论与结论第84-86页
第六章 内生放线菌诱导水稻幼苗抗病性第86-109页
    1 材料与方法第86-92页
        1.1 材料第86-87页
            1.1.1 供试菌株第86页
            1.1.2 供试植物第86页
            1.1.3 主要仪器与设备第86-87页
            1.1.4 供试培养基及试剂第87页
        1.2 方法第87-92页
            1.2.1 供试菌株孢子混悬液制备第87-88页
            1.2.2 供试水稻培育及内生放线菌拮抗处理第88页
            1.2.3 离体水稻叶片接种稻瘟病菌试验第88页
            1.2.4 水稻幼苗接种稻瘟病菌第88页
            1.2.5 水稻幼苗防御酶活力测定第88-90页
            1.2.6 荧光定量PCR检测防御基因表达情况第90-92页
    2 结果与分析第92-104页
        2.1 各内生放线菌处理组水稻苗生长情况第92页
        2.2 内生放线菌诱导水稻抗病性离体试验第92-93页
        2.3 内生放线菌处理对水稻防御酶活力的影响第93-97页
            2.3.1 苯丙氨酸解氨酶PAL活性第93-94页
            2.3.2 多酚氧化酶PPO活性第94-95页
            2.3.3 过氧化物酶POD活性第95-96页
            2.3.4 脂氧合酶LOX活性第96页
            2.3.5 丙二烯氧合酶AOS活性第96-97页
        2.4 提取的水稻叶片总RNA的检测结果第97-98页
        2.5 防御酶基因引物特异性检测结果第98页
        2.6 防御基因荧光定量PCR扩增结果第98-99页
        2.7 不同内生放线菌处理对水杨酸信号转导途径的影响第99-102页
        2.8 不同内生放线菌处理对茉莉酮酸/乙烯信号转导途径的影响第102-104页
    3 讨论与结论第104-109页
        3.1 水稻叶片离体抗病效果第104页
        3.2 内生放线菌诱导抗性影响防御酶活性第104-106页
        3.3 内生放线菌诱导相关信号转导途径第106-109页
第七章 内生放线菌对稻瘟病的防病促生效果第109-123页
    1 材料与方法第109-113页
        1.1 供试材料第109-110页
            1.1.1 供试菌株第109页
            1.1.2 供试植物第109页
            1.1.3 主要仪器与设备第109-110页
            1.1.4 主要培养基和试剂第110页
        1.2 方法第110-113页
            1.2.1 供试菌株孢子混悬液制备第110页
            1.2.2 供试水稻及其培育第110页
            1.2.3 试验处理第110-111页
            1.2.4 内生放线菌对水稻稻瘟病的防治效果测定第111页
            1.2.5 水稻幼苗生长指标测定第111-112页
            1.2.6 内生放线菌定殖情况观测第112-113页
    2 结果与分析第113-120页
        2.1 内生放线菌对水稻稻瘟病的盆栽防治效果第113页
        2.2 内生放线菌对盆栽水稻幼苗生长的影响第113-117页
        2.3 水稻幼苗生长参数结果第117-118页
        2.4 各处理组对水稻幼苗叶绿素含量的影响第118-119页
        2.5 各处理组对水稻幼苗根系活力的影响第119-120页
        2.6 回接菌株再分离第120页
    3 讨论与结论第120-123页
第八章 结论与创新点第123-126页
    1 研究结论第123-124页
    2 创新点第124-125页
    3 存在问题及展望第125-126页
参考文献第126-141页
附录第141-142页
致谢第142-143页
攻读博士学位期间发表的文章第143页

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