| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第16-37页 |
| 第一章 肥胖和脂肪组织能量代谢紊乱的研究进展 | 第16-37页 |
| 1.1 肥胖及相关代谢疾病 | 第16-21页 |
| 1.1.1 肥胖与胰岛素抵抗和II型糖尿病 | 第16-18页 |
| 1.1.2 肥胖和NAFLD | 第18-19页 |
| 1.1.3 肥胖与癌症 | 第19-21页 |
| 1.2 脂肪组织与肥胖 | 第21-29页 |
| 1.2.1 白色脂肪组织 | 第22-27页 |
| 1.2.2 棕色脂肪组织 | 第27-29页 |
| 1.3 脂肪细胞与线粒体功能紊乱 | 第29-34页 |
| 1.3.1 线粒体与能量平衡 | 第29页 |
| 1.3.2 线粒体与白色脂肪细胞的功能 | 第29-31页 |
| 1.3.3 脂肪细胞线粒体功能紊乱：诱因和结果 | 第31-33页 |
| 1.3.4 提高线粒体功能的途径 | 第33-34页 |
| 1.4 FH研究进展 | 第34-37页 |
| 1.4.1 常染色体隐性FH缺陷症状 | 第34-35页 |
| 1.4.2 常染色体显性遗传异常HLRCC | 第35页 |
| 1.4.3 FH与脂肪细胞 | 第35-37页 |
| 试验研究 | 第37-97页 |
| 第二章 脂肪组织FH敲除鼠（AFHKO）模型的制备和鉴定 | 第37-47页 |
| 2.1 前言 | 第37页 |
| 2.2 材料与方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第37页 |
| 2.2.2 打靶载体构建 | 第37-38页 |
| 2.2.3 阳性克隆筛选 | 第38-40页 |
| 2.2.4 脂肪组织特异性FH敲除鼠的获得 | 第40页 |
| 2.2.5 尾部基因组DNA提取 | 第40-41页 |
| 2.2.6 AFHKO小鼠基因型鉴定 | 第41页 |
| 2.2.7 反转录实时定量PCR | 第41-42页 |
| 2.2.8 蛋白质免疫印记 | 第42页 |
| 2.2.9 FH酶活和Fumrate测定 | 第42页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第42页 |
| 2.3 结果 | 第42-45页 |
| 2.3.1 FHlox/lox小鼠获得 | 第42页 |
| 2.3.2 AFHKO小鼠的获得和鉴定 | 第42-43页 |
| 2.3.3 AFHKO小鼠脂肪组织FH表达水平 | 第43-44页 |
| 2.3.4 AFHKO小鼠脂肪组织FH酶活下降 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 脂肪组织FH敲除对线粒体功能的影响 | 第47-56页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 材料与方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第47页 |
| 3.2.2 脂肪组织ATP测定 | 第47页 |
| 3.2.3 柠檬酸合成酶酶活测定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 脂肪组织超微结构分析 | 第48页 |
| 3.2.5 脂肪组织DNA提取 | 第48-49页 |
| 3.2.6 反转录Real-time PCR检测 | 第49页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第49页 |
| 3.3 结果 | 第49-54页 |
| 3.3.1 脂肪组织FH敲除引起线粒体形态学显著变化 | 第49-51页 |
| 3.3.2 脂肪组织FH敲除引起ATP水平显著下降 | 第51页 |
| 3.3.3 脂肪组织FH敲除引起mtDNA和CS发生显著变化 | 第51-52页 |
| 3.3.4 脂肪组织FH敲除引起TCA循环和OXPHOS因子表达显著改变 | 第52-54页 |
| 3.3.5 脂肪组织FH敲除改变线粒体生成相关转录因子的表达 | 第54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 AFHKO小鼠抵抗衰老引起的肥胖和胰岛素敏感性下降 | 第56-71页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第56页 |
| 4.2.2 生长曲线测定 | 第56页 |
| 4.2.3 胰岛素耐受性测定（ITT） | 第56页 |
| 4.2.4 葡萄糖耐受性测定（GTT） | 第56页 |
| 4.2.5 血液指标检测 | 第56-57页 |
| 4.2.6 双能X线吸收测定法扫描 | 第57页 |
| 4.2.7 脂肪组织形态学检测 | 第57页 |
| 4.2.8 WB检测脂联素Succination | 第57-58页 |
| 4.2.9 实时定量PCR | 第58-59页 |
| 4.2.10 统计学分析 | 第59页 |
| 4.3 结果 | 第59-68页 |
| 4.3.1 FH脂肪组织敲除鼠抵抗年龄诱导的肥胖 | 第59-60页 |
| 4.3.2 FH敲除引起白色脂肪组织重量减少、细胞直径变小 | 第60-62页 |
| 4.3.3 AFHKO抵抗年龄引起的胰岛素抵抗 | 第62-65页 |
| 4.3.4 FH敲除引起白色和棕色脂肪组织葡萄糖和脂质代谢异常 | 第65-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-70页 |
| 4.4.1 AFHKO小鼠抵抗肥胖 | 第68-69页 |
| 4.4.2 AFHKO白色和棕色脂肪组织表型不一致 | 第69页 |
| 4.4.3 FH敲除引起脂肪组织炎症反应和Adiponectin降低 | 第69-70页 |
| 4.5 小结 | 第70-71页 |
| 第五章 FH基因敲除对小鼠产热能力的影响 | 第71-78页 |
| 5.1 前言 | 第71页 |
| 5.2 材料与方法 | 第71-72页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第71页 |
| 5.2.2 寒冷和饥饿刺激下体温测定 | 第71页 |
| 5.2.3 实时定量PCR | 第71-72页 |
| 5.2.4 蛋白质免疫印迹 | 第72页 |
| 5.2.5 饥饿和CL刺激下的脂解 | 第72页 |
| 5.2.6 统计学分析 | 第72页 |
| 5.3 结果 | 第72-76页 |
| 5.3.1 AFHKO小鼠不能抵抗寒冷和禁食引起的体温下降 | 第72-74页 |
| 5.3.2 AFHKO棕色脂肪组织产热相关基因表达下降 | 第74-75页 |
| 5.3.3 AFHKO小鼠饥饿和CL刺激下脂解正常 | 第75-76页 |
| 5.4 讨论 | 第76-77页 |
| 5.5 小结 | 第77-78页 |
| 第六章 AFHKO小鼠抵抗高脂饮食诱导的肥胖和胰岛素敏感性下降 | 第78-83页 |
| 6.1 前言 | 第78页 |
| 6.2 材料与方法 | 第78-79页 |
| 6.2.1 高脂饮食处理 | 第78页 |
| 6.2.2 ITT和GTT检测 | 第78页 |
| 6.2.3 血液指标检测 | 第78页 |
| 6.2.4 双能X先吸收测定法扫描 | 第78页 |
| 6.2.5 脂肪组织形态学检测 | 第78-79页 |
| 6.2.6 统计学分析 | 第79页 |
| 6.3 结果 | 第79-82页 |
| 6.3.1 AFHKO小鼠抵抗高脂饮食诱导的肥胖 | 第79-81页 |
| 6.3.2 AFHKO小鼠抵抗高脂饮食诱导的胰岛素抵抗 | 第81-82页 |
| 6.4 讨论 | 第82页 |
| 6.5 小结 | 第82-83页 |
| 第七章 脂肪组织FH敲除对肝脏和机体能量代谢的影响 | 第83-90页 |
| 7.1 前言 | 第83页 |
| 7.2 材料与方法 | 第83-84页 |
| 7.2.1 肝脏组织形态学检测 | 第83页 |
| 7.2.2 肝脏内甘油三脂提取及测定 | 第83页 |
| 7.2.3 采食量测定 | 第83页 |
| 7.2.4 间接热量测定 | 第83-84页 |
| 7.2.5 粪便中脂质含量测定 | 第84页 |
| 7.2.6 统计学分析 | 第84页 |
| 7.3 结果 | 第84-88页 |
| 7.3.1 AFHKO小鼠抵抗脂肪肝 | 第84页 |
| 7.3.2 AFHKO小鼠能量代谢情况 | 第84-88页 |
| 7.4 讨论 | 第88-89页 |
| 7.5 小结 | 第89-90页 |
| 第八章 降低脂肪细胞内能量水平抑制甘油三酯合成 | 第90-97页 |
| 8.1 前言 | 第90页 |
| 8.2 材料与方法 | 第90-91页 |
| 8.2.1 试验材料 | 第90页 |
| 8.2.2 白色脂肪细胞的分离 | 第90-91页 |
| 8.2.3 脂肪细胞ATP测定 | 第91页 |
| 8.3 结果 | 第91-94页 |
| 8.3.1 AFHKO白色脂肪细胞甘油三脂合成能力下降 | 第91-92页 |
| 8.3.2 线粒体呼吸链抑制剂降低ATP水平且抑制甘油三脂合成 | 第92-94页 |
| 8.4 讨论 | 第94-96页 |
| 8.5 小结 | 第96-97页 |
| 研究结论 | 第97-98页 |
| 创新点 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 缩略词 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 个人简介 | 第118-119页 |
