摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第14-29页 |
1.1 蓝藻毒素的种类 | 第14-15页 |
1.2 微囊藻毒素 | 第15-17页 |
1.2.1 微囊藻毒素的结构 | 第15页 |
1.2.2 微囊藻毒素的理化特性 | 第15-16页 |
1.2.3 微囊藻毒素的毒性机理 | 第16-17页 |
1.3 微囊藻毒素及其代谢产物的检测研究 | 第17-18页 |
1.4 微囊藻毒素在水生生物体内不同组织累积规律及代谢机理研究 | 第18-20页 |
1.5 微囊藻毒素对水生生物致毒效应研究 | 第20-23页 |
1.5.1 微囊藻毒素对水生生物胚胎和早期发育毒性的作用 | 第20页 |
1.5.2 微囊藻毒素对水生生物组织器官的影响 | 第20-21页 |
1.5.3 微囊藻毒素对水生生物免疫相关酶及基因表达的影响 | 第21-23页 |
1.6 水生生物有效去除微囊藻毒素途径 | 第23-25页 |
1.7 Illumina测序技术在生态毒理学研究中的应用 | 第25-27页 |
1.7.1 Illumina测序技术简介 | 第25-26页 |
1.7.2 Illumina测序技术在生态毒理学研究中的应用 | 第26-27页 |
1.8 克氏原螯虾和日本沼虾 | 第27页 |
1.9 研究的目的与意义 | 第27-29页 |
第二章 MC-LR在克氏原螯虾和日本沼虾累积净化规律研究 | 第29-36页 |
2.1 实验材料 | 第29-30页 |
2.1.1 实验动物 | 第29页 |
2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
2.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.1 暴露试验 | 第30-31页 |
2.2.2 样品中MC-LR含量的测定 | 第31-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-34页 |
2.3.1 MC-LR在克氏原螯虾体内的累积净化规律 | 第32-33页 |
2.3.2 MC-LR在日本沼虾体内的累积净化规律 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三章 克氏原螯虾和日本沼虾免疫、代谢相关酶基因的克隆 | 第36-57页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 实验动物 | 第36页 |
3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
3.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
3.1.4 主要实验溶液及配制 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-47页 |
3.2.1 克氏原螯虾cat和日本沼虾cat、gst基因全长cDNA的克隆 | 第37-45页 |
3.2.2 测序结果的生物信息学分析 | 第45-46页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第46-47页 |
3.2.4 qRT-PCR检测Pc-cat和Mn-cat、Mn-gst合成相关基因的组织表达特异性 | 第47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-55页 |
3.3.1 Pc-cat和Mn-cat、Mn-gst基因cDNA全长的序列结构分析 | 第47-53页 |
3.3.2 组织分布 | 第53-55页 |
3.4 讨论 | 第55-56页 |
3.5 小结 | 第56-57页 |
第四章 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关酶、代谢相关酶及基因表达的影响和肝胰腺组织损伤研究 | 第57-80页 |
4.1 实验材料 | 第57-58页 |
4.1.1 实验动物 | 第57页 |
4.1.2 仪器和试剂 | 第57-58页 |
4.2 实验方法 | 第58-63页 |
4.2.1 暴露实验 | 第58页 |
4.2.2 酶活检测 | 第58-60页 |
4.2.3 相关基因表达的检测 | 第60-61页 |
4.2.4 组织石蜡切片的制备与观察 | 第61-62页 |
4.2.5 透射电镜样品制备 | 第62-63页 |
4.3 结果与分析 | 第63-77页 |
4.3.1 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关活性的影响 | 第63-65页 |
4.3.2 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关酶基因表达的影响 | 第65-71页 |
4.3.3 不同浓度MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾肝胰腺结构的影响 | 第71-77页 |
4.4 讨论 | 第77-79页 |
4.5 小结 | 第79-80页 |
第五章 克氏原螯虾和日本沼虾体在MC-LR胁迫下解毒机理研究 | 第80-91页 |
5.1 实验材料 | 第80-81页 |
5.1.1 实验动物 | 第80页 |
5.1.2 仪器和试剂 | 第80-81页 |
5.2 实验方法 | 第81-82页 |
5.2.1 暴露实验 | 第81页 |
5.2.2 酶活检测 | 第81页 |
5.2.3 相关基因表达的检测 | 第81-82页 |
5.3 结果与分析 | 第82-88页 |
5.3.1 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅰ相解毒酶及其相关基因表达的影响 | 第82-85页 |
5.3.2 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅱ相解毒酶及其相关基因表达的影响 | 第85-87页 |
5.3.3 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅲ相代谢基因表达的影响 | 第87-88页 |
5.4 讨论 | 第88-90页 |
5.5 小结 | 第90-91页 |
第六章 高通量测序技术分析MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾转录组影响研究 | 第91-117页 |
6.1 实验材料 | 第91-92页 |
6.1.1 实验动物 | 第91页 |
6.1.2 实验试剂 | 第91-92页 |
6.1.3 实验仪器 | 第92页 |
6.1.4 实验溶剂及配制 | 第92页 |
6.2 实验方法 | 第92-96页 |
6.2.1 暴露试验 | 第92页 |
6.2.2 总RNA的提取 | 第92页 |
6.2.3 总RNA质量检测 | 第92页 |
6.2.4 克氏原螯虾和日本沼虾cDNA文库的构建、检测及测序 | 第92-93页 |
6.2.5 数据分析 | 第93-96页 |
6.3 实验结果 | 第96-113页 |
6.3.1 肝胰腺中RNA质量检测 | 第96-97页 |
6.3.2 克氏原螯虾和日本沼虾肝胰腺基因表达谱数据 | 第97-98页 |
6.3.3 DGE序列分布规律 | 第98页 |
6.3.4 差异基因筛选 | 第98-103页 |
6.3.5 MC-LR诱导下克氏原螯虾和日本沼虾差异基因GO通路分析 | 第103-109页 |
6.3.6 MC-LR诱导下诱导下克氏原螯虾和日本沼虾差异基因KEGG通路分析 | 第109-111页 |
6.3.7 qRT-PCR验证 | 第111-113页 |
6.4 讨论 | 第113-116页 |
6.4.1 MC-LR胁迫下克氏原螯虾和日本沼虾转录组的变化 | 第113页 |
6.4.2 MC-LR暴露对克氏原螯虾和日本沼虾细胞凋亡相关基因的影响 | 第113-115页 |
6.4.3 MC-LR暴露对克氏原螯虾和日本沼虾谷胱甘肽代谢相关基因的影响 | 第115-116页 |
6.5 小结 | 第116-117页 |
第七章 结论、创新点与展望 | 第117-118页 |
7.1 结论 | 第117页 |
7.2 创新点 | 第117页 |
7.3 进一步实验计划 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-133页 |
缩略语 | 第133-135页 |
附表 | 第135-141页 |
附录 | 第141-148页 |
致谢 | 第148-149页 |
作者简介 | 第149页 |