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克氏原螯虾和日本沼虾体内微囊藻毒素累积净化规律研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 前言第14-29页
    1.1 蓝藻毒素的种类第14-15页
    1.2 微囊藻毒素第15-17页
        1.2.1 微囊藻毒素的结构第15页
        1.2.2 微囊藻毒素的理化特性第15-16页
        1.2.3 微囊藻毒素的毒性机理第16-17页
    1.3 微囊藻毒素及其代谢产物的检测研究第17-18页
    1.4 微囊藻毒素在水生生物体内不同组织累积规律及代谢机理研究第18-20页
    1.5 微囊藻毒素对水生生物致毒效应研究第20-23页
        1.5.1 微囊藻毒素对水生生物胚胎和早期发育毒性的作用第20页
        1.5.2 微囊藻毒素对水生生物组织器官的影响第20-21页
        1.5.3 微囊藻毒素对水生生物免疫相关酶及基因表达的影响第21-23页
    1.6 水生生物有效去除微囊藻毒素途径第23-25页
    1.7 Illumina测序技术在生态毒理学研究中的应用第25-27页
        1.7.1 Illumina测序技术简介第25-26页
        1.7.2 Illumina测序技术在生态毒理学研究中的应用第26-27页
    1.8 克氏原螯虾和日本沼虾第27页
    1.9 研究的目的与意义第27-29页
第二章 MC-LR在克氏原螯虾和日本沼虾累积净化规律研究第29-36页
    2.1 实验材料第29-30页
        2.1.1 实验动物第29页
        2.1.2 实验试剂第29页
        2.1.3 实验仪器第29-30页
    2.2 实验方法第30-32页
        2.2.1 暴露试验第30-31页
        2.2.2 样品中MC-LR含量的测定第31-32页
    2.3 结果与分析第32-34页
        2.3.1 MC-LR在克氏原螯虾体内的累积净化规律第32-33页
        2.3.2 MC-LR在日本沼虾体内的累积净化规律第33-34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 小结第35-36页
第三章 克氏原螯虾和日本沼虾免疫、代谢相关酶基因的克隆第36-57页
    3.1 实验材料第36-37页
        3.1.1 实验动物第36页
        3.1.2 实验试剂第36页
        3.1.3 实验仪器第36-37页
        3.1.4 主要实验溶液及配制第37页
    3.2 实验方法第37-47页
        3.2.1 克氏原螯虾cat和日本沼虾cat、gst基因全长cDNA的克隆第37-45页
        3.2.2 测序结果的生物信息学分析第45-46页
        3.2.3 实时荧光定量PCR引物的设计与合成第46-47页
        3.2.4 qRT-PCR检测Pc-cat和Mn-cat、Mn-gst合成相关基因的组织表达特异性第47页
    3.3 结果与分析第47-55页
        3.3.1 Pc-cat和Mn-cat、Mn-gst基因cDNA全长的序列结构分析第47-53页
        3.3.2 组织分布第53-55页
    3.4 讨论第55-56页
    3.5 小结第56-57页
第四章 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关酶、代谢相关酶及基因表达的影响和肝胰腺组织损伤研究第57-80页
    4.1 实验材料第57-58页
        4.1.1 实验动物第57页
        4.1.2 仪器和试剂第57-58页
    4.2 实验方法第58-63页
        4.2.1 暴露实验第58页
        4.2.2 酶活检测第58-60页
        4.2.3 相关基因表达的检测第60-61页
        4.2.4 组织石蜡切片的制备与观察第61-62页
        4.2.5 透射电镜样品制备第62-63页
    4.3 结果与分析第63-77页
        4.3.1 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关活性的影响第63-65页
        4.3.2 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾免疫相关酶基因表达的影响第65-71页
        4.3.3 不同浓度MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾肝胰腺结构的影响第71-77页
    4.4 讨论第77-79页
    4.5 小结第79-80页
第五章 克氏原螯虾和日本沼虾体在MC-LR胁迫下解毒机理研究第80-91页
    5.1 实验材料第80-81页
        5.1.1 实验动物第80页
        5.1.2 仪器和试剂第80-81页
    5.2 实验方法第81-82页
        5.2.1 暴露实验第81页
        5.2.2 酶活检测第81页
        5.2.3 相关基因表达的检测第81-82页
    5.3 结果与分析第82-88页
        5.3.1 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅰ相解毒酶及其相关基因表达的影响第82-85页
        5.3.2 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅱ相解毒酶及其相关基因表达的影响第85-87页
        5.3.3 MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾Ⅲ相代谢基因表达的影响第87-88页
    5.4 讨论第88-90页
    5.5 小结第90-91页
第六章 高通量测序技术分析MC-LR对克氏原螯虾和日本沼虾转录组影响研究第91-117页
    6.1 实验材料第91-92页
        6.1.1 实验动物第91页
        6.1.2 实验试剂第91-92页
        6.1.3 实验仪器第92页
        6.1.4 实验溶剂及配制第92页
    6.2 实验方法第92-96页
        6.2.1 暴露试验第92页
        6.2.2 总RNA的提取第92页
        6.2.3 总RNA质量检测第92页
        6.2.4 克氏原螯虾和日本沼虾cDNA文库的构建、检测及测序第92-93页
        6.2.5 数据分析第93-96页
    6.3 实验结果第96-113页
        6.3.1 肝胰腺中RNA质量检测第96-97页
        6.3.2 克氏原螯虾和日本沼虾肝胰腺基因表达谱数据第97-98页
        6.3.3 DGE序列分布规律第98页
        6.3.4 差异基因筛选第98-103页
        6.3.5 MC-LR诱导下克氏原螯虾和日本沼虾差异基因GO通路分析第103-109页
        6.3.6 MC-LR诱导下诱导下克氏原螯虾和日本沼虾差异基因KEGG通路分析第109-111页
        6.3.7 qRT-PCR验证第111-113页
    6.4 讨论第113-116页
        6.4.1 MC-LR胁迫下克氏原螯虾和日本沼虾转录组的变化第113页
        6.4.2 MC-LR暴露对克氏原螯虾和日本沼虾细胞凋亡相关基因的影响第113-115页
        6.4.3 MC-LR暴露对克氏原螯虾和日本沼虾谷胱甘肽代谢相关基因的影响第115-116页
    6.5 小结第116-117页
第七章 结论、创新点与展望第117-118页
    7.1 结论第117页
    7.2 创新点第117页
    7.3 进一步实验计划第117-118页
参考文献第118-133页
缩略语第133-135页
附表第135-141页
附录第141-148页
致谢第148-149页
作者简介第149页

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