符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-33页 |
·家蚕神经系统研究进展 | 第14-16页 |
·家蚕神经系统的组成 | 第14-16页 |
·家蚕神经系统的功能 | 第16页 |
·神经轴突导向因子Robo的功能及其分子作用机制研究进展 | 第16-31页 |
·Robo蛋白的结构 | 第17-19页 |
·Robo的主要功能 | 第19-23页 |
·对神经轴突生长和神经细胞迁移的导向作用 | 第19-20页 |
·在血管形成中的作用 | 第20-21页 |
·在肿瘤发生发展中的作用 | 第21页 |
·在白细胞趋化和免疫反应中的作用 | 第21-22页 |
·在肾脏和肺脏发育中的作用 | 第22-23页 |
·Robo的分子作用机制 | 第23-28页 |
·Robo与其配体Slit结合机制 | 第23-24页 |
·Robo与硫酸肝素蛋白多糖的互作 | 第24页 |
·Robo与GTP酶激活蛋白的互作 | 第24-25页 |
·Robo与酪氨酸激酶Ableson(Abl)的互作 | 第25-26页 |
·Robo和参与Robo-Slit信号通路其它小分子的互作 | 第26页 |
·Robo/Slit和Netrin/Dcc信号通路的相互作用 | 第26-28页 |
·Robo的表达调控机制 | 第28-31页 |
·转录水平的调控 | 第29-30页 |
·转录后水平的调控 | 第30-31页 |
·Robo的进化研究 | 第31-32页 |
·本研究的目的与意义 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-55页 |
·实验材料 | 第33-39页 |
·生化试剂及相关试剂配制 | 第33-35页 |
·试剂及试剂盒 | 第33-35页 |
·相关试剂的配制 | 第35-37页 |
·质粒和菌株 | 第37页 |
·生物信息学分析所用网站和软件 | 第37页 |
·PCR引物 | 第37-39页 |
·实验方法 | 第39-55页 |
·Bmrobo基因的鉴定 | 第39页 |
·家蚕总RNA的提取 | 第39-40页 |
·cDNA第一链的合成 | 第40-42页 |
·PCR反应和RACE | 第42-43页 |
·DNA目的片段的琼脂糖凝胶回收 | 第43页 |
·连接反应 | 第43-44页 |
·连接产物的转化 | 第44页 |
·重组质粒的筛选与测序 | 第44-45页 |
·质粒DNA的提取 | 第45-46页 |
·抗原片段的DNA序列选择与PCR扩增 | 第46页 |
·原核表达载体的构建 | 第46-47页 |
·重组质粒的原核表达 | 第47页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第47-49页 |
·重组蛋白的纯化 | 第49-50页 |
·家兔多克隆抗体的制备 | 第50页 |
·ELISA检测 | 第50页 |
·Western blotting检测 | 第50-51页 |
·免疫荧光染色 | 第51-52页 |
·RNAi dsRNA的制备 | 第52-54页 |
·显微注射 | 第54-55页 |
3 结果与分析 | 第55-68页 |
·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 的克隆与分析 | 第55-61页 |
·Bmrobo1a基因的克隆 | 第55-56页 |
·Bmrobo1b基因的克隆 | 第56-57页 |
·Bmrobo2/3 基因的克隆 | 第57页 |
·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的序列分析 | 第57-59页 |
·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的系统发育分析 | 第59-61页 |
·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 的抗体制备 | 第61-64页 |
·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 的抗原制备 | 第61-63页 |
·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 多克隆抗体效价的检测 | 第63-64页 |
·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 的组织定位 | 第64-66页 |
·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的RNAi研究 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读学位期间获得奖励和发表论文情况 | 第82页 |