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家蚕神经轴突导向因子Robo的功能研究

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第14-33页
   ·家蚕神经系统研究进展第14-16页
     ·家蚕神经系统的组成第14-16页
     ·家蚕神经系统的功能第16页
   ·神经轴突导向因子Robo的功能及其分子作用机制研究进展第16-31页
     ·Robo蛋白的结构第17-19页
     ·Robo的主要功能第19-23页
       ·对神经轴突生长和神经细胞迁移的导向作用第19-20页
       ·在血管形成中的作用第20-21页
       ·在肿瘤发生发展中的作用第21页
       ·在白细胞趋化和免疫反应中的作用第21-22页
       ·在肾脏和肺脏发育中的作用第22-23页
     ·Robo的分子作用机制第23-28页
       ·Robo与其配体Slit结合机制第23-24页
       ·Robo与硫酸肝素蛋白多糖的互作第24页
       ·Robo与GTP酶激活蛋白的互作第24-25页
       ·Robo与酪氨酸激酶Ableson(Abl)的互作第25-26页
       ·Robo和参与Robo-Slit信号通路其它小分子的互作第26页
       ·Robo/Slit和Netrin/Dcc信号通路的相互作用第26-28页
     ·Robo的表达调控机制第28-31页
       ·转录水平的调控第29-30页
       ·转录后水平的调控第30-31页
   ·Robo的进化研究第31-32页
   ·本研究的目的与意义第32-33页
2 材料与方法第33-55页
   ·实验材料第33-39页
     ·生化试剂及相关试剂配制第33-35页
       ·试剂及试剂盒第33-35页
     ·相关试剂的配制第35-37页
     ·质粒和菌株第37页
     ·生物信息学分析所用网站和软件第37页
     ·PCR引物第37-39页
   ·实验方法第39-55页
     ·Bmrobo基因的鉴定第39页
     ·家蚕总RNA的提取第39-40页
     ·cDNA第一链的合成第40-42页
     ·PCR反应和RACE第42-43页
     ·DNA目的片段的琼脂糖凝胶回收第43页
     ·连接反应第43-44页
     ·连接产物的转化第44页
     ·重组质粒的筛选与测序第44-45页
     ·质粒DNA的提取第45-46页
     ·抗原片段的DNA序列选择与PCR扩增第46页
     ·原核表达载体的构建第46-47页
     ·重组质粒的原核表达第47页
     ·SDS-PAGE电泳第47-49页
     ·重组蛋白的纯化第49-50页
     ·家兔多克隆抗体的制备第50页
     ·ELISA检测第50页
     ·Western blotting检测第50-51页
     ·免疫荧光染色第51-52页
     ·RNAi dsRNA的制备第52-54页
     ·显微注射第54-55页
3 结果与分析第55-68页
   ·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 的克隆与分析第55-61页
     ·Bmrobo1a基因的克隆第55-56页
     ·Bmrobo1b基因的克隆第56-57页
     ·Bmrobo2/3 基因的克隆第57页
     ·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的序列分析第57-59页
     ·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的系统发育分析第59-61页
   ·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 的抗体制备第61-64页
     ·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 的抗原制备第61-63页
     ·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 多克隆抗体效价的检测第63-64页
   ·BmRobo1a、BmRobo1b和BmRobo2/3 的组织定位第64-66页
   ·Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3 基因的RNAi研究第66-68页
4 讨论第68-71页
5 结论第71-72页
参考文献第72-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间获得奖励和发表论文情况第82页

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