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产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体的制备及鉴定

符号说明第1-9页
中文摘要第9-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-19页
   ·产气荚膜梭菌介绍第12-13页
   ·产气荚膜梭菌主要毒素的介绍第13-18页
     ·α毒素第13-14页
     ·β毒素第14-16页
       ·β1 毒素第14-16页
       ·β2 毒素第16页
     ·ε 毒素第16-17页
     ·ι 毒素第17-18页
   ·本课题的研究目的及意义第18-19页
2 材料与方法第19-34页
   ·材料第19-22页
     ·主要的试剂及溶液的配制第19-21页
     ·主要试验仪器第21页
     ·菌株材料和实验动物第21-22页
   ·β毒素的制备第22页
     ·重组β毒素表达载体的验证第22页
     ·β毒素基因的原核表达第22页
   ·β毒素的纯化第22-24页
   ·β毒素的SDS-PAGE分析第24-25页
   ·重组β毒素蛋白的鉴定第25-26页
   ·BALB/c小鼠的免疫第26-27页
   ·间接ELISA法检测免疫后小鼠血清的抗体效价第27-28页
   ·杂交瘤细胞株的建立第28-29页
     ·骨髓瘤细胞(Sp2/0)的准备第28页
     ·脾细胞的准备第28页
     ·准备饲养细胞第28页
     ·细胞的融合第28页
     ·杂交瘤细胞的筛选第28页
     ·杂交瘤细胞克隆化培养第28-29页
     ·杂交瘤细胞扩大培养及冻存第29页
     ·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体稳定性的测定第29页
   ·单克隆抗体的亚类鉴定第29页
   ·单克隆抗体腹水制备第29页
   ·单克隆抗体的纯化第29-30页
   ·单克隆抗体的特性鉴定第30-34页
     ·腹水中单克隆抗体效价的测定第30-31页
     ·单抗特异性的验证第31页
     ·单克隆抗体反应原性测定第31-34页
3.结果和分析第34-41页
   ·β毒素的制备第34页
     ·重组β毒素表达载体的验证第34页
     ·β毒素基因的原核表达第34页
   ·提纯后的β毒素的SDS-PAGE电泳分析及蛋白浓度的测定第34-35页
   ·β毒素蛋白的验证第35-36页
   ·免疫后小鼠血清中抗体效价检测结果第36页
   ·杂交瘤细胞株的建立第36页
   ·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体稳定性测定第36-37页
   ·单克隆抗体亚类鉴定第37页
   ·单克隆抗体的纯化及浓度测定第37-38页
   ·单克隆抗体的特性鉴定第38-41页
     ·腹水中单抗体效价的测定第38页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第38-39页
     ·Western Blot实验结果第39-41页
       ·单克隆抗体与重组β毒素的反应性第39-40页
       ·单克隆抗体与天然粗提β毒素的反应性第40-41页
4.讨论第41-43页
   ·β毒素的原核表达第41页
   ·β毒素单克隆抗体的制备和鉴定第41-42页
   ·单克隆抗体的纯化方法第42-43页
5 结论第43-44页
参考文献第44-49页
致谢第49-50页
攻读学位期间发表论文情况第50页

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