| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述及背景 | 第13-23页 |
| 1 NDV研究背景简介 | 第13-14页 |
| 2 RIG-I样受体信号通路及其调控研究进展 | 第14-23页 |
| ·RLRs介导的抗病毒信号通路 | 第14-15页 |
| ·RLRs介导的信号转导反应 | 第15-16页 |
| ·RLR通路的泛素化 | 第16-17页 |
| ·病毒干扰RLRs介导的信号转导反应 | 第17-19页 |
| ·NLRs对RLR信号通路的影响 | 第19-20页 |
| ·总结 | 第20-23页 |
| 第二章 NDV感染细胞诱导MAVS的降解 | 第23-31页 |
| 1 材料和方法 | 第23-26页 |
| ·毒株和细胞系 | 第23页 |
| ·试剂和仪器 | 第23-24页 |
| ·Herts/33、ZJ1、La Sota感染HeLa或A549细胞 | 第24页 |
| ·UV灭活NDV | 第24页 |
| ·样品的Western Blot分析 | 第24-25页 |
| ·细胞总RNA的提取(Trizol法)及Real-time PCR | 第25-26页 |
| 2 结果和分析 | 第26-29页 |
| ·Herts/33感染HeLa和A549细胞 | 第26-27页 |
| ·ZJ1和La Sota感染HeLa细胞 | 第27页 |
| ·UV灭活的Herts/33不能诱导MAVS的降解和IFN-β的产生 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 NDV通过PCBP2非依赖途径诱导MAVS降解 | 第31-41页 |
| 1 材料和方法 | 第31-34页 |
| ·毒株和细胞系 | 第31页 |
| ·载体及分子生物学相关试剂 | 第31-32页 |
| ·试剂和仪器 | 第32页 |
| ·Herts/33、ZJ1、La Sota、GFP-NDV感染HeLa或A549细胞 | 第32页 |
| ·细胞内PCBP2的干扰 | 第32-33页 |
| ·HA-PCBP2真核表达载体的构建 | 第33页 |
| ·质粒转染HeLa细胞 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-39页 |
| ·Herts/33感染HeLa和A549细胞 | 第34-35页 |
| ·ZJ1和La Sota感染HeLa细胞 | 第35页 |
| ·PCBP2干扰条件的摸索 | 第35-36页 |
| ·敲低PCBP2之后对细胞内病毒复制的影响 | 第36-38页 |
| ·HA-PCBP2真核表达质粒的构建 | 第38-39页 |
| ·转染PCBP2对MAVS的影响 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 NDV通过蛋白酶体途径诱导MAVS的降解 | 第41-47页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·细胞与毒株 | 第41页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统抑制剂 | 第41页 |
| ·试剂和仪器 | 第41-42页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统抑制剂处理细胞 | 第42页 |
| ·TCID50(病毒感染力)的测定 | 第42页 |
| ·细胞总RNA的提取(Trizol法)及Real-time PCR | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| ·泛素-蛋白酶体抑制剂的选择 | 第43-44页 |
| ·MG132处理后对病毒滴度的影响 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 NDV病毒蛋白对MAVS降解的检测 | 第47-53页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·质粒和细胞 | 第47页 |
| ·载体及分子生物学相关试剂 | 第47-48页 |
| ·ZJ1 HA-P/W、Flag-V真核表达质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·质粒转染HeLa细胞 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·HA-P/W、Flag-V真核表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·转染Flag-P/M/NP、HA-P/W后MAVS表达水平的变化 | 第50-51页 |
| ·转染Flag-ZJ V后MAVS表达水平的变化 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 全文总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
