| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白生物学结构与免疫抑制机制研究进展 | 第12-38页 |
| 1 病毒蛋白生物学结构 | 第12-20页 |
| ·病毒基因组结构与复制 | 第12-14页 |
| ·病毒结构蛋白与生物学结构 | 第14-18页 |
| ·病毒非结构蛋白与生物学结构 | 第18-20页 |
| 2 病毒免疫抑制与分子机理 | 第20-28页 |
| ·Ⅰ型干扰素信号通路及PRRSV对其抑制作用 | 第20-26页 |
| ·白细胞介素-10及PRRSV对其诱生作用 | 第26-28页 |
| 参考文献 | 第28-38页 |
| 第二章 PRRSV 3个非结构蛋白对TLR3启动子活性的影响及其机理 | 第38-62页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料和方法 | 第39-49页 |
| ·菌株、质粒、细胞 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第39-43页 |
| ·目的基因真核质粒表达与鉴定 | 第43-45页 |
| ·PRRSV NSPs对TLR3启动子活性的影响 | 第45-46页 |
| ·不同剂量Nsp11对TLR3启动子活性的影响 | 第46-47页 |
| ·PRRSV Nsp11对IFN-β启动子活性的影响 | 第47页 |
| ·Ⅰ型干扰素对TLR3启动子活性的影响 | 第47-48页 |
| ·Nsp11对INF-β诱导TLR3启动子活性的影响 | 第48-49页 |
| ·数据统计分析 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-55页 |
| ·非结构蛋白基因的扩增 | 第49页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·目的基因在BHK-21细胞中的表达与鉴定 | 第50-51页 |
| ·PRRSV NSPs对TLR3启动子活性的影响 | 第51-52页 |
| ·Nsp11对TLR3启动子活性呈剂量依赖性抑制 | 第52-53页 |
| ·Nsp11对IFN-β启动子活性的抑制 | 第53页 |
| ·Ⅰ型干扰素可以激发TLR3启动子活性 | 第53-54页 |
| ·Nsp11以抑制INF-β诱导下的TLR3启动子活性 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| ABSTRACT | 第60-62页 |
| 第三章 PRRSV结构蛋白的真核表达及其对IL-10启动子活性的影响 | 第62-74页 |
| 摘要 | 第62-63页 |
| 1 材料和方法 | 第63-67页 |
| ·菌株、质粒、细胞 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第63-65页 |
| ·目的基因真核质粒表达与鉴定 | 第65-66页 |
| ·PRRSV结构蛋白对IL-10启动子活性的影响 | 第66-67页 |
| ·数据统计分析 | 第67页 |
| 2 结果 | 第67-70页 |
| ·PRRSV结构蛋白基因PCR扩增 | 第67-68页 |
| ·重组真核表达质粒的酶切鉴定 | 第68页 |
| ·PRRSV结构蛋白基因的表达与鉴定 | 第68-69页 |
| ·PRRSV结构蛋白对IL-10启动子活性的影响 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| ABSTRACT | 第73-74页 |
| 第四章 PRRSV NSP4和NSP7及NSP12基因疫苗的构建与小鼠免疫特性 | 第74-96页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| 1 材料与方法 | 第75-84页 |
| ·病毒、菌株、质粒、细胞与实验动物 | 第75页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第75-79页 |
| ·目的基因的真核表达与鉴定 | 第79页 |
| ·免疫用重组真核表达质粒的制备 | 第79-80页 |
| ·Nsp4、Nsp7和Nsp12基因大肠杆菌表达与纯化抗原的制备 | 第80-82页 |
| ·小鼠免疫实验 | 第82页 |
| ·抗体效价的测定 | 第82-83页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第83-84页 |
| ·细胞因子的测定 | 第84页 |
| 2 结果 | 第84-91页 |
| ·Nsp4、Nsp7和Nsp12及GM-CSF基因的扩增 | 第84页 |
| ·Nsp4、Nsp7和Nsp12重组真核表达载体酶切鉴定 | 第84-85页 |
| ·Nsp4、Nsp7和Nsp12真核表达与鉴定 | 第85-87页 |
| ·目的基因原核表达与纯化蛋白制各 | 第87-89页 |
| ·免疫小鼠ELISA抗体水平 | 第89页 |
| ·免疫小鼠淋巴细胞转化增殖刺激指数 | 第89-90页 |
| ·细胞因子的测定 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-94页 |
| ABSTRACT | 第94-96页 |
| 全文总结 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
