| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| ·前言 | 第10-11页 |
| ·黄芩及其生物学特征 | 第10页 |
| ·黄芩的品种及分布 | 第10-11页 |
| ·黄芩的主要化学成分 | 第11-13页 |
| ·黄酮类化合物 | 第11-12页 |
| ·二萜类 | 第12页 |
| ·挥发油类 | 第12页 |
| ·微量元素 | 第12页 |
| ·其他主要成分 | 第12-13页 |
| ·黄酮类化合物的药理作用 | 第13-15页 |
| ·抗菌抗病毒作用 | 第13页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第13页 |
| ·抗心脑血管疾病作用 | 第13-14页 |
| ·抗氧化自由基作用 | 第14页 |
| ·保肝护肝作用 | 第14页 |
| ·其他药理学作用 | 第14-15页 |
| ·黄酮类化合物的合成代谢 | 第15-17页 |
| ·黄酮类化合物的合成代谢途径 | 第15-17页 |
| ·黄芩黄酮合成途径中的关键酶 | 第17页 |
| ·植物黄酮合酶及其基因的研究现状 | 第17-19页 |
| ·黄酮合酶Ⅰ/黄酮合酶Ⅱ的发现及研究 | 第18-19页 |
| ·黄酮合酶Ⅰ/黄酮合酶Ⅱ的酶促反应机制 | 第19页 |
| ·本课题的目的及研究意义 | 第19-20页 |
| ·本课题实验方案 | 第20-21页 |
| 第二章 黄芩基因组DNA的提取及FNSⅡ基因扩增引物的筛选 | 第21-31页 |
| ·材料和试剂 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·试剂的制备 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·黄芩基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·制备 1.1%琼脂糖凝胶与电泳 | 第23页 |
| ·设计引物 | 第23-24页 |
| ·两对引物退火温度的初步优化 | 第24-25页 |
| ·FNSⅡ基因扩增反应体系的优化 | 第25-26页 |
| ·结果分析 | 第26-30页 |
| ·黄芩基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·FNSⅡ基因扩增条件的优化结果与分析 | 第27-30页 |
| ·对两对引物退火温度梯度优化 | 第27-28页 |
| ·FNSⅡ基因扩增条件的进一步优化 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 黄芩叶片组织总RNA的提取及RT-PCR扩增 | 第31-39页 |
| ·材料、仪器及试剂 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·试剂的制备 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·实验步骤和方法 | 第32-36页 |
| ·提取黄芩叶片总RNA | 第32-33页 |
| ·处理实验所需材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增 | 第33-35页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·回收目的片段 | 第35-36页 |
| ·扩增产物 1.1%琼脂糖凝胶检测 | 第35页 |
| ·目的片段的回收与检测 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·黄芩盛花期叶片总RNA的提取结果 | 第36页 |
| ·目的片段RT-PCR扩增结果分析 | 第36-37页 |
| ·目的片段的回收与检测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 重组质粒的转化与鉴定 | 第39-49页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·菌种与载体 | 第39页 |
| ·酶及化学试剂 | 第39页 |
| ·试剂盒 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·培养基的制备 | 第40-41页 |
| ·LB培养基的制备 | 第40页 |
| ·SOB/SOC液体培养基的制备(1L) | 第40-41页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体连接 | 第41页 |
| ·CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的转化 | 第42页 |
| ·菌落PCR鉴定重组质粒 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的PCR扩增鉴定 | 第44页 |
| ·双酶切鉴定重组质粒 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-47页 |
| ·菌落PCR筛选结果 | 第45页 |
| ·提取质粒的鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增重组质粒的鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 FNSⅡ的测序及生物信息学分析 | 第49-60页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第49页 |
| ·目的片段的序列分析 | 第49-50页 |
| ·序列分析及蛋白质结构预测 | 第50-59页 |
| ·目的片段测序结果 | 第50页 |
| ·DNA序列分析 | 第50-51页 |
| ·进化树的构建 | 第51-52页 |
| ·蛋白质性质分析与结构的预测 | 第52-59页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第52-55页 |
| ·预测二级结构 | 第55-57页 |
| ·预测信号序列 | 第57-58页 |
| ·预测跨膜结构域 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| ·目的片段序列分析 | 第59页 |
| ·预测蛋白质结构 | 第59-60页 |
| 第六章 结果与展望 | 第60-62页 |
| ·实验结果 | 第60-61页 |
| ·问题与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |