| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·木本曼陀罗简介 | 第10页 |
| ·托品烷类生物碱（TAs）简介 | 第10-13页 |
| ·托品烷类生物碱（TAs）的结构及性质 | 第11-12页 |
| ·托品烷类生物碱（TAs）的合成、运输及储存 | 第12-13页 |
| ·托品烷类生物碱（TAs）的生物合成途径网及相关酶基因 | 第13-20页 |
| ·TAs及相关代谢产物的生物合成途径网 | 第13-15页 |
| ·TAs生物合成途径上的酶和基因 | 第15-17页 |
| ·TRs及TAs的代谢工程研究进展 | 第17-20页 |
| 第2章 绪论 | 第20-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第20页 |
| ·研究范围和内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第3章 材料与方法 | 第22-40页 |
| ·实验材料及试剂耗材 | 第22-25页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·仪器和设备 | 第22页 |
| ·试剂盒及试剂购买 | 第22-23页 |
| ·常规试剂、溶液和培养基的配置 | 第23-25页 |
| ·常规方法和操作步骤 | 第25-27页 |
| ·植物总RNA的提取与检测 | 第25页 |
| ·目的条带的回收 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌DH5α/ Rosetta感受态细胞的制备（CaCl_2法） | 第26页 |
| ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26-27页 |
| ·重组子的鉴定、测序 | 第27页 |
| ·质粒的提取 | 第27页 |
| ·BaTRI、DsTRI的克隆与分析 | 第27-34页 |
| ·B.arborea和D.stramonium总RNA的提取与检测 | 第27页 |
| ·从B.arborea和D.stramonium总RNA合成第一条cDNA | 第27-28页 |
| ·BaTRI和DsTRI的克隆 | 第28-32页 |
| ·BaTRI基因的生物信息学分析及三级结构同源建模 | 第32页 |
| ·BaTRI基因的组织表达谱分析 | 第32-34页 |
| ·BaTRI、DsTRI的原核表达 | 第34-39页 |
| ·BaTRI、DsTRI原核表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·BaTRI、DsTRI重组蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| ·BaTRI、DsTRI重组蛋白的分离纯化 | 第37页 |
| ·考马斯亮蓝法（Bradford法）测定BaTRI、DsTRI重组蛋白含量 | 第37-38页 |
| ·BaTRI、DsTRI重组蛋白的活性测定 | 第38-39页 |
| ·木本曼陀罗各组织材料生物碱的提取及检测 | 第39-40页 |
| ·生物碱的提取 | 第39页 |
| ·生物碱的HPLC测定 | 第39-40页 |
| 第4章 结果与分析 | 第40-60页 |
| ·BaTRI的克隆与分析 | 第40-46页 |
| ·BaTRI的获得 | 第40页 |
| ·BaTRI的生物信息学分析 | 第40-46页 |
| ·BaTRI、DsTRI原核表达、分离纯化及酶动力学参数的测定 | 第46-47页 |
| ·BaTRI、DsTRI原核表达 | 第46-47页 |
| ·BaTRI、DsTRI原核表达及分离纯化 | 第47页 |
| ·BaTRI重组蛋白活性检测 | 第47-52页 |
| ·BaTRI重组蛋白氧化和还原反应的pH梯度活性分析 | 第47-48页 |
| ·BaTRI重组蛋白酶动力学参数的测定 | 第48-50页 |
| ·BaTRI和DsTRI酶动力学参数的比较 | 第50-52页 |
| ·BaTRI组织表达谱分析 | 第52-55页 |
| ·木本曼陀罗RNA的提取 | 第52-53页 |
| ·BaTRI和PGK引物的标准曲线和融解曲线 | 第53-54页 |
| ·BaTRI组织表达谱分析 | 第54-55页 |
| ·木本曼陀罗各组织TAs含量分析 | 第55-60页 |
| ·莨菪碱、东莨菪碱的HPLC标准曲线 | 第55-56页 |
| ·木本曼陀罗各组织中TAs含量测定 | 第56-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 研究生期间发表论文、参研项目 | 第72页 |
