| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·蝎毒素的概述 | 第14-15页 |
| ·蝎子的种类及分布 | 第14页 |
| ·蝎毒素的概述 | 第14-15页 |
| ·蝎神经毒素的分类 | 第15-17页 |
| ·蝎昆虫神经毒素 | 第15页 |
| ·已知蝎昆虫毒素的种类 | 第15-16页 |
| ·兴奋型昆虫毒素 | 第16页 |
| ·抑制型昆虫毒素 | 第16-17页 |
| ·东亚钳蝎抗虫活性研究 | 第17-19页 |
| ·蝎毒的抗虫作用研究 | 第17-18页 |
| ·抗昆虫蝎毒素多肽序列分析比对 | 第18页 |
| ·蝎毒素的抗虫机理 | 第18-19页 |
| ·重组蝎神经毒素基因的表达 | 第19-22页 |
| ·蝎神经毒素的原核表达体系 | 第19-21页 |
| ·蝎神经毒素的真核表达体系 | 第21页 |
| ·蝎神经毒素的哺乳动物细胞表达体系 | 第21-22页 |
| ·蝎神经毒素在杆状病毒中的表达 | 第22页 |
| ·应用前景及立题思路 | 第22-24页 |
| 第二章 BmK IT和BmK IT-AP表达载体构建 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·主要实验设备 | 第24-25页 |
| ·试剂和培养基 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·蝎毒素基因的设计和构建 | 第25-27页 |
| ·表达载体pET-32a(+)、pET-32(a)-N-Tag (His)-BmK IT和pET-32(a)-N-Tag(His)-BmK IT-AP小量抽提 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
| ·重组表达载体双酶切反应 | 第28-29页 |
| ·重组表达载体基因测序分析 | 第29-30页 |
| ·重组子转化与筛选（抗性鉴定） | 第30-31页 |
| ·MμLtiIdent蛋白质分析 | 第31页 |
| ·重组质粒pET-32(a)-N-Tag(His)-BmK IT和pET-32(a)-N-Tag(His)-BmKIT-AP的诱导表达 | 第31页 |
| ·实验结果 | 第31-38页 |
| ·重组质粒的琼脂糖凝胶电泳分析 | 第31-32页 |
| ·重组表达载体双酶切检测结果 | 第32-34页 |
| ·重组表达载体基因测序分析结果 | 第34-36页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3) | 第36页 |
| ·MμLtiIdent蛋白质分子量 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pET-32(a)-N-Tag(His)-BmK IT和pET-32(a)-N-Tag(His)-BmKIT-AP的诱导表达结果 | 第37-38页 |
| 第三章 蝎毒素多肽重组表达诱导条件的优化 | 第38-44页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·质粒 | 第38页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化（热激法） | 第39页 |
| ·重组蝎毒素诱导表达条件优化 | 第39-40页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析诱导过程及表达量 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-43页 |
| ·重组蝎毒素诱导表达条件优化结果与SDS-聚丙烯凝胶电泳分析 | 第41-42页 |
| ·ImageJ灰度分析结果 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| 第四章 蝎毒素多肽重组表达纯化条件的优化 | 第44-51页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·质粒 | 第44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·重组蝎毒素多肽诱导表达 | 第45页 |
| ·His Trap HP柱层析 | 第45-46页 |
| ·重组蝎毒素Tag(His)-BmK IT Tag(His)-BmK IT-AP的RT-HPLC纯 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·HisTrap HP柱层析及电泳分析结果 | 第47-49页 |
| ·重组蝎毒素Tag(His)-BmK IT和Tag(His)-BmK IT-AP的RT-HPLC纯化及电泳分析结果 | 第49-51页 |
| 第五章 重组表达蝎毒素多肽钠电流调制研究 | 第51-56页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·DRG细胞 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要的生化制剂及材料 | 第51页 |
| ·主要配制试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·DRG细胞的获取 | 第51-52页 |
| ·膜片钳技术对Tag(His)-BmK IT和Tag(His)-BmK IT-AP电生理性质的确定 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53-56页 |
| 第六章 讨论 | 第56-59页 |
| ·表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·诱导表达 | 第57页 |
| ·分离纯化 | 第57页 |
| ·细胞活性 | 第57-59页 |
| 第七章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附I：溶液配制 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间科研成果 | 第71页 |
