| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| ·蝎毒素 | 第13-14页 |
| ·离子通道相关蝎毒素的多样性 | 第14-16页 |
| ·几类蝎毒素的序列比对 | 第16-20页 |
| ·抗痛蝎毒素 | 第18-19页 |
| ·抗肿瘤蝎毒素 | 第19页 |
| ·抗癫痫蝎毒素 | 第19-20页 |
| ·研究的三种抗痛蝎毒素的性质 | 第20-21页 |
| ·蝎毒素的外源表达系统 | 第21-24页 |
| ·蝎毒素多肽的原核表达系统 | 第22页 |
| ·蝎毒素多肽的真核表达系统 | 第22-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-41页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·质粒与表达菌 | 第25-26页 |
| ·细胞转化 | 第26页 |
| ·感受态制备 | 第26页 |
| ·质粒转化 | 第26页 |
| ·阳性重组的筛选 | 第26-28页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·DNA电泳检测 | 第27-28页 |
| ·重组产物的IPTG诱导 | 第28页 |
| ·产物粗分 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白亲和纯化 | 第29-33页 |
| ·TrxHis融合标签纯化蛋白 | 第29-32页 |
| ·免疫印迹检测 | 第32页 |
| ·对所得组分冷冻干燥 | 第32-33页 |
| ·HPLC对干燥后组分进行纯化 | 第33-38页 |
| ·重组蝎毒素BmK-AS色谱纯化 | 第33-35页 |
| ·重组蝎毒素BmK-AS1色谱纯化 | 第35-36页 |
| ·蝎毒素BmK-IT2色谱纯化 | 第36-38页 |
| ·三种抗痛蝎毒素的抗痛效应 | 第38-41页 |
| ·醋酸扭体法观察蝎毒素抗痛效应 | 第38页 |
| ·热板法探究蝎毒素镇痛效应 | 第38-39页 |
| ·重组蝎毒素对大鼠背根神经节细胞钠离子通道电流作用 | 第39-41页 |
| 第三章 实验结果 | 第41-62页 |
| ·目的质粒导入受体菌 | 第41-42页 |
| ·DNA电泳结果 | 第41页 |
| ·抗性筛选 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE电泳蛋白条带检测结果 | 第42-50页 |
| ·三种重组蛋白时程表达范围探索 | 第42-43页 |
| ·蝎毒素BmK-AS时程优化 | 第43-46页 |
| ·蝎毒素BmK-AS1时程优化 | 第46-48页 |
| ·蝎毒素BmK-IT2时程优化 | 第48-50页 |
| ·蛋白纯化仪AKTA纯化重组蛋白结果 | 第50-55页 |
| ·重组蝎毒素BmK-AS AKTA纯化 | 第50-51页 |
| ·重组蝎毒素BmK-AS1 AKTA纯化 | 第51-52页 |
| ·重组蝎毒素BmK-IT2 AKTA纯化 | 第52-55页 |
| ·冷冻干燥后的蛋白粗品质量 | 第55页 |
| ·HPLC分离纯化结果 | 第55-58页 |
| ·BmK-AS色谱分离纯化 | 第55-56页 |
| ·BmK-AS1色谱分离纯化 | 第56-57页 |
| ·BmK-IT2色谱分离纯化 | 第57-58页 |
| ·抗痛效应 | 第58-62页 |
| ·重组毒素多肽对大鼠醋酸引起疼痛的镇痛作用 | 第58-59页 |
| ·重组抗痛多肽的热板法镇痛作用比较 | 第59-60页 |
| ·全细胞膜片钳记录重组抗痛蝎毒素对钠通道电流的抑制效应 | 第60-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-65页 |
| ·重组质粒构建 | 第62页 |
| ·重组蛋白表达 | 第62-63页 |
| ·重组多肽的分离纯化 | 第63-64页 |
| ·重组多肽功能鉴定 | 第64-65页 |
| 第五章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 附I：溶液配制 | 第76-80页 |
| 附II：实验仪器 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间科研成果 | 第82页 |