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日本沼虾性腺抑制激素免疫定位及莠去津处理对其表达量的影响

中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第1章 绪论第12-16页
   ·日本沼虾的生物学特征第12页
   ·高血糖家族激素第12-14页
     ·高血糖激素第12-13页
     ·蜕皮抑制激素第13页
     ·性腺抑制激素第13-14页
     ·大鄂器抑制激素第14页
   ·甲壳动物视上神经节结构第14-15页
   ·莠去津的生理毒性第15页
   ·研究目的及意义第15-16页
第2章 日本沼虾性腺抑制激素的克隆及原核表达第16-28页
   ·实验材料与试剂第16-18页
     ·实验动物第16页
     ·主要仪器及试剂第16-18页
   ·实验方法第18-21页
     ·日本沼虾眼柄总RNA的提取第18页
     ·cDNA第一条链的合成第18-19页
     ·日本沼虾GIH-A与GIH-B成熟区全长克隆第19-20页
     ·GIH-A与GIH-B融合蛋白的表达第20-21页
     ·日本沼虾GIH-A与GIH-B蛋白三维结构预测第21页
   ·实验结果第21-25页
     ·日本沼虾眼柄总RNA提取结果第21页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B成熟区全长克隆结果第21-23页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白表达第23-24页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白三维结构的预测第24-25页
   ·讨论第25-26页
   ·小结第26-28页
第3章 日本沼虾性腺抑制激素蛋白纯化及抗体的制备第28-36页
   ·实验材料与试剂第28-29页
     ·实验材料第28页
     ·实验仪器第28页
     ·实验试剂及配方第28-29页
   ·实验方法第29-31页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白的纯化与浓缩复性第29-30页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B多克隆抗体制备第30页
     ·多克隆抗体效价检测第30-31页
     ·western-blotting检测多克隆抗体特异性第31页
   ·实验结果第31-34页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白的纯化与浓缩复性第31-32页
     ·日本沼虾GIH-A和GIH-B多克隆抗体效价检测第32-33页
     ·日本沼虾性腺抑制激素多克隆抗体特异性检测第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第4章 免疫荧光检测日本沼虾GIH-A和GIH-B在视上神经节和胸神经节中的分布第36-42页
   ·实验材料与试剂第36-37页
     ·实验材料第36页
     ·实验仪器第36页
     ·实验主要试剂第36-37页
   ·实验方法第37-38页
     ·日本沼虾视上神经节石蜡切片的制作第37页
     ·日本沼虾视上神经节与胸神经节冰冻切片的制作第37页
     ·免疫荧光法定位日本沼虾GIH-A和GIH-B第37-38页
   ·实验结果第38-41页
     ·日本沼虾视上神经节HE染色第38-39页
     ·免疫荧光技术定位日本沼虾视上神经节与胸神经节中GIH-A、GIH-B的分布第39-41页
   ·讨论第41页
   ·小结第41-42页
第5章 莠去津对日本沼虾GIH-B表达量的影响第42-48页
   ·实验材料与试剂第42-43页
     ·实验材料第42页
     ·实验仪器第42页
     ·实验试剂第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·日本沼虾的莠去津梯度暴露第43页
     ·日本沼虾相关材料获取第43页
     ·染毒日本沼虾RNA提取第43页
     ·定量PCR引物设计第43页
     ·染毒日本沼虾cDNA的合成第43-44页
     ·标准曲线的制作第44页
     ·定量PCR检测染毒后GIH-B在日本沼虾眼柄中的表达量第44-45页
   ·实验结果第45-46页
     ·染毒日本沼虾RNA提取结果第45页
     ·染毒后GIH-B在日本沼虾眼柄中的表达量第45-46页
   ·讨论第46页
   ·小结第46-48页
结语第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54-55页
攻读学位期间取得的科研成果第55页

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