中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第1章 绪论 | 第12-16页 |
·日本沼虾的生物学特征 | 第12页 |
·高血糖家族激素 | 第12-14页 |
·高血糖激素 | 第12-13页 |
·蜕皮抑制激素 | 第13页 |
·性腺抑制激素 | 第13-14页 |
·大鄂器抑制激素 | 第14页 |
·甲壳动物视上神经节结构 | 第14-15页 |
·莠去津的生理毒性 | 第15页 |
·研究目的及意义 | 第15-16页 |
第2章 日本沼虾性腺抑制激素的克隆及原核表达 | 第16-28页 |
·实验材料与试剂 | 第16-18页 |
·实验动物 | 第16页 |
·主要仪器及试剂 | 第16-18页 |
·实验方法 | 第18-21页 |
·日本沼虾眼柄总RNA的提取 | 第18页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第18-19页 |
·日本沼虾GIH-A与GIH-B成熟区全长克隆 | 第19-20页 |
·GIH-A与GIH-B融合蛋白的表达 | 第20-21页 |
·日本沼虾GIH-A与GIH-B蛋白三维结构预测 | 第21页 |
·实验结果 | 第21-25页 |
·日本沼虾眼柄总RNA提取结果 | 第21页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B成熟区全长克隆结果 | 第21-23页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白表达 | 第23-24页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白三维结构的预测 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
·小结 | 第26-28页 |
第3章 日本沼虾性腺抑制激素蛋白纯化及抗体的制备 | 第28-36页 |
·实验材料与试剂 | 第28-29页 |
·实验材料 | 第28页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·实验试剂及配方 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-31页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白的纯化与浓缩复性 | 第29-30页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B多克隆抗体制备 | 第30页 |
·多克隆抗体效价检测 | 第30-31页 |
·western-blotting检测多克隆抗体特异性 | 第31页 |
·实验结果 | 第31-34页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B蛋白的纯化与浓缩复性 | 第31-32页 |
·日本沼虾GIH-A和GIH-B多克隆抗体效价检测 | 第32-33页 |
·日本沼虾性腺抑制激素多克隆抗体特异性检测 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第4章 免疫荧光检测日本沼虾GIH-A和GIH-B在视上神经节和胸神经节中的分布 | 第36-42页 |
·实验材料与试剂 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验仪器 | 第36页 |
·实验主要试剂 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-38页 |
·日本沼虾视上神经节石蜡切片的制作 | 第37页 |
·日本沼虾视上神经节与胸神经节冰冻切片的制作 | 第37页 |
·免疫荧光法定位日本沼虾GIH-A和GIH-B | 第37-38页 |
·实验结果 | 第38-41页 |
·日本沼虾视上神经节HE染色 | 第38-39页 |
·免疫荧光技术定位日本沼虾视上神经节与胸神经节中GIH-A、GIH-B的分布 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第5章 莠去津对日本沼虾GIH-B表达量的影响 | 第42-48页 |
·实验材料与试剂 | 第42-43页 |
·实验材料 | 第42页 |
·实验仪器 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
·日本沼虾的莠去津梯度暴露 | 第43页 |
·日本沼虾相关材料获取 | 第43页 |
·染毒日本沼虾RNA提取 | 第43页 |
·定量PCR引物设计 | 第43页 |
·染毒日本沼虾cDNA的合成 | 第43-44页 |
·标准曲线的制作 | 第44页 |
·定量PCR检测染毒后GIH-B在日本沼虾眼柄中的表达量 | 第44-45页 |
·实验结果 | 第45-46页 |
·染毒日本沼虾RNA提取结果 | 第45页 |
·染毒后GIH-B在日本沼虾眼柄中的表达量 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46页 |
·小结 | 第46-48页 |
结语 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第55页 |