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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)三聚体自转运粘附素肺组织互作蛋白筛选研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第8-12页
文章综述第12-28页
 1 猪传染性胸膜肺炎防线杆菌概述第12-18页
   ·猪传染性胸膜肺炎防线杆菌病原学第12-14页
   ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子研究进展第14-18页
 2 三聚体自转运粘附素研究进展第18-28页
   ·三聚体自转运粘附素的结构第18-20页
   ·三聚体自转运粘附素的分泌第20页
   ·三聚体自转运粘附素的功能第20-28页
研究目的及意义第28-29页
第一章 Adh诱饵质粒的构建及检测第29-43页
 1 试验材料第29页
   ·主要仪器第29页
   ·主要试剂第29页
 2 方法第29-34页
   ·酵母双杂交Adh诱饵质粒构建第29-34页
 3 结果第34-40页
   ·adh基因的扩增第34页
   ·Adh基因回收鉴定第34-35页
   ·重组质粒pMD19T-Adh的鉴定第35-36页
   ·重组质粒PGBKT7-Adh的鉴定第36-37页
   ·酵母菌株AH109营养表型的验证第37-38页
   ·诱饵质粒PGBKT7-Adh转化AH109感受态细胞鉴定第38页
   ·PGBKT7-Adh转化AH109后的自激活、毒性检测及缺陷培养基生长实验第38-40页
 4 讨论分析第40-42页
 5 小结第42-43页
第二章 肺组织大肠杆菌文库及酵母文库质量检测第43-50页
 1 材料第43页
   ·主要仪器第43页
   ·主要试剂第43页
 2 方法第43-45页
   ·设计检测文库引物第43-44页
   ·肺组织大肠杆菌文库质量检测第44页
   ·肺组织酵母文库质量检测第44-45页
 3 结果第45-48页
   ·肺组织大肠杆菌文库质量大小鉴定第45-46页
   ·肺组织大肠杆菌文库容量鉴定第46页
   ·对肺组织酵母文库进行滴度测定第46-47页
   ·对肺组织酵母文库进行PCR随机检测第47页
   ·对肺组织酵母文库进行缺陷培养基生长验证第47-48页
 4 讨论分析第48-49页
 5 小结第49-50页
第三章 APP Adh肺组织互作蛋白筛选第50-70页
 1 材料第50页
   ·主要仪器第50页
   ·主要试剂第50页
 2 方法第50-55页
   ·试验原理第50-51页
   ·试验方案第51页
   ·酵母双杂交诱饵准备第51页
   ·酵母双杂交文库质粒共转化入诱饵感受态第51-52页
   ·酵母质粒的营救第52页
   ·酵母质粒与诱饵质粒回转验证第52-53页
   ·酵母质粒的鉴定第53页
   ·生物信息学在线分析网站第53页
   ·预测相互作用位点第53-54页
     ·蛋白质结构分析第53-54页
   ·蛋白质功能分析第54页
   ·预测诱饵其他未知功能第54-55页
 3 结果第55-64页
   ·酵母双杂交诱饵准备第55-56页
   ·酵母双杂交阳性克隆子的鉴定第56-57页
   ·氨基酸序列分析第57-59页
   ·跨膜区分析第59-60页
   ·亲疏水性分析第60页
   ·信号肽分析第60-61页
   ·二级结构分析第61-62页
   ·功能区分析第62-63页
   ·诱饵蛋白其他未知功能预测第63-64页
 4 讨论分析第64-69页
   ·酵母双杂交第64-65页
   ·锌指蛋白的结构功能第65-66页
   ·Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶的结构功能第66-67页
   ·HLA-Ⅱ类分子的调节分子的结构功能第67-68页
   ·支链氨基酸转氨酶的结构功能第68-69页
 5 小结第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-80页
致谢第80-81页
附录一 阳性蛋白序列报告第81-83页
 锌指蛋白第81页
 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶第81-82页
 HLA-Ⅱ类分子的调节分子第82页
 支链氨基酸转氨酶1第82-83页

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