| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-29页 |
| 1 气肿疽研究进展 | 第10-13页 |
| ·病原体 | 第10-11页 |
| ·流行病学 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12页 |
| ·诊断 | 第12页 |
| ·防制措施 | 第12-13页 |
| 2 本课题研究的目的和意义 | 第13-29页 |
| 材料与方法 | 第14-29页 |
| 1 材料 | 第14-18页 |
| ·菌株、实验动物及细胞 | 第14页 |
| ·细胞培养液血清及其他主要试剂 | 第14-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-29页 |
| ·气肿疽梭菌菌体裂解抗原制备 | 第18页 |
| ·小鼠的免疫接种 | 第18-19页 |
| ·间接EKISA检测方法的建立 | 第19-21页 |
| ·细胞融合 | 第21-23页 |
| ·杂交瘤细胞株筛选 | 第23页 |
| ·克隆化培养 | 第23-24页 |
| ·细胞冻存 | 第24页 |
| ·BAL日/。小鼠腹水单克隆抗体腹水的制备 | 第24页 |
| ·腹水效价测定 | 第24-25页 |
| ·稳定性鉴定 | 第25页 |
| ·杭气肿疽梭菌单克隆抗体亚类的鉴定 | 第25页 |
| ·杂交瘤细胞染色体的测定 | 第25-26页 |
| ·抗气肿疽梭菌单克隆抗体特异性的鉴定 | 第26-29页 |
| 结果 | 第29-36页 |
| 1. 气肿疽梭菌菌体裂解抗原的制备 | 第29页 |
| ·气肿疽梭菌的培养 | 第29页 |
| ·菌体裂解抗原的制备 | 第29页 |
| ·气肿疽梭菌抗原含量测定 | 第29页 |
| 2 间接ELISA方法的建立 | 第29-33页 |
| ·抗原最适包被浓度及阴阳性血清最适稀释度的确定 | 第29-30页 |
| ·抗原的最适包被温度及最适包被时间的确定 | 第30-31页 |
| ·血清最适作用时间的确定 | 第31页 |
| ·酶标二抗最适工作浓度及最适作用时间的确定 | 第31-32页 |
| ·PBS稀释液中封闭液浓度的确定 | 第32页 |
| ·底物最适显色时间的确定 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第32-33页 |
| 3 杂交瘤细胞株的建立 | 第33页 |
| 4 稳定性鉴定结果 | 第33-34页 |
| 5 MAb亚型鉴定及效价测定结果 | 第34页 |
| 6 杂交瘤细胞的染色体分析 | 第34页 |
| 7 腹水效价测定 | 第34页 |
| 8 抗气肿疽梭菌单克隆抗体特异性的鉴定 | 第34-36页 |
| ·MAb的ELISA检测 | 第34-35页 |
| ·Western blotting鉴定 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-41页 |
| 1 抗原 | 第36页 |
| 2 实验动物选择和动物免疫 | 第36-37页 |
| ·实验动物的选择 | 第36-37页 |
| ·免疫方法 | 第37页 |
| 3 间接ELISA检测方法的建立 | 第37-38页 |
| 4 细胞融合 | 第38页 |
| 5 细胞融合后可置于24孔板和96孔板中培养,96孔板优点 | 第38-39页 |
| 6 饲养细胞 | 第39页 |
| 7 胎牛血清 | 第39页 |
| 8 杂交瘤细胞的克隆 | 第39-40页 |
| 9 气肿疽梭菌单克隆抗体的特异性 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48-49页 |
| 附录(攻读学位期间发表论文目录) | 第49页 |