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与IBDV VP2、VP3相互作用宿主细胞蛋白的筛选及鉴定

中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-12页
英文縮略表第12-13页
第一章 引言第13-22页
   ·IBDV第13-14页
     ·IBDV病原学第13-14页
     ·IBDV基因组第14页
   ·IBDV基因组的编码蛋白第14-16页
   ·IBDV与宿主细胞相互作用研究进展第16页
   ·蛋白质相互作用研究方法第16-18页
     ·免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)第16-17页
     ·GST pull-down实验第17页
     ·酵母双杂交第17-18页
     ·蛋白质芯片技术第18页
     ·噬菌体展示技术第18页
   ·宿主蛋白CK1α第18-20页
     ·CK1α的结构与功能第18-20页
     ·CK1α与病毒的相互作用研究进展第20页
   ·核糖体蛋白L4(RPL4)的结构及功能第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 IBDV结构蛋白与宿主细胞相互作用蛋白的筛选第22-31页
   ·材料和方法第22-26页
     ·菌株、毒株、质粒和细胞第22页
     ·主要试剂、耗材和仪器第22-23页
     ·应用IP技术筛选与IBDV VP2相互作用的宿主细胞蛋白第23页
     ·IBDV VP3基因的克隆第23-24页
     ·应用IP技术筛选与IBDV VP3相互作用的宿主细胞蛋白第24-25页
     ·互作蛋白质谱鉴定第25-26页
   ·实验结果第26-29页
     ·与IBDV VP2相互作用宿主细胞蛋白的筛选第26-28页
     ·IBDV VP3基因的克隆第28页
     ·与IBDV VP3相互作用宿主细胞蛋白的筛选第28-29页
   ·讨论第29-31页
第三章 IBDV VP3蛋白与宿主细胞蛋白RPL4相互作用验证第31-38页
   ·材料和方法第31-34页
     ·菌株、质粒与细胞第31页
     ·主要试剂和仪器第31页
     ·鸡源核糖体蛋白L4基因(RPL4)的扩增及克隆第31-33页
     ·不同物种RPL4的同源性比较第33页
     ·免疫共沉淀(co-IP)第33-34页
     ·激光共聚焦第34页
   ·实验结果第34-36页
     ·鸡源RPL4基因的扩增、克隆及序列分析第34-35页
     ·免疫共沉淀(co-IP)实验结果第35页
     ·激光共聚焦实验结果第35-36页
   ·讨论第36-38页
第四章 IBDV VP2蛋白与宿主蛋白CK1α相互作用验证第38-45页
   ·材料和方法第38-40页
     ·菌株、质粒与细胞第38页
     ·主要试剂、仪器第38页
     ·鸡源CK1α基因的扩增及克隆第38-39页
     ·不同物种CK1α的同源性比较第39页
     ·免疫共沉淀(co-IP)第39-40页
     ·激光共聚焦第40页
     ·CK1α与VP2相互作用区域的确定第40页
   ·实验结果第40-43页
     ·鸡源CK1α基因的扩增、克隆及序列分析第40-41页
     ·免疫共沉淀(co-IP)实验结果第41-43页
     ·激光共聚焦实验结果第43页
   ·讨论第43-45页
第五章 CK1α对传染性法氏囊病病毒复制影响的初步研究第45-50页
   ·材料和方法第45-46页
     ·病毒、细胞第45页
     ·主要试剂、仪器第45页
     ·D4476对DF1细胞活性的影响第45页
     ·CK1α功能抑制对IBDV的影响第45-46页
   ·实验结果第46-48页
     ·D4476对DF1细胞活性的影响第46页
     ·CK1α功能抑制后细胞中病毒蛋白含量上调第46-48页
   ·讨论第48-50页
第六章 全文结论第50-51页
参考文献第51-57页
附录第57-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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