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H5N1亚型禽流感病毒强弱毒株感染家鸭脑内蛋白表达差异性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
   ·流感病毒概述第12-13页
   ·流感病毒各蛋白的作用第13-16页
     ·血凝素(HA)第13页
     ·神经氨酸酶(NA)第13-15页
     ·基质蛋白第15-16页
     ·其他蛋白第16页
   ·蛋白质组学概述第16-20页
     ·蛋白质组学的起源和发展第16-17页
     ·蛋白质组学相关技术第17-19页
       ·双向电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2DE)第17-18页
       ·荧光差异显示凝胶电泳(Fluorescence two-dimensional differential gelelectrophoresis,DIGE)第18页
       ·液相色谱(Liquid chromatography,LC)第18-19页
       ·质谱分析技术(Mass spectrometry,MS)第19页
       ·蛋白质组学中的生物信息技术第19页
     ·蛋白质组学在流感病毒研究中的应用第19-20页
   ·本实验的研究目的和意义第20-21页
第二章 H5N1亚型禽流感病毒强弱毒株感染家鸭脑内蛋白表达差异性分析第21-33页
   ·材料和方法第21-26页
     ·毒株和实验动物第21页
     ·相关试剂和仪器第21页
     ·SPF绍兴鸭攻毒实验第21页
     ·病理切片的制备以及分析第21-22页
     ·2-DE DIGE分析第22-24页
     ·RT-PCR分析第24-25页
     ·Western Blot分析部分差异表达蛋白第25-26页
   ·结果分析第26-31页
     ·攻毒后脑组织匀浆接胚结果第26页
     ·感染鸭脑组织病理学分析第26-27页
     ·2-DE DIGE筛选差异表达蛋白结果第27-28页
     ·差异蛋白质谱分析结果第28-29页
     ·差异蛋白荧光定量结果第29-30页
     ·差异蛋白GFAP和tubulin的Western Blot鉴定结果第30-31页
   ·讨论第31-33页
第三章 H9N2亚型禽流感病毒疫苗候选株的构建第33-41页
   ·实验材料第33-34页
     ·毒株第33页
     ·鸡胚和细胞第33页
     ·主要试剂和仪器第33页
     ·pBD双向表达载体第33-34页
     ·引物第34页
   ·方法第34-36页
     ·RNA的提取和反转录第34-35页
     ·PCR扩增第35页
     ·PCR扩增产物以及pBD载体的处理第35页
     ·pBD-HA和pBD-NA的构建以及序列测定第35-36页
     ·疫苗候选毒株的拯救第36页
   ·结果第36-39页
     ·病毒HA和NA基因的扩增结果第36-37页
     ·pBD-HA和pBD-NA的电泳结果第37页
     ·疫苗候选株的拯救和鉴定结果第37-38页
     ·救获病毒粒子电镜观察结果第38-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 全文结论第41-42页
参考文献第42-48页
附录第48-49页
致谢第49-50页
作者简历第50页
发表的文章第50页

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