| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·磷脂简介 | 第7页 |
| ·溶血卵磷脂简介 | 第7-9页 |
| ·在食品行业中的应用 | 第8-9页 |
| ·在饲料行业的应用 | 第9页 |
| ·在化妆品中的应用 | 第9页 |
| ·在医学领域的应用 | 第9页 |
| ·溶血磷脂的安全性 | 第9页 |
| ·磷脂酶A_2 | 第9-14页 |
| ·磷脂酶A_2的分类及生理功能 | 第10-11页 |
| ·磷脂酶A_2的实际应用 | 第11-13页 |
| ·PLA_2的生产开发现状 | 第13-14页 |
| ·课题研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·工具酶和试剂 | 第15页 |
| ·常用溶液剂试剂的配制 | 第15-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-21页 |
| ·干酪乳杆菌染色体DNA的提取 | 第17页 |
| ·引物的设计及目的基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·感受态的制备及转化 | 第18页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE分析及酶活鉴定 | 第18-19页 |
| ·重组菌发酵条件的优化 | 第19页 |
| ·PLA_2的纯化及酶学性质分析 | 第19-20页 |
| ·PLA_2水解大豆卵磷脂条件优化 | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-38页 |
| ·L.casei和D.desertiPLA_2基因克隆 | 第21页 |
| ·重组质粒pET28a-pla2a和pET28a-pla2c在大肠杆菌中的表达 | 第21-23页 |
| ·质粒pET28a-pla2a和pET28a-pla2c的构建 | 第21-22页 |
| ·重组大肠杆菌的酶活验证 | 第22页 |
| ·重组菌各生长阶段的酶活测定 | 第22-23页 |
| ·重组菌E.coli-pET28a-pla2a发酵条件优化 | 第23-27页 |
| ·IPTG诱导表达条件优化 | 第23-25页 |
| ·乳糖诱导重组菌表达条件优化 | 第25-26页 |
| ·重组菌在TB培养基中的诱导表达条件优化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pHY-P43-pla2b在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第27-29页 |
| ·质粒pHY-P43-pla2b的构建 | 第27-28页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的硼砂卵黄平板验证 | 第28页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌各生长阶段的酶活验证 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pPIC-CP-pla2a在毕赤酵母中的表达 | 第29-31页 |
| ·重组质粒pPIC-CP-pla2a的构建 | 第29页 |
| ·重组毕赤酵母的酶活验证 | 第29-30页 |
| ·重组毕赤酵母各生长阶段的酶活验证 | 第30-31页 |
| ·PLA_2的纯化及酶学性质分析 | 第31-33页 |
| ·PLA_2的纯化 | 第31页 |
| ·PLA_2的最适温度以及温度稳定性 | 第31-32页 |
| ·PLA_2的最适pH | 第32-33页 |
| ·PLA_2改性大豆卵磷脂 | 第33-38页 |
| ·PLA_2加量的影响 | 第33-34页 |
| ·起始pH的影响 | 第34页 |
| ·不同浓度Ca~(2+)的影响 | 第34-35页 |
| ·温度的影响 | 第35-36页 |
| ·时间的影响 | 第36页 |
| ·正交实验 | 第36-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |
