摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
引言 | 第12-14页 |
上篇 文献综述 | 第14-42页 |
第一章 卵菌效应分子的研究进展 | 第15-29页 |
摘要 | 第15-16页 |
1 卵菌效应分子的亚细胞定位 | 第16-17页 |
2 卵菌效应分子的结构 | 第17-19页 |
3 卵菌效应分子的转运机制 | 第19页 |
4 卵菌效应分子的基因组特征 | 第19-20页 |
5 卵菌效应分子的氨基酸多态性和正向选择 | 第20-21页 |
6 卵菌效应分子在侵染阶段具有不同的表达模式 | 第21页 |
7 几个卵菌效应分子具有抑制植物免疫的作用 | 第21页 |
8 对卵菌效应分子的展望 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-29页 |
第二章 卵菌与寄主植物互作的分子机制 | 第29-42页 |
摘要 | 第29-30页 |
1. 卵菌的侵染 | 第30-32页 |
·卵菌的侵入方式 | 第30-31页 |
·卵菌的扩展和再循环 | 第31-32页 |
2. 卵菌与寄主植物互作的分子机制 | 第32-38页 |
·寄主植物的基础防卫体系 | 第32页 |
·Zigzag理论 | 第32-34页 |
·无毒基因和抗病基因层次的互作 | 第34-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
下篇 研究内容 | 第42-97页 |
第一章 大豆疫霉CRN基因家族的生物信息学分析 | 第43-53页 |
摘要 | 第43-45页 |
1 材料与方法 | 第45页 |
·CRN基因家族序列的来源 | 第45页 |
·其它物种CRN基因的查找 | 第45页 |
·保守序列元件的查找 | 第45页 |
·序列进化树的构建 | 第45页 |
·CRN基因表达量的分析 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-49页 |
·CRN基因家族为卵菌所特有 | 第45-46页 |
·CRN家族的保守序列元件 | 第46-47页 |
·与RXLR,NPP等基因家族相比CRN基因家族表达量较高 | 第47页 |
·CRN基因家族序列非常相似 | 第47-49页 |
3 讨论 | 第49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
第二章 CRN基因家族的克隆和功能分析 | 第53-67页 |
摘要 | 第53-54页 |
1 材料与方法 | 第54-57页 |
·烟草生长与种植 | 第54页 |
·马铃薯X病毒载体pGR107 | 第54-55页 |
·试验菌株 | 第55页 |
·农杆菌介导的瞬时表达 | 第55页 |
·DNA提取 | 第55页 |
·RNA提取 | 第55-56页 |
·RT-PCR克隆基因 | 第56页 |
·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-63页 |
·CRN家族基因克隆及分析 | 第57-59页 |
·引起细胞死亡的CRN基因 | 第59-60页 |
·对Bax的抑制活性 | 第60页 |
·对PsCRN63的抑制活性 | 第60-61页 |
·对PsojNIP的抑制活性 | 第61页 |
·对Avr3a+R3a的抑制活性 | 第61-63页 |
·对Avh241的抑制活性 | 第63页 |
3 讨论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
第三章 大豆疫霉PSCRN63和PSCRN115基因的功能分析 | 第67-83页 |
摘要 | 第67-69页 |
1 材料与方法 | 第69-70页 |
·供试材料 | 第69页 |
·序列进化树的构建 | 第69页 |
·农杆菌注射 | 第69页 |
·点突变构建 | 第69页 |
·基因枪实验 | 第69-70页 |
·荧光定量PCR分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-78页 |
·PsCRN63和PsCRN115在寄主大豆上具有与烟草上相似的功能 | 第70-72页 |
·PSCRN63和PSCRN115的同源基因分析 | 第72-73页 |
·PSCRN63和PSCRN115两个基因的表达量较高 | 第73-74页 |
·鉴定PsCRN63和PsCRN115的功能域 | 第74-75页 |
·鉴定PsCRN63引起细胞死亡的关键氨基酸 | 第75-76页 |
·PsCRN63的NLS对引起细胞死亡是必需的 | 第76-78页 |
3 讨论 | 第78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
第四章 大豆疫霉PSCRN63和PSCRN115基因编码致病必需蛋白 | 第83-97页 |
摘要 | 第83-84页 |
1 材料与方法 | 第84-86页 |
·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第84页 |
·下胚轴接种法 | 第84-85页 |
·大豆黄化苗接种法 | 第85页 |
·SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第85页 |
·胼胝质沉积 | 第85页 |
·转化载体的构建 | 第85页 |
·大豆疫霉遗传转化 | 第85-86页 |
2 结果与分析 | 第86-91页 |
·PsCRN63和PsCRN115均是组成性表达模式 | 第86-87页 |
·PsCRN63/115双沉默突变体的获得 | 第87-88页 |
·PsCRN63/115双沉默突变体致病性降低 | 第88-89页 |
·沉默突变体不能抑制寄主的细胞死亡和胼胝质沉积 | 第89-90页 |
·PsCRN63/115的双基因沉默不影响无毒基因和抗病基因的识别 | 第90-91页 |
3 讨论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-97页 |
附录 | 第97-117页 |
附录1 CRN基因家族引物配对扩增表 | 第99-101页 |
附录2 本论文中所有的引物 | 第101-105页 |
附录3 本研究中克隆到的34个CRN基因的蛋白序列 | 第105-109页 |
附录4 数据库网站 | 第109-110页 |
附录5 202个CRN基因重新命名 | 第110-117页 |
缩略语 | 第117-119页 |
本论文创新点 | 第119-121页 |
攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第121-123页 |
致谢 | 第123页 |