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大豆疫霉CRN基因家族效应分子的功能研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
引言第12-14页
上篇 文献综述第14-42页
 第一章 卵菌效应分子的研究进展第15-29页
  摘要第15-16页
  1 卵菌效应分子的亚细胞定位第16-17页
  2 卵菌效应分子的结构第17-19页
  3 卵菌效应分子的转运机制第19页
  4 卵菌效应分子的基因组特征第19-20页
  5 卵菌效应分子的氨基酸多态性和正向选择第20-21页
  6 卵菌效应分子在侵染阶段具有不同的表达模式第21页
  7 几个卵菌效应分子具有抑制植物免疫的作用第21页
  8 对卵菌效应分子的展望第21-22页
  参考文献第22-29页
 第二章 卵菌与寄主植物互作的分子机制第29-42页
  摘要第29-30页
  1. 卵菌的侵染第30-32页
   ·卵菌的侵入方式第30-31页
   ·卵菌的扩展和再循环第31-32页
  2. 卵菌与寄主植物互作的分子机制第32-38页
   ·寄主植物的基础防卫体系第32页
   ·Zigzag理论第32-34页
   ·无毒基因和抗病基因层次的互作第34-38页
  参考文献第38-42页
下篇 研究内容第42-97页
 第一章 大豆疫霉CRN基因家族的生物信息学分析第43-53页
  摘要第43-45页
  1 材料与方法第45页
   ·CRN基因家族序列的来源第45页
   ·其它物种CRN基因的查找第45页
   ·保守序列元件的查找第45页
   ·序列进化树的构建第45页
   ·CRN基因表达量的分析第45页
  2 结果与分析第45-49页
   ·CRN基因家族为卵菌所特有第45-46页
   ·CRN家族的保守序列元件第46-47页
   ·与RXLR,NPP等基因家族相比CRN基因家族表达量较高第47页
   ·CRN基因家族序列非常相似第47-49页
  3 讨论第49页
  参考文献第49-53页
 第二章 CRN基因家族的克隆和功能分析第53-67页
  摘要第53-54页
  1 材料与方法第54-57页
   ·烟草生长与种植第54页
   ·马铃薯X病毒载体pGR107第54-55页
   ·试验菌株第55页
   ·农杆菌介导的瞬时表达第55页
   ·DNA提取第55页
   ·RNA提取第55-56页
   ·RT-PCR克隆基因第56页
   ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备第56-57页
  2 结果与分析第57-63页
   ·CRN家族基因克隆及分析第57-59页
   ·引起细胞死亡的CRN基因第59-60页
   ·对Bax的抑制活性第60页
   ·对PsCRN63的抑制活性第60-61页
   ·对PsojNIP的抑制活性第61页
   ·对Avr3a+R3a的抑制活性第61-63页
   ·对Avh241的抑制活性第63页
  3 讨论第63-64页
  参考文献第64-67页
 第三章 大豆疫霉PSCRN63和PSCRN115基因的功能分析第67-83页
  摘要第67-69页
  1 材料与方法第69-70页
   ·供试材料第69页
   ·序列进化树的构建第69页
   ·农杆菌注射第69页
   ·点突变构建第69页
   ·基因枪实验第69-70页
   ·荧光定量PCR分析第70页
  2 结果与分析第70-78页
   ·PsCRN63和PsCRN115在寄主大豆上具有与烟草上相似的功能第70-72页
   ·PSCRN63和PSCRN115的同源基因分析第72-73页
   ·PSCRN63和PSCRN115两个基因的表达量较高第73-74页
   ·鉴定PsCRN63和PsCRN115的功能域第74-75页
   ·鉴定PsCRN63引起细胞死亡的关键氨基酸第75-76页
   ·PsCRN63的NLS对引起细胞死亡是必需的第76-78页
  3 讨论第78页
  参考文献第78-83页
 第四章 大豆疫霉PSCRN63和PSCRN115基因编码致病必需蛋白第83-97页
  摘要第83-84页
  1 材料与方法第84-86页
   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第84页
   ·下胚轴接种法第84-85页
   ·大豆黄化苗接种法第85页
   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第85页
   ·胼胝质沉积第85页
   ·转化载体的构建第85页
   ·大豆疫霉遗传转化第85-86页
  2 结果与分析第86-91页
   ·PsCRN63和PsCRN115均是组成性表达模式第86-87页
   ·PsCRN63/115双沉默突变体的获得第87-88页
   ·PsCRN63/115双沉默突变体致病性降低第88-89页
   ·沉默突变体不能抑制寄主的细胞死亡和胼胝质沉积第89-90页
   ·PsCRN63/115的双基因沉默不影响无毒基因和抗病基因的识别第90-91页
  3 讨论第91-93页
  参考文献第93-97页
附录第97-117页
 附录1 CRN基因家族引物配对扩增表第99-101页
 附录2 本论文中所有的引物第101-105页
 附录3 本研究中克隆到的34个CRN基因的蛋白序列第105-109页
 附录4 数据库网站第109-110页
 附录5 202个CRN基因重新命名第110-117页
缩略语第117-119页
本论文创新点第119-121页
攻读博士学位期间发表的研究论文第121-123页
致谢第123页

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