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拟南芥ABA2基因调节种子发育的研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-25页
   ·ABA 在植物生长中的作用第12-16页
     ·ABA 的分布及生理作用第12-13页
     ·ABA 的合成途径第13-15页
     ·ABA 对基因表达的调节第15-16页
   ·被子植物种子的发育过程第16-18页
     ·双子叶植物胚的发育第16-17页
     ·双子叶植物胚乳的发育第17-18页
   ·影响植物种子大小的因素第18-21页
     ·影响胚发育的因素第18-19页
     ·影响胚乳发育的因素第19-20页
     ·影响种子发育的其他因素第20-21页
       ·胚乳的表观遗传调控和基因组印迹第20-21页
       ·植物激素对种子发育的调控第21页
   ·植物种子发育过程中 ABA 的调节作用第21-22页
   ·aba2 突变体第22-24页
     ·ABA2 基因第22-23页
     ·aba2-1 突变体第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24-25页
2 材料与方法第25-42页
   ·实验材料第25页
     ·植物材料及生长条件第25页
     ·酶及生化试剂第25页
     ·PCR 引物第25页
   ·实验方法第25-42页
     ·拟南芥的种植第25-26页
     ·拟南芥种子百粒重的测量第26页
     ·基因组 DNA 的提取第26页
     ·连接反应第26-27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第27-28页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第27-28页
     ·AxyPrep 试剂盒提取小量质粒 DNA第28页
     ·植物总 RNA 的提取与检测第28-31页
       ·总 RNA 的提取第28-30页
       ·甲醛变性胶电泳检测 RNA第30-31页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第31页
     ·实时荧光定量 PCR第31-32页
     ·微分干涉差显微照相分析第32-33页
       ·成熟胚的微分干涉差显微照相分析第32-33页
       ·胚的发育过程的微分干涉差分析第33页
     ·半薄切片的制作第33-34页
     ·原位杂交第34-39页
       ·材料的固定第34页
       ·材料的脱水、透明、浸蜡与包埋第34-35页
       ·切片第35页
       ·探针标记第35-37页
       ·脱蜡、消化、乙酰化、杂交第37-38页
       ·杂交后处理第38-39页
       ·杂交信号检测第39页
     ·内源 ABA 的测定方法第39-42页
       ·ABA RIA 法测定原理第39-40页
       ·测定步骤第40-42页
3 结果与分析第42-57页
   ·aba2 突变体的表型分析第42-44页
     ·aba2 突变体与 Col 野生型的植株与角果的表型分析第42页
     ·aba2 突变体与 Col 野生型的种子的表型分析第42-44页
   ·突变体成熟胚细胞大小与细胞数目的分析第44-46页
   ·突变体种子的发育进程分析第46-48页
   ·突变体种子的组织切片观察胚乳的细胞化第48-50页
   ·ABA2 基因的表达水平的 qRT-PCR 分析第50页
   ·ABA2 基因在种子中的时空表达分析第50-51页
   ·突变体的内源 ABA 测定第51-52页
   ·外源施加 ABA 对 aba2 突变体的影响第52-55页
     ·外源施加 ABA 后突变体的角果恢复到与 Col 野生型一致第52-54页
     ·外源施加 ABA 后突变体的种子百粒重下降第54-55页
   ·突变体中种子大小相关基因的表达量分析第55-56页
   ·aba2 shb1-L 双突变体的表型分析第56-57页
4 讨论第57-60页
   ·ABA2 基因在拟南芥种子的不同发育时期表达第57页
   ·拟南芥内源 ABA 的降低能够使种子变大第57-58页
   ·ABA2 基因与 SHB1 基因共同参与对种子大小的控制第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录第69-70页
致谢第70页

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