中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1. 前言 | 第10-33页 |
·植物花粉的结构与功能 | 第10页 |
·植物柱头的结构与功能 | 第10-12页 |
·被子植物花粉与柱头的相互识别作用 | 第12-13页 |
·小G蛋白的研究 | 第13-14页 |
·Rab 蛋白及其功能研究 | 第14-23页 |
·Rab 蛋白的发现 | 第15页 |
·Rab 蛋白的结构特征 | 第15-16页 |
·Rab 蛋白的定位 | 第16-19页 |
·Rab 蛋白的作用机制 | 第19-20页 |
·Rab 蛋白的功能 | 第20-23页 |
·Rab 蛋白在囊泡运输中的作用 | 第20-23页 |
·Rab 蛋白与细胞骨架的建成 | 第23页 |
·病毒诱导的基因沉默(VIGS)及其在植物功能基因组学研究中的应用 | 第23-31页 |
·VIGS 的发现及基因沉默体系的建立 | 第24-25页 |
·VIGS 作用机制 | 第25-26页 |
·VIGS 的优缺点 | 第26-28页 |
·VIGS 在不同植物基因功能鉴定中的应用现状 | 第28-31页 |
·利用 VIGS 研究植物抗病途径中的基因 | 第28-30页 |
·利用 VIGS 研究发育相关基因 | 第30页 |
·利用 VIGS 研究细胞功能和新陈代谢相关基因 | 第30-31页 |
·VIGS 技术在植物功能基因组学中的应用前景 | 第31页 |
·本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
2 材料与方法 | 第33-41页 |
·实验材料 | 第33页 |
·植物材料及生长条件 | 第33页 |
·菌种和质粒 | 第33页 |
·酶和生化试剂 | 第33页 |
·PCR 引物 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-41页 |
·表达载体的构建 | 第33-37页 |
·植物组织总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
·反转录 | 第34页 |
·PCR 扩增 | 第34-35页 |
·酶切和回收 | 第35页 |
·连接反应 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第35-36页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第36-37页 |
·pMDC45::NbRab8 瞬时表达载体的构建 | 第37页 |
·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第37-38页 |
·烟草叶片注射 | 第38页 |
·花粉管的苯胺蓝染色分析 | 第38页 |
·花药的亚历山大染色 | 第38-39页 |
·共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第39页 |
·qRT-PCR | 第39-41页 |
·引物设计合成 | 第39页 |
·qRT-PCR 反应条件 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-50页 |
·本生烟草 Rab8-6 及其家族基因的分离和序列分析 | 第41-42页 |
·NbRab8 家族的亚细胞定位 | 第42-44页 |
·NbRab8 家族基因的时空表达模式分析 | 第44页 |
·利用病毒载体诱导转录后基因沉默系统研究 NbRab8 家族基因功能 | 第44-50页 |
·沉默区段的选择以及重组病毒载体的构建 | 第44-45页 |
·沉默效率的检测 | 第45-46页 |
·沉默植株的表型分析 | 第46-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |