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本生烟NbRab8家族基因的分离及功能分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1. 前言第10-33页
   ·植物花粉的结构与功能第10页
   ·植物柱头的结构与功能第10-12页
   ·被子植物花粉与柱头的相互识别作用第12-13页
   ·小G蛋白的研究第13-14页
   ·Rab 蛋白及其功能研究第14-23页
     ·Rab 蛋白的发现第15页
     ·Rab 蛋白的结构特征第15-16页
     ·Rab 蛋白的定位第16-19页
     ·Rab 蛋白的作用机制第19-20页
     ·Rab 蛋白的功能第20-23页
       ·Rab 蛋白在囊泡运输中的作用第20-23页
       ·Rab 蛋白与细胞骨架的建成第23页
   ·病毒诱导的基因沉默(VIGS)及其在植物功能基因组学研究中的应用第23-31页
     ·VIGS 的发现及基因沉默体系的建立第24-25页
     ·VIGS 作用机制第25-26页
     ·VIGS 的优缺点第26-28页
     ·VIGS 在不同植物基因功能鉴定中的应用现状第28-31页
       ·利用 VIGS 研究植物抗病途径中的基因第28-30页
       ·利用 VIGS 研究发育相关基因第30页
       ·利用 VIGS 研究细胞功能和新陈代谢相关基因第30-31页
     ·VIGS 技术在植物功能基因组学中的应用前景第31页
   ·本研究的目的和意义第31-33页
2 材料与方法第33-41页
   ·实验材料第33页
     ·植物材料及生长条件第33页
     ·菌种和质粒第33页
     ·酶和生化试剂第33页
     ·PCR 引物第33页
   ·实验方法第33-41页
     ·表达载体的构建第33-37页
       ·植物组织总 RNA 的提取第33-34页
       ·反转录第34页
       ·PCR 扩增第34-35页
       ·酶切和回收第35页
       ·连接反应第35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及碱法小量质粒 DNA 的提取第35-36页
       ·质粒 DNA 的酶切鉴定第36-37页
     ·pMDC45::NbRab8 瞬时表达载体的构建第37页
     ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化第37-38页
     ·烟草叶片注射第38页
     ·花粉管的苯胺蓝染色分析第38页
     ·花药的亚历山大染色第38-39页
     ·共聚焦显微镜观察和图像处理第39页
     ·qRT-PCR第39-41页
       ·引物设计合成第39页
       ·qRT-PCR 反应条件第39-41页
3 结果与分析第41-50页
   ·本生烟草 Rab8-6 及其家族基因的分离和序列分析第41-42页
   ·NbRab8 家族的亚细胞定位第42-44页
   ·NbRab8 家族基因的时空表达模式分析第44页
   ·利用病毒载体诱导转录后基因沉默系统研究 NbRab8 家族基因功能第44-50页
     ·沉默区段的选择以及重组病毒载体的构建第44-45页
     ·沉默效率的检测第45-46页
     ·沉默植株的表型分析第46-50页
4 讨论第50-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-62页
附录第62-66页
致谢第66页

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