羊—牛异种克隆胚胎供核细胞线粒体命运的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 第一章 核移植供核细胞线粒体命运的研究 | 第11-19页 |
| ·线粒体的结构和功能 | 第11-13页 |
| ·线粒体的结构 | 第11-13页 |
| ·线粒体在卵母细胞激活及胚胎发育过程中的作用 | 第13页 |
| ·泛素的生物学特性 | 第13-16页 |
| ·泛素化 | 第13-15页 |
| ·泛素化在卵母细胞成熟中的作用 | 第15-16页 |
| ·核移植供核细胞线粒体命运研究现状 | 第16-19页 |
| 试验研究 | 第19-47页 |
| 第二章 泛素基因真核表达载体的构建 | 第19-31页 |
| ·试验材料 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·菌株、细胞及质粒 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-27页 |
| ·泛素(Ubiquitin)基因的获得 | 第20页 |
| ·pVenus-Ub真核表达载体构建 | 第20-24页 |
| ·pVenus-Ub真核表达载体检测 | 第24-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-30页 |
| ·pVenus-Ub真核表达载体双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·荧光倒置显微镜下观察瞬时转染结果 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR检测目的基因表达 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 泛素基因在牛卵母细胞及孤雌胚胎中的表达 | 第31-37页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·卵母细胞 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟培养 | 第31-33页 |
| ·泛素基因体外转录及mRNA显微注射 | 第33页 |
| ·牛卵母细胞孤雌激活 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白表达检测 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-36页 |
| ·泛素基因在牛卵母细胞中的表达定位 | 第34-35页 |
| ·泛素基因在牛孤雌胚胎中的表达定位 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 羊-牛异种克隆胚供核细胞线粒体检测 | 第37-47页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·供核细胞 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-41页 |
| ·供核细胞线粒体荧光标记 | 第38页 |
| ·羊-牛异种克隆胚胎构建 | 第38-40页 |
| ·牛成熟卵母细胞及孤雌胚胎线粒体荧光染色 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·羊-牛异种克隆胚胎供核细胞线粒体荧光检测 | 第41-43页 |
| ·牛成熟卵母细胞及孤雌胚胎线粒体荧光检测 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
