| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 14α-去甲基化酶概述 | 第10-14页 |
| ·CYP51(Sterol 14α-demethylases,P45014DM)的概念 | 第10页 |
| ·CYP51的分布及底物类型 | 第10-11页 |
| ·CYP51的功能 | 第11-12页 |
| ·CYP51的结构 | 第12-14页 |
| 2 CYP51与抗真菌研究现状 | 第14-17页 |
| ·抗真菌药物的的类型 | 第14-15页 |
| ·14α-去甲基酶抑制剂(DMIs)的抑菌机制 | 第15-16页 |
| ·氮唑类抑制剂的抗真菌研究进展 | 第16-17页 |
| 3 DMIs药物对靶酶CYP51作用的方法学研究 | 第17-19页 |
| ·结合光谱法分析K_d | 第17页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第17-18页 |
| ·气-质联用法GC/MS(gas chromatography-mass spectrometry) | 第18页 |
| ·同位素掺入法 | 第18页 |
| ·薄层色谱(TLC)扫描法 | 第18页 |
| ·DMIs药物对靶酶CYP51作用的方法的比较 | 第18-19页 |
| 4 结合光谱法分析原理及分析方法 | 第19-20页 |
| 5 本文的研究目的、内容及研究意义 | 第20-22页 |
| 第二章 异源表达CYP51结合光谱的光谱法的建立 | 第22-35页 |
| 1 材料和仪器 | 第22页 |
| ·菌种及质粒 | 第22页 |
| ·药物及试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-24页 |
| ·药物对稻瘟菌生长抑制的测试方法 | 第22-23页 |
| ·稻瘟菌微粒体的制备 | 第23页 |
| ·微粒体的鉴定:葡萄糖-6-磷酸酶显示反应 | 第23页 |
| ·异源表达稻瘟菌CYP51膜蛋白的制备 | 第23页 |
| ·蛋白含量测定 | 第23页 |
| ·CYP51含量测定及活性测定(CO差光谱) | 第23-24页 |
| ·药物和靶酶结合能力的光谱分析方法 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-33页 |
| ·杀真菌剂对稻瘟菌生长抑制作用 | 第24-25页 |
| ·微粒体的鉴定结果 | 第25-26页 |
| ·蛋白含量测定:牛血清蛋白的标准曲线 | 第26页 |
| ·CO差光谱测定靶酶活性结果 | 第26-27页 |
| ·不表达CYP51的E. coli蛋白、CYP51及药物随时间变化的吸收光谱结果(空白对照实验结果) | 第27-29页 |
| ·靶酶活性对结合光谱的影响 | 第29-30页 |
| ·靶酶纯度对结合光谱的影响 | 第30-31页 |
| ·靶酶浓度对结合光谱的影响 | 第31-32页 |
| ·杀真菌剂的光谱分析结果与生长抑制120h-EC_(50)的关系 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 异源表达CYP51结合光谱法对不同结构药物的筛选 | 第35-47页 |
| 1 材料 | 第35页 |
| ·生物材料 | 第35页 |
| ·药物与试剂 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35页 |
| ·药物对稻瘟菌生长抑制的测试方法 | 第35页 |
| ·药物与CYP51的结合光谱分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| ·含吲哚环类药物与CYP51的结合光谱图及结合能力分析 | 第35-37页 |
| ·LHEXP类药物与CYP51的结合光谱图及结合能力分析 | 第37-38页 |
| ·三唑并咪唑啉酮类药物与CYP51的结合光谱图及结合能力分析 | 第38-39页 |
| ·咪唑啉酮类药物与CYP51的结合光谱图及结合能力分析 | 第39-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| ·药物与CYP51的结合能力与对稻瘟菌生长抑制结果的比较与分析 | 第44-45页 |
| ·不同结构的药物对CYP51的结合能力的比较与分析 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-58页 |
| 在读期间已发表的论文和待发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
