论文独创性声明 | 第1页 |
关于论文使用授权的声明 | 第2-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
前言 | 第9-24页 |
1 材料与方法 | 第24-34页 |
·材料 | 第24-28页 |
·实验动物 | 第24页 |
·疫苗及参考菌株 | 第24页 |
·实验仪器及试剂 | 第24-25页 |
·实验试剂的配制 | 第25-26页 |
·引物与探针 | 第26-28页 |
·方法 | 第28-34页 |
·动物免疫分组设计 | 第28页 |
·采样设计 | 第28页 |
·样品处理及粪便中菌群总DNA的提取 | 第28-29页 |
·标准菌株的培养 | 第29-30页 |
·标准菌株基因组的提取 | 第30页 |
·引物与探针的设计 | 第30-31页 |
·标准品的制备及鉴定 | 第31-32页 |
·实时荧光定量 PCR条件的建立 | 第32页 |
·实时荧光定量 PCR标准曲线的建立及线性范围的确定 | 第32页 |
·实时荧光定量 PCR探针特异性和敏感性的确定 | 第32-33页 |
·样品的检测分析 | 第33-34页 |
2 结果 | 第34-72页 |
·常规 PCR产物及测序结果 | 第34-37页 |
·大肠杆菌属常规 PCR产物及测序结果 | 第34-35页 |
·葡萄球菌属常规 PCR产物及测序结果 | 第35-36页 |
·乳酸杆菌属常规 PCR产物及测序结果 | 第36-37页 |
·实时荧光定量 PCR条件的优化 | 第37-40页 |
·大肠杆菌属 FQ-PCR条件的优化 | 第37-38页 |
·葡萄球菌属 FQ-PCR条件的优化 | 第38-39页 |
·乳酸杆菌属 FQ-PCR条件的优化 | 第39-40页 |
·实时荧光定量 PCR检测的特异性 | 第40-42页 |
·大肠杆菌属 FQ-PCR探针特异性 | 第40-41页 |
·葡萄球菌属 FQ-PCR探针特异性 | 第41页 |
·乳酸杆菌属 FQ-PCR探针特异性 | 第41-42页 |
·实时荧光定量 PCR检测的灵敏性分析 | 第42-44页 |
·大肠杆菌属 FQ-PCR检测的灵敏性 | 第42-43页 |
·葡萄球菌属 FQ-PCR检测的灵敏性 | 第43页 |
·乳酸杆菌属 FQ-PCR检测的灵敏性 | 第43-44页 |
·实时荧光定量 PCR标准曲线的建立及线性范围分析 | 第44-50页 |
·大肠杆菌属 FQ-PCR标准曲线及其线性范围 | 第44-46页 |
·葡萄球菌属 FQ-PCR标准曲线及其线性范围 | 第46-48页 |
·乳酸杆菌属 FQ-PCR标准曲线及其线性范围 | 第48-50页 |
·实时荧光定量 PCR对鸭消化道和呼吸道内菌群的定量 | 第50-72页 |
·FQ-PCR对鸭消化道和呼吸道内大肠杆菌属菌群的定量 | 第50-57页 |
·FQ-PCR对鸭消化道和呼吸道内葡萄球菌属菌群的定量 | 第57-64页 |
·FQ-PCR对鸭消化道和呼吸道内乳酸杆菌属菌群的定量 | 第64-72页 |
3 讨论 | 第72-86页 |
·实时荧光定量 PCR技术 | 第72-73页 |
·实时荧光定量 PCR引物与探针 | 第73-74页 |
·实时荧光定量 PCR标准曲线 | 第74页 |
·镁离子与探针浓度优化 | 第74-75页 |
·粪便样品中菌群总 DNA的提取 | 第75页 |
·樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群检测 | 第75-86页 |
·对照组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第75-78页 |
·口服 DPV弱毒组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第78-81页 |
·滴鼻 DPV弱毒组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第81-82页 |
·皮下注射 DPV弱毒组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第82-83页 |
·口服同居组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第83页 |
·滴鼻同居组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第83-84页 |
·皮下同居组樱桃谷鸭消化道和呼吸道内菌群 | 第84-86页 |
4 结论 | 第86-87页 |
·实时荧光定量 PCR方法建立 | 第86页 |
·DPV弱毒口服免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 | 第86页 |
·DPV弱毒滴鼻免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 | 第86页 |
·DPV弱毒皮下注射免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第95页 |