| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| ·家禽的生殖生理特点 | 第12-13页 |
| ·卵泡的生长和发育 | 第12页 |
| ·卵泡发育的激素调节 | 第12-13页 |
| ·INH的一般特性 | 第13-14页 |
| ·INH免疫原的研究动态 | 第14-15页 |
| ·抑制素、卵泡抑素和活化素对FSH的共同调控 | 第15-22页 |
| ·活化素的结构特点 | 第15页 |
| ·卵泡抑素的分子结构 | 第15页 |
| ·INH、ACT和FS的生理功能 | 第15-18页 |
| ·INH的生物学作用 | 第15-16页 |
| ·ACT的生理功能 | 第16-17页 |
| ·FS的生物学功能 | 第17-18页 |
| ·INH／FS抑制ACT生物活性的作用机理 | 第18-22页 |
| ·ACT的信号转导 | 第18页 |
| ·INHR | 第18-19页 |
| ·INHBP | 第18-19页 |
| ·β-二聚糖 | 第19页 |
| ·FS对ACT活性的抑制过程 | 第19-22页 |
| ·鸡INH的研究进展 | 第22-28页 |
| ·INH的主要来源 | 第22-23页 |
| ·INH的次要来源 | 第23页 |
| ·鸡INH各亚基的分子克隆 | 第23-27页 |
| ·α-亚基的克隆 | 第23页 |
| ·β_A-亚基的克隆 | 第23-24页 |
| ·β_B-亚基的分子克隆 | 第24-27页 |
| ·鸡INH的生理作用 | 第27页 |
| ·鸡INH的内分泌作用 | 第27页 |
| ·INH的自分泌／旁分泌作用 | 第27页 |
| ·其它禽类INH的研究情况 | 第27页 |
| ·结论 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章 鸡INH各亚基成熟区cDNA的克隆和序列分析 | 第29-51页 |
| ·材料 | 第29-34页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·质粒 | 第29页 |
| ·培养基LB(Luria-Bertani Medium) | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-32页 |
| ·酶 | 第32页 |
| ·抗生素 | 第32页 |
| ·试剂盒 | 第32-34页 |
| ·方法 | 第34-39页 |
| ·鸡卵泡颗粒细胞总RNA的提取 | 第34页 |
| ·引物合成 | 第34页 |
| ·反转录(Reverse transcription)卵泡总RNA | 第34-35页 |
| ·RT-PCR结果的电泳检测 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR产物的克隆 | 第36-38页 |
| ·连接反应 | 第36页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第36页 |
| ·连接产物转化DH 5α | 第36-37页 |
| ·平板的准备 | 第36-37页 |
| ·转化 | 第37页 |
| ·重组子的筛选、鉴定 | 第37-38页 |
| ·碱裂解法小批量抽提质粒DNA | 第37页 |
| ·PCR扩增鉴定重组质粒 | 第37-38页 |
| ·重组子的酶切鉴定 | 第38页 |
| ·测序 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-41页 |
| ·鸡INH α-、β_A-、β_B-亚基成熟区cDNA克隆的结果分析 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果 | 第39页 |
| ·阳性克隆子的PCR鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·酶切鉴定 | 第40页 |
| ·鸡INH α-、β_A-、β_B-亚基成熟区的cDNA序列分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-51页 |
| 第三章 鸡INHα-亚基重组表达载体的构建及其在BL21(DE3)中的表达 | 第51-61页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·质粒 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·抗生素 | 第52页 |
| ·试剂盒 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·重组表达载体的构建(INHα-pET 30α) | 第53-56页 |
| ·重组表达载体的构建策略 | 第53-54页 |
| ·重组克隆载体、空表达载体的酶切消化 | 第54-55页 |
| ·目的DNA片段的回收 | 第54-55页 |
| ·表达载体pET 30α的准备 | 第55页 |
| ·酶切产物的连接 | 第55页 |
| ·PCR扩增反应 | 第55页 |
| ·重组子的酶切鉴定 | 第55页 |
| ·重组载体(INHα-pET 30α)的序列测定 | 第55-56页 |
| ·重组子在BL21(DE3)中的表达 | 第56-58页 |
| ·重组子的诱导表达 | 第56页 |
| ·目的融合蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达产物 | 第57-58页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达产物 | 第57页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-59页 |
| ·重组表达载体INHα-pET 30α的PCR扩增鉴定 | 第58页 |
| ·双酶切鉴定阳性重组子 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE电泳检验融合表达产物 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 后续工作 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-78页 |
