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莲膜联蛋白的鉴定及其在种子耐热性和活力中的功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-34页
   ·高温胁迫第11-18页
     ·高温胁迫对植物的影响第11-12页
     ·高温与氧化胁迫第12-13页
     ·植物耐热机制第13-17页
     ·种子耐热性研究第17-18页
   ·种子活力相关研究第18-21页
     ·种子活力概述第18-19页
     ·种子老化概述第19-21页
     ·种子活力测定第21页
   ·莲种子研究概述第21-22页
   ·植物膜联蛋白(annexin)研究进展第22-30页
     ·植物annexin 的结构第23-24页
     ·植物annexin 的定位第24-26页
     ·植物annexin 的表达第26-27页
     ·植物annexin 的生物学活性及功能第27-30页
   ·本研究的目的意义第30-32页
   ·研究内容及技术路线第32-34页
     ·莲胚轴耐热相关蛋白的蛋白质组学鉴定第32页
     ·莲annexin 在高温胁迫和种子活力中的功能研究第32-34页
第二章 莲膜联蛋白(NnANN1)的蛋白质鉴定和纯化第34-71页
   ·材料和试剂第34-39页
     ·实验材料第34页
     ·实验试剂、药品及消耗品第34-35页
     ·溶液及试剂配制第35-38页
     ·PCR 引物合成及测序第38页
     ·生物信息学分析第38-39页
   ·实验设备第39页
   ·实验方法第39-51页
     ·莲种子的高温处理第39-40页
     ·TTC 鉴定种子活力第40页
     ·蛋白质提取及定量第40-41页
     ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第41-42页
     ·双向电泳第42-43页
     ·蛋白质MALDI/TOF MS/MS 鉴定第43-44页
     ·莲种子胚轴总RNA 提取第44-45页
     ·cDNA 第一链的合成第45页
     ·目的蛋白NnANN1 的基因扩增第45-47页
     ·原核表达及蛋白纯化第47-49页
     ·抗体的制备第49页
     ·Western blot第49-50页
     ·数据统计及分析第50-51页
   ·结果与分析第51-69页
     ·莲种子耐热性鉴定第51-53页
     ·比较蛋白质组学鉴定莲胚轴耐热应答蛋白第53-60页
     ·莲膜联蛋白NnANN1 及其编码基因克隆第60-65页
     ·莲膜联蛋白NnANN1 的表达纯化第65-69页
   ·讨论第69-71页
第三章 莲种子NnANN1 在提高种子耐热性和活力中的功能分析第71-105页
   ·材料和试剂第71-73页
     ·实验材料第71页
     ·实验试剂,药品及消耗品第71-72页
     ·溶液及试剂配制第72-73页
   ·实验设备第73-74页
   ·实验方法第74-82页
     ·RNA 提取及逆转录合成cDNA第74页
     ·qRT-PCR 反应第74-75页
     ·蛋白质提取及定量第75页
     ·Western blot第75页
     ·亚细胞定位第75-76页
     ·重组菌耐热性鉴定第76页
     ·拟南芥转化第76-82页
     ·其他实验方法第82页
   ·结果与分析第82-102页
     ·RNA 提取第82-83页
     ·高温处理后NnANN1 表达模式第83-85页
     ·NnANN1 的表达模式及亚细胞定位第85-87页
     ·NnANN1 转化提高重组菌耐热性第87-90页
     ·NnANN1 提高转基因拟南芥种子耐热性和活力第90-99页
     ·拟南芥突变株 ann1 和 ann2 种子耐热性及活力第99-102页
   ·讨论第102-105页
第四章 论文总结与展望第105-106页
   ·总结第105页
   ·展望及有待进一步研究的问题第105-106页
参考文献第106-127页
附录第127-130页
 附录1:缩略词表第127-129页
 附录2:攻读博士学位期间发表论文(含待发表)第129-130页
致谢第130页

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