| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| ·种子活力研究进展 | 第12-16页 |
| ·种子活力的概念 | 第12-13页 |
| ·种子活力的生理机理 | 第13-15页 |
| ·种子活力的遗传控制和相关性状的QTL 定位 | 第15-16页 |
| ·种子活力与miRNA 的关系 | 第16页 |
| ·植物金属硫蛋白研究进展 | 第16-26页 |
| ·植物MTs 的分类、理化特性和空间结构 | 第16-20页 |
| ·植物MT 基因的结构特点 | 第20页 |
| ·植物MT 基因表达调控 | 第20-23页 |
| ·植物MTs 功能研究 | 第23-26页 |
| ·植物小分热激蛋白研究进展 | 第26-34页 |
| ·植物sHSPs 的分类、结构和生化特性 | 第27-29页 |
| ·植物sHSPs 基因的表达调控 | 第29-31页 |
| ·植物sHSPs 的功能 | 第31-34页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 过表达莲NnMT2a 和NnMT3 能提高拟南芥种子的萌发活力 | 第36-93页 |
| ·材料与试剂 | 第36-40页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·载体和菌株 | 第36-37页 |
| ·试剂和药品 | 第37-38页 |
| ·试剂配制 | 第38-40页 |
| ·仪器及设备 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-57页 |
| ·生物信息学分析 | 第41页 |
| ·实时定量PCR | 第41-45页 |
| ·PCR 产物的T-A 克隆 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·融合蛋白的诱导表达和提取 | 第48-49页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第49页 |
| ·融合蛋白的纯化与抗体制备 | 第49-50页 |
| ·瞬时表达及激光共聚焦显微观察 | 第50页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第50页 |
| ·根癌农杆菌感受态的制备与转化 | 第50-51页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第51-52页 |
| ·转基因拟南芥的筛选 | 第52-53页 |
| ·转基因拟南芥的分子鉴定 | 第53-55页 |
| ·拟南芥种子人工老化实验 | 第55-56页 |
| ·拟南芥种子SOD 提取及活性测定 | 第56-57页 |
| ·拟南芥种子TTC 活力染色实验 | 第57页 |
| ·拟南芥种子逆境胁迫萌发实验 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-87页 |
| ·NnMT2a、NnMT2b 和NnMT3 的克隆和序列分析 | 第57-60页 |
| ·NnMT2a、NnMT2b 和NnMT3 的基因表达分析 | 第60-66页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 融合蛋白的表达、纯化和抗体制备 | 第66-70页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 定位于细胞质和核质中 | 第70-75页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第75-81页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 转基因拟南芥表型观察 | 第81页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 转基因种子的人工老化处理 | 第81-87页 |
| ·NnMT2a 和NnMT3 转基因种子在逆境条件下的萌发 | 第87页 |
| ·讨论 | 第87-93页 |
| ·莲MT 基因家族是种子中丰富表达的一类基因 | 第87-89页 |
| ·成功表达和纯化了NnMT2a 和 NnMT3 融合蛋白 | 第89-90页 |
| ·NnMT2a 和 NnMT3 是影响种子活力的重要候选基因 | 第90-93页 |
| 第三章 过表达莲NnHSP17.5 能提高拟南芥种子的萌发活力和幼苗耐热性 | 第93-122页 |
| ·材料与试剂 | 第93页 |
| ·转膜缓冲液的配制 | 第93页 |
| ·仪器与设备 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-95页 |
| ·莲种子的高温胁迫 | 第93页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第93-94页 |
| ·Western blot 检测 | 第94-95页 |
| ·拟南芥幼苗的耐热性实验 | 第95页 |
| ·其它实验方法 | 第95页 |
| ·结果 | 第95-119页 |
| ·NnHSP17.5 基因的克隆和生物信息学分析 | 第95-99页 |
| ·NnHSP17.5 基因的表达分析 | 第99-101页 |
| ·NnHSP17.5 融合蛋白的表达、纯化和抗体制备 | 第101-105页 |
| ·NnHSP17.5 定位于细胞质和核质中 | 第105-108页 |
| ·NnHSP17.5 转基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第108-113页 |
| ·NnHSP17.5 转基因拟南芥表型观察 | 第113页 |
| ·NnHSP17.5 转基因拟南芥种子的人工老化处理 | 第113-117页 |
| ·NnHSP17.5 转基因拟南芥幼苗的耐热性检测 | 第117-119页 |
| ·讨论 | 第119-122页 |
| ·NnHSP17.5 属于细胞质II 类sHSPs | 第119页 |
| ·NnHSP17.5 的表达受发育信号和逆境信号的诱导 | 第119-120页 |
| ·NnHSP17.5 是影响种子活力的重要候选基因 | 第120-122页 |
| 第四章 结论与展望 | 第122-123页 |
| ·结论 | 第122页 |
| ·展望 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-137页 |
| 附录1：引物列表 | 第137-139页 |
| 附录2：缩略词表 | 第139-141页 |
| 附录3：载体图谱 | 第141-144页 |
| 附录4：攻读博士学位期间发表论文和申请专利 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
