| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| ·安莎类抗生素简介 | 第13-14页 |
| ·安莎类抗生素生物合成途径的研究 | 第14-21页 |
| ·PCR检测某些生物合成保守基因以及其在定向筛选抗生素产生菌中的应用 | 第21-22页 |
| ·基因阻断方法筛选微生物产生菌 | 第22-23页 |
| ·链霉菌的转化系统 | 第23-24页 |
| ·安莎类抗生素的早期鉴别 | 第24-25页 |
| ·立题依据 | 第25-27页 |
| 第二章 实验材料 | 第27-36页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·质粒 | 第27页 |
| ·特殊试剂与酶 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-32页 |
| ·缓冲液 | 第32-34页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第34-36页 |
| 第三章 实验方法 | 第36-42页 |
| ·碱变性法提取E.coli质粒 | 第36页 |
| ·重组质粒的快速鉴定 | 第36页 |
| ·限制酶切反应 | 第36页 |
| ·DNA连接反应 | 第36页 |
| ·PCR反应 | 第36-37页 |
| ·E.coli DH-5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第37页 |
| ·微波法提取链霉菌总DNA | 第37页 |
| ·TakaRa一般DNA片段的克隆实验(试剂盒) | 第37-38页 |
| ·DNA电泳及片段回收 | 第38页 |
| ·线性DNA的去磷酸化 | 第38页 |
| ·链霉菌原生质体的制备、再生及DNA转化 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌/链霉菌的接合转移实验 | 第39-40页 |
| ·菌浓的测定方法-Packed volume(PCV) | 第40页 |
| ·发酵培养物的提取 | 第40页 |
| ·菌种发酵及抗菌活性的测定 | 第40页 |
| ·疱疹病毒活性检测 | 第40页 |
| ·抗肿瘤活性的检测(SRB法) | 第40-41页 |
| ·苯安莎类抗生素的碱性显色方法 | 第41页 |
| ·重组子在大肠杆菌中的诱导表达 | 第41页 |
| ·包涵体的鉴定 | 第41-42页 |
| 第四章 结果和讨论 | 第42-75页 |
| 第一部分 AHBA合酶基因阳性菌株的初步研究 | 第42-50页 |
| ·AHBA阳性菌株发酵培养基和生物活性的研究 | 第43-45页 |
| ·AHAB阳性菌株的抗药性实验 | 第45-47页 |
| ·AHBA阳性菌株的系统发生学分析 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第二部分 AHBA合酶基因阻断研究 | 第50-63页 |
| ·菌株22-24、8-21和2209的原生质体转化的尝试研究 | 第50-52页 |
| ·接合转移系统的建立 | 第52-58页 |
| ·基因阻断株的获得 | 第58-61页 |
| ·基因阻断变株发酵产物的初步研究 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 第三部分 安莎类抗生素的早期鉴别 | 第63-66页 |
| ·碱变性法鉴别苯安莎类抗生素 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第四部分 AHBA合酶蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第66-75页 |
| ·菌株4353中AHBA合酶全基因序列的获得 | 第66-68页 |
| ·表达载体的构建 | 第68-72页 |
| ·重组子在大肠杆菌中的表达 | 第72-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| 第五章 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 附录 | 第81页 |
