| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| ·红霉素及其产生菌的研究进展 | 第13-18页 |
| ·理化性质和结构特点 | 第13-14页 |
| ·抗菌活性 | 第14页 |
| ·临床应用与不良反应 | 第14-15页 |
| ·生物合成途径 | 第15-17页 |
| ·菌种选育 | 第17页 |
| ·生产工艺 | 第17-18页 |
| ·透明颤菌血红蛋白基因的应用研究 | 第18-21页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的结构及特性 | 第18页 |
| ·透明颤菌血红蛋白基因的克隆、表达和调控 | 第18-20页 |
| ·透明颤菌血红蛋白基因的应用 | 第20-21页 |
| ·本课题的立题意义和研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-28页 |
| ·菌种与质粒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-25页 |
| ·缓冲液 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-35页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第28页 |
| ·链霉菌质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·链霉菌总 DNA的提取 | 第29页 |
| ·重组质粒的快速鉴定 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·质粒 DNA转化大肠杆菌 | 第29页 |
| ·DNA酶切和连接 | 第29-30页 |
| ·DNA电泳和片段回收 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30-31页 |
| ·原生质体的制备、质粒DNA转化 | 第31页 |
| ·接合转移试验 | 第31-32页 |
| ·红霉素发酵工艺 | 第32页 |
| ·发酵液中红霉素的提取 | 第32页 |
| ·红霉素HPLC条件 | 第32页 |
| ·发酵液效价的生物学测定 | 第32-33页 |
| ·菌种保藏 | 第33页 |
| ·工程菌株稳定性考察方法 | 第33页 |
| ·CO结合差光谱分析方法 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-58页 |
| ·糖多孢红霉菌出发菌株的自然选育 | 第35页 |
| ·主导型菌落的确定 | 第35页 |
| ·出发菌株的确定及其生产能力与稳定性的考察 | 第35页 |
| ·vgb基因表达载体的构建 | 第35-43页 |
| ·质粒pSPU236的构建 | 第36-37页 |
| ·质粒pSPU238和pSPU239的构建 | 第37-41页 |
| ·质粒pSPU240和pSPU242的构建 | 第41-43页 |
| ·vgb基因在TK24中的表达 | 第43-44页 |
| ·重组载体转化糖多孢红霉菌及高产基因工程菌株的筛选 | 第44-50页 |
| ·E.coli ET12567(pSPU240和pSPU242)与S.erythraea的接合转移实验 | 第44-45页 |
| ·高产基因工程菌株的筛选 | 第45-50页 |
| ·VHb蛋白的表达对糖多孢红霉菌的影响 | 第50-53页 |
| ·装瓶量对转化菌株和对照菌产抗能力的影响 | 第50-52页 |
| ·豆油量对转化菌株和对照菌产抗能力的影响 | 第52-53页 |
| ·VHb蛋白的生物活性验证 | 第53-54页 |
| ·基因工程菌株的稳定性考察 | 第54-58页 |
| ·生产能力稳定性考察 | 第54-55页 |
| ·基因稳定性考察 | 第55-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64页 |