| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| ·问题的提出与研究意义 | 第12-14页 |
| ·问题的提出 | 第12-14页 |
| ·研究的意义 | 第14页 |
| ·国内外研究现状 | 第14-24页 |
| ·髓核细胞的3D 培养模型 | 第14-16页 |
| ·髓核组织生物力学特性 | 第16-20页 |
| ·椎间盘退行性变与蛋白多糖 | 第20-21页 |
| ·髓核细胞的力学生物学特性 | 第21-24页 |
| ·本文研究的目的和内容 | 第24-26页 |
| ·本文研究的目的 | 第24页 |
| ·本文研究的内容 | 第24-26页 |
| 2 限制性与非限制性力学加载对髓核细胞的影响 | 第26-50页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·实验细胞 | 第26-27页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第27页 |
| ·主要实验试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·髓核细胞的原代培养 | 第28-29页 |
| ·藻酸盐凝胶的制备及髓核细胞的3D 培养 | 第29-30页 |
| ·DNA 含量检测－藻酸盐凝胶不同聚合时间的对髓核细胞的影响 | 第30页 |
| ·髓核细胞存活率检测 | 第30-31页 |
| ·限制性和非限制性力学加载 | 第31-33页 |
| ·蛋白多糖基因表达的检测 | 第33-36页 |
| ·细胞及细胞核形变实验 | 第36-38页 |
| ·实验结果 | 第38-47页 |
| ·藻酸盐凝胶中髓核细胞形态 | 第38页 |
| ·DNA 含量 | 第38-39页 |
| ·细胞存活率 | 第39-40页 |
| ·周期性应力加载下藻酸盐凝胶材料力学特性 | 第40-41页 |
| ·周期性应力加载下蛋白多糖基因表达 | 第41-43页 |
| ·静态应变加载下藻酸盐凝胶材料力学特性 | 第43页 |
| ·静态应变加载下蛋白多糖基因表达 | 第43-45页 |
| ·细胞及细胞核形变 | 第45-47页 |
| ·分析讨论 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 3 双相线性数学模型计算藻酸盐凝胶内部压强 | 第50-58页 |
| ·引言 | 第50-51页 |
| ·双相线性数学模型的建立与计算 | 第51-52页 |
| ·计算结果 | 第52-55页 |
| ·酸盐凝胶在限制性压缩腔底部压强 | 第52-53页 |
| ·酸盐凝胶中各位点压强随时间的变化 | 第53-55页 |
| ·分析讨论 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 4 流体剪切力对髓核细胞表达蛋白多糖 Lumican 的影响 | 第58-78页 |
| ·引言 | 第58-59页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·实验细胞 | 第59页 |
| ·主要实验仪器设备及耗材 | 第59页 |
| ·主要实验试剂 | 第59-60页 |
| ·主要试剂的配制 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-71页 |
| ·髓核细胞的培养 | 第61-63页 |
| ·流体剪切力实验装置 | 第63-66页 |
| ·Real time PCR 检测Lumcian 基因表达 | 第66-69页 |
| ·Western blot 检测Lumcian 蛋白表达 | 第69-71页 |
| ·实验结果 | 第71-74页 |
| ·不同Matrigel 浓度对髓核细胞贴壁的影响 | 第71-72页 |
| ·较高的流体剪切应力上调髓核细胞Lumican 基因表达 | 第72-73页 |
| ·流体剪切应力上调髓核细胞Lumican 蛋白表达 | 第73-74页 |
| ·分析讨论 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-78页 |
| 5 流体剪切力激活髓核细胞 ERK 并引起细胞骨架重排 | 第78-92页 |
| ·引言 | 第78-81页 |
| ·实验材料 | 第81-83页 |
| ·实验细胞 | 第81页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第81页 |
| ·实验试剂 | 第81-82页 |
| ·主要试剂的配制 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-86页 |
| ·髓核细胞流体剪切应力加载 | 第83-84页 |
| ·Western blot 检测ERK 磷酸化 | 第84-86页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第86页 |
| ·实验结果 | 第86-89页 |
| ·流体剪切应力激活髓核细胞中ERK 磷酸化 | 第86-87页 |
| ·流体剪切应力促进髓核细胞中应力纤维形成 | 第87-88页 |
| ·流体剪切应力改变Cytokeratin 8 颗粒在髓核细胞中的分布 | 第88-89页 |
| ·分析讨论 | 第89-90页 |
| ·本章小结 | 第90-92页 |
| 6 结论与展望 | 第92-96页 |
| ·主要结论 | 第92-93页 |
| ·后续工作展望 | 第93-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-110页 |
| 附录 | 第110页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第110页 |
| B. 作者在攻读学位期间取得的科研成果目录 | 第110页 |
