中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
英文缩写索引 | 第14-15页 |
1 绪论 | 第15-31页 |
·问题的提出与研究意义 | 第15-16页 |
·国内外研究现状 | 第16-26页 |
·肝细胞性肝癌 | 第16页 |
·肝癌的流行病学 | 第16页 |
·肝癌的主要致病因素 | 第16-18页 |
·治疗肝癌的主要方法 | 第18-19页 |
·治疗肝癌的中药研究进展 | 第19-23页 |
·土贝母苷甲的化学结构与毒理、药理作用 | 第23-26页 |
·本课题的研究目的和研究内容 | 第26-31页 |
·课题的研究目的与意义 | 第26页 |
·课题的研究内容 | 第26-27页 |
·课题研究的技术路线 | 第27-28页 |
·本课题的创新点 | 第28-31页 |
2 土贝母苷甲抑制体外培养的肝细胞生长的研究 | 第31-43页 |
·引言 | 第31页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第31-33页 |
·细胞来源 | 第31页 |
·实验材料及仪器 | 第31-32页 |
·实验试剂 | 第32页 |
·试剂的配制 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-36页 |
·细胞复苏、培养和冻存 | 第33-34页 |
·台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲对HepG2 细胞和L-02 细胞生长的影响 | 第34-35页 |
·MTT 法检测土贝母苷甲对体外培养的人肝细胞生长的影响 | 第35页 |
·流式细胞术检测土贝母苷甲对HepG2 细胞周期的影响 | 第35-36页 |
·统计学处理 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-41页 |
·台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲抑制HepG2 细胞和L-02 细胞的增殖 | 第36-38页 |
·MTT 法检测土贝母苷甲抑制体外培养的人肝细胞的增殖 | 第38-40页 |
·土贝母苷甲引起HepG2 细胞周期阻滞 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
3 土贝母苷甲诱导 HepG2 细胞凋亡及其机制的研究 | 第43-65页 |
·引言 | 第43页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第43-45页 |
·细胞来源 | 第43页 |
·实验材料及仪器 | 第43-44页 |
·实验试剂 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-51页 |
·相差显微镜观察土贝母苷甲诱导HepG2 细胞形态的变化 | 第45页 |
·荧光显微镜观察土贝母苷甲诱导HepG2 细胞核和微管形态的变化 | 第45-46页 |
·流式细胞术检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞凋亡的变化 | 第46页 |
·流式细胞术检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞线粒体膜电位的变化 | 第46-47页 |
·分光光度法检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞caspase -3,-8,-9 活性的变化 | 第47-48页 |
·BCA 法定量检测蛋白浓度 | 第48页 |
·Western blotting 分析 | 第48-51页 |
·统计学处理 | 第51页 |
·实验结果 | 第51-59页 |
·土贝母苷甲诱导细胞形态的变化 | 第51-52页 |
·土贝母苷甲诱导细胞核和微管形态的变化 | 第52-53页 |
·土贝母苷甲诱导细胞的早期凋亡和晚期凋亡 | 第53-55页 |
·土贝母苷甲诱导线粒体膜电位去极化 | 第55-56页 |
·土贝母苷甲诱导caspase-3,-9 的活化 | 第56-58页 |
·土贝母苷甲诱导Cyt-c 释放和Bax/Bcl-2 比值升高 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-63页 |
·小结 | 第63-65页 |
4 土贝母苷甲抑制 HepG2 细胞迁移、侵袭及其相关机制的研究 | 第65-77页 |
·引言 | 第65-66页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第66-67页 |
·细胞来源 | 第66页 |
·实验材料及仪器 | 第66页 |
·实验试剂 | 第66-67页 |
·实验方法 | 第67-70页 |
·Transwell 小室法检测细胞的迁移能力 | 第67页 |
·Transwell 小室法检测细胞的侵袭能力 | 第67-68页 |
·明胶酶谱实验分析MMP-2 和MMP-9 的活性 | 第68-69页 |
·土贝母苷甲诱导的HepG2 细胞F-actin 和细胞核变化的荧光染色观察 | 第69-70页 |
·统计学处理 | 第70页 |
·实验结果 | 第70-75页 |
·土贝母苷甲抑制肝癌HepG2 细胞的迁移 | 第70-71页 |
·土贝母苷甲抑制肝癌HepG2 细胞的侵袭 | 第71-72页 |
·土贝母苷甲降低MMP-2 和MMP-9 的表达 | 第72-73页 |
·HepG2 细胞骨架F-actin 和细胞核荧光染色结果 | 第73-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
5 土贝母苷甲对 HepG2 细胞生物力学性质影响的研究 | 第77-101页 |
·引言 | 第77页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第77-78页 |
·细胞来源 | 第77页 |
·实验材料及仪器 | 第77-78页 |
·实验试剂 | 第78页 |
·实验方法 | 第78-89页 |
·磁微粒扭转系统(OMTC)的介绍 | 第78-86页 |
·HepG2 细胞和L02 细胞骨架力学参数刚度的测量 | 第86-89页 |
·统计学处理 | 第89页 |
·实验结果 | 第89-97页 |
·OMTC 噪音分析的实验结果 | 第89-94页 |
·土贝母苷甲降低HepG2 细胞和L-02 细胞骨架的刚度 | 第94-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
·小结 | 第99-101页 |
6 结论与展望 | 第101-105页 |
·本文的主要结论 | 第101-103页 |
·土贝母苷甲抑制体外培养的人肝细胞的生长 | 第101-102页 |
·土贝母苷甲诱导HepG2 细胞的凋亡 | 第102页 |
·土贝母苷甲抑制HepG2 细胞的迁移与侵袭 | 第102-103页 |
·土贝母苷甲改变HepG2 细胞的生物力学性质 | 第103页 |
·后续工作建议与展望 | 第103-105页 |
致谢 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
附录 | 第121页 |
A.作者在攻读博士学位期间发表及待发表的论文目录 | 第121页 |
B. 参与的科研项目 | 第121页 |