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土贝母苷甲对体外培养肝癌细胞(HepG2)抑制作用及其相关机制的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-14页
英文缩写索引第14-15页
1 绪论第15-31页
   ·问题的提出与研究意义第15-16页
   ·国内外研究现状第16-26页
     ·肝细胞性肝癌第16页
     ·肝癌的流行病学第16页
     ·肝癌的主要致病因素第16-18页
     ·治疗肝癌的主要方法第18-19页
     ·治疗肝癌的中药研究进展第19-23页
     ·土贝母苷甲的化学结构与毒理、药理作用第23-26页
   ·本课题的研究目的和研究内容第26-31页
     ·课题的研究目的与意义第26页
     ·课题的研究内容第26-27页
     ·课题研究的技术路线第27-28页
     ·本课题的创新点第28-31页
2 土贝母苷甲抑制体外培养的肝细胞生长的研究第31-43页
   ·引言第31页
   ·实验材料、仪器与试剂第31-33页
     ·细胞来源第31页
     ·实验材料及仪器第31-32页
     ·实验试剂第32页
     ·试剂的配制第32-33页
   ·实验方法第33-36页
     ·细胞复苏、培养和冻存第33-34页
     ·台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲对HepG2 细胞和L-02 细胞生长的影响第34-35页
     ·MTT 法检测土贝母苷甲对体外培养的人肝细胞生长的影响第35页
     ·流式细胞术检测土贝母苷甲对HepG2 细胞周期的影响第35-36页
     ·统计学处理第36页
   ·实验结果第36-41页
     ·台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲抑制HepG2 细胞和L-02 细胞的增殖第36-38页
     ·MTT 法检测土贝母苷甲抑制体外培养的人肝细胞的增殖第38-40页
     ·土贝母苷甲引起HepG2 细胞周期阻滞第40-41页
   ·讨论第41-42页
   ·小结第42-43页
3 土贝母苷甲诱导 HepG2 细胞凋亡及其机制的研究第43-65页
   ·引言第43页
   ·实验材料、仪器与试剂第43-45页
     ·细胞来源第43页
     ·实验材料及仪器第43-44页
     ·实验试剂第44-45页
   ·实验方法第45-51页
     ·相差显微镜观察土贝母苷甲诱导HepG2 细胞形态的变化第45页
     ·荧光显微镜观察土贝母苷甲诱导HepG2 细胞核和微管形态的变化第45-46页
     ·流式细胞术检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞凋亡的变化第46页
     ·流式细胞术检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞线粒体膜电位的变化第46-47页
     ·分光光度法检测土贝母苷甲诱导HepG2 细胞caspase -3,-8,-9 活性的变化第47-48页
     ·BCA 法定量检测蛋白浓度第48页
     ·Western blotting 分析第48-51页
     ·统计学处理第51页
   ·实验结果第51-59页
     ·土贝母苷甲诱导细胞形态的变化第51-52页
     ·土贝母苷甲诱导细胞核和微管形态的变化第52-53页
     ·土贝母苷甲诱导细胞的早期凋亡和晚期凋亡第53-55页
     ·土贝母苷甲诱导线粒体膜电位去极化第55-56页
     ·土贝母苷甲诱导caspase-3,-9 的活化第56-58页
     ·土贝母苷甲诱导Cyt-c 释放和Bax/Bcl-2 比值升高第58-59页
   ·讨论第59-63页
   ·小结第63-65页
4 土贝母苷甲抑制 HepG2 细胞迁移、侵袭及其相关机制的研究第65-77页
   ·引言第65-66页
   ·实验材料、仪器与试剂第66-67页
     ·细胞来源第66页
     ·实验材料及仪器第66页
     ·实验试剂第66-67页
   ·实验方法第67-70页
     ·Transwell 小室法检测细胞的迁移能力第67页
     ·Transwell 小室法检测细胞的侵袭能力第67-68页
     ·明胶酶谱实验分析MMP-2 和MMP-9 的活性第68-69页
     ·土贝母苷甲诱导的HepG2 细胞F-actin 和细胞核变化的荧光染色观察第69-70页
     ·统计学处理第70页
   ·实验结果第70-75页
     ·土贝母苷甲抑制肝癌HepG2 细胞的迁移第70-71页
     ·土贝母苷甲抑制肝癌HepG2 细胞的侵袭第71-72页
     ·土贝母苷甲降低MMP-2 和MMP-9 的表达第72-73页
     ·HepG2 细胞骨架F-actin 和细胞核荧光染色结果第73-75页
   ·讨论第75-76页
   ·小结第76-77页
5 土贝母苷甲对 HepG2 细胞生物力学性质影响的研究第77-101页
   ·引言第77页
   ·实验材料、仪器与试剂第77-78页
     ·细胞来源第77页
     ·实验材料及仪器第77-78页
     ·实验试剂第78页
   ·实验方法第78-89页
     ·磁微粒扭转系统(OMTC)的介绍第78-86页
     ·HepG2 细胞和L02 细胞骨架力学参数刚度的测量第86-89页
     ·统计学处理第89页
   ·实验结果第89-97页
     ·OMTC 噪音分析的实验结果第89-94页
     ·土贝母苷甲降低HepG2 细胞和L-02 细胞骨架的刚度第94-97页
   ·讨论第97-99页
   ·小结第99-101页
6 结论与展望第101-105页
   ·本文的主要结论第101-103页
     ·土贝母苷甲抑制体外培养的人肝细胞的生长第101-102页
     ·土贝母苷甲诱导HepG2 细胞的凋亡第102页
     ·土贝母苷甲抑制HepG2 细胞的迁移与侵袭第102-103页
     ·土贝母苷甲改变HepG2 细胞的生物力学性质第103页
   ·后续工作建议与展望第103-105页
致谢第105-107页
参考文献第107-121页
附录第121页
 A.作者在攻读博士学位期间发表及待发表的论文目录第121页
 B. 参与的科研项目第121页

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