| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-11页 |
| 第一章 采用m RNA差异显示技术筛选乳腺癌转移相关基因 | 第11-29页 |
| ·材料与方法 | 第11-16页 |
| ·病例选择及标本取材 | 第11-12页 |
| ·m RNA DD筛选乳腺原发癌与淋巴结转移癌的差异表达基因 | 第12-14页 |
| ·同位素标记的反向斑点杂交验证筛选基因 | 第14-15页 |
| ·荧光标记的基因芯片杂交验证筛选基因 | 第15-16页 |
| ·结果 | 第16-25页 |
| ·RNA质量鉴定 | 第16-17页 |
| ·m RNA DD筛选乳腺原发癌与配对淋巴结转移癌差异表达基因 | 第17-21页 |
| ·同位素标记的反向斑点杂交 | 第21-22页 |
| ·荧光标记的基因芯片比较杂交 | 第22-25页 |
| ·讨论 | 第25-29页 |
| 第二章 KNSL4 表达与乳腺癌发生和转移的关系及其临床价值 | 第29-39页 |
| ·材料与方法 | 第29-32页 |
| ·病例资料及标本取材 | 第29-30页 |
| ·实时定量 RT-PCR方法检测乳腺癌组织中KNSL4 mRNA表达 | 第30-31页 |
| ·免疫组织化学检测乳腺癌组织中Kid蛋白表达 | 第31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·乳腺原发癌与癌旁正常组织中KNSL4 mRNA表达的比较 | 第32页 |
| ·乳腺原发癌组织KNSL4 mRNA表达与临床因素及预后的关系 | 第32-34页 |
| ·乳腺癌组织中Kid蛋白的细胞定位及组织分布 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-39页 |
| 第三章 KNSL4 转录沉默对乳腺癌细胞生物学行为的影响 | 第39-51页 |
| ·材料与方法 | 第39-44页 |
| ·细胞系及实验动物 | 第39-40页 |
| ·KNSL4 siRNA稳定表达乳腺癌细胞亚克隆株的筛选 | 第40-42页 |
| ·KNSL4 基因沉默对乳腺癌细胞体外生物学行为的影响 | 第42-43页 |
| ·KNSL4 基因沉默对乳腺癌细胞体内生物学行为的影响 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·Kid在不同生物学行为乳腺癌细胞系的表达 | 第44页 |
| ·KNSL4 siRNA表达载体的转染效率和稳定细胞克隆筛选 | 第44-46页 |
| ·MDA-MB-435S/KNSL4 siRNA亚克隆细胞的体外生物学行为 | 第46-48页 |
| ·MDA-MB-435S/KNSL4 siRNA亚克隆细胞的体外生物学行为 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 采用ChIP-on-chip方法筛选Kid下游调控基因 | 第51-64页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·细胞系及培养 | 第51页 |
| ·染色质免疫沉淀 | 第51-52页 |
| ·启动子基因芯片杂交 | 第52-53页 |
| ·候选基因的ChIP-DNA实时定量PCR验证 | 第53-54页 |
| ·实时定量RT-PCR比较下调乳腺癌细胞Kid表达对其转录调节候选基因表达的影响 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-61页 |
| ·超声裂解染色质DNA片段长度检测 | 第54-55页 |
| ·ChIP-DNA固相选择与连接的结果 | 第55页 |
| ·启动子芯片扫描与数据分析结果 | 第55-56页 |
| ·差异基因的筛选结果 | 第56-57页 |
| ·ChIP-qPCR检测ATF71P、CDC25C、TM45F3 及PIP结果 | 第57-59页 |
| ·ATF7IP、CDC25C、PIP及TM4SF3 基因在的MDA-MB-435S/KNSL4 siRNA 和MCF-7/KNSL4 siRNA细胞中表达量的改变 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
