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紫红笛鲷组织蛋白酶S的鉴定与其在抗原呈递中的功能

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
主要符号对照表第8-9页
第1章 前言第9-16页
   ·背景简介第9-15页
     ·组织蛋白酶S第9-12页
       ·组织蛋白酶S 概述第9-10页
       ·分子结构第10-11页
       ·组织蛋白酶活性检测第11-12页
     ·组织蛋白酶S 在抗原呈递中的作用第12-15页
       ·抗原呈递过程第12-13页
       ·恒定链在抗原呈递过程中的作用第13-14页
       ·组织蛋白酶与恒定链的剪切第14-15页
     ·组织蛋白酶S 的其他生物学功能第15页
   ·研究的目的意义第15-16页
第2章 材料和方法第16-36页
   ·材料第16-17页
     ·实验动物第16页
     ·实验试剂第16-17页
     ·主要仪器第17页
   ·实验方法第17-36页
     ·紫红笛鲷cDNA 文库构建第17页
     ·PCR 扩增目的片段第17-19页
     ·PCR 产物胶回收纯化第19页
     ·DNA 片段的连接第19-20页
     ·感受态细胞的制备第20-21页
     ·紫红笛鲷头肾总RNA 提取第21页
     ·cDNA 的合成第21页
     ·目的基因开放阅读框的克隆第21-22页
     ·质粒的提取第22-23页
     ·质粒酶切第23页
     ·确定重组蛋白的诱导表达时间第23-24页
     ·蛋白诱导表达第24页
     ·纯化包涵体第24-25页
     ·变性条件下纯化蛋白第25-26页
     ·蛋白复性第26-27页
     ·多克隆抗体的制备第27页
     ·抗体效价的检测第27-28页
     ·复性后组织蛋白酶S 自剪切第28-29页
     ·Western blot 检测第29页
     ·酶活性检测第29-30页
     ·巨噬细胞分离第30-31页
     ·枯草芽孢杆菌刺激以及RT-PCR 检测CTSS 的mRNA 变化第31-32页
     ·CTSS 体外剪切Ii 链蛋白第32-33页
     ·巨噬细胞分离第33-34页
     ·枯草芽孢杆菌刺激以及 RT-PCR 检测 CTSS 的 mRNA 变化第34-35页
     ·CTSS 体外剪切 Ii 链蛋白第35-36页
第3章 组织蛋白酶S 的重组表达以及鉴定第36-45页
   ·组织蛋白酶S 序列第36-37页
   ·BLAST 相似性分析第37-38页
   ·CLUSTAL 分析第38-39页
   ·进化树构建第39-40页
   ·蛋白重组表达以及纯化第40-41页
   ·CTSS 多克隆抗体效价检测第41-42页
   ·蛋白复性及自激活检测第42-43页
   ·酶活性检测第43-45页
第4章 组织蛋白酶S 抗原呈递功能研究第45-51页
   ·恒定链(II 链)序列信息第45-46页
   ·BLAST 相似性第46-47页
   ·蛋白重组表达以及纯化第47页
   ·多克隆抗体制备与效价检测第47-48页
   ·刺激巨噬细胞及REAL-TIME PCR第48-49页
   ·重组恒定链(II 链)体外剪切第49-51页
第5章 结论与讨论第51-54页
参考文献第54-58页
致谢第58-59页
个人简历第59页

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