摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
主要符号对照表 | 第8-9页 |
第1章 前言 | 第9-16页 |
·背景简介 | 第9-15页 |
·组织蛋白酶S | 第9-12页 |
·组织蛋白酶S 概述 | 第9-10页 |
·分子结构 | 第10-11页 |
·组织蛋白酶活性检测 | 第11-12页 |
·组织蛋白酶S 在抗原呈递中的作用 | 第12-15页 |
·抗原呈递过程 | 第12-13页 |
·恒定链在抗原呈递过程中的作用 | 第13-14页 |
·组织蛋白酶与恒定链的剪切 | 第14-15页 |
·组织蛋白酶S 的其他生物学功能 | 第15页 |
·研究的目的意义 | 第15-16页 |
第2章 材料和方法 | 第16-36页 |
·材料 | 第16-17页 |
·实验动物 | 第16页 |
·实验试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-36页 |
·紫红笛鲷cDNA 文库构建 | 第17页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第17-19页 |
·PCR 产物胶回收纯化 | 第19页 |
·DNA 片段的连接 | 第19-20页 |
·感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
·紫红笛鲷头肾总RNA 提取 | 第21页 |
·cDNA 的合成 | 第21页 |
·目的基因开放阅读框的克隆 | 第21-22页 |
·质粒的提取 | 第22-23页 |
·质粒酶切 | 第23页 |
·确定重组蛋白的诱导表达时间 | 第23-24页 |
·蛋白诱导表达 | 第24页 |
·纯化包涵体 | 第24-25页 |
·变性条件下纯化蛋白 | 第25-26页 |
·蛋白复性 | 第26-27页 |
·多克隆抗体的制备 | 第27页 |
·抗体效价的检测 | 第27-28页 |
·复性后组织蛋白酶S 自剪切 | 第28-29页 |
·Western blot 检测 | 第29页 |
·酶活性检测 | 第29-30页 |
·巨噬细胞分离 | 第30-31页 |
·枯草芽孢杆菌刺激以及RT-PCR 检测CTSS 的mRNA 变化 | 第31-32页 |
·CTSS 体外剪切Ii 链蛋白 | 第32-33页 |
·巨噬细胞分离 | 第33-34页 |
·枯草芽孢杆菌刺激以及 RT-PCR 检测 CTSS 的 mRNA 变化 | 第34-35页 |
·CTSS 体外剪切 Ii 链蛋白 | 第35-36页 |
第3章 组织蛋白酶S 的重组表达以及鉴定 | 第36-45页 |
·组织蛋白酶S 序列 | 第36-37页 |
·BLAST 相似性分析 | 第37-38页 |
·CLUSTAL 分析 | 第38-39页 |
·进化树构建 | 第39-40页 |
·蛋白重组表达以及纯化 | 第40-41页 |
·CTSS 多克隆抗体效价检测 | 第41-42页 |
·蛋白复性及自激活检测 | 第42-43页 |
·酶活性检测 | 第43-45页 |
第4章 组织蛋白酶S 抗原呈递功能研究 | 第45-51页 |
·恒定链(II 链)序列信息 | 第45-46页 |
·BLAST 相似性 | 第46-47页 |
·蛋白重组表达以及纯化 | 第47页 |
·多克隆抗体制备与效价检测 | 第47-48页 |
·刺激巨噬细胞及REAL-TIME PCR | 第48-49页 |
·重组恒定链(II 链)体外剪切 | 第49-51页 |
第5章 结论与讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简历 | 第59页 |