摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词对照一览表 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1 抗菌肽 | 第9-15页 |
·抗菌肽的分类 | 第9-10页 |
·抗菌肽的生物学活性 | 第10-12页 |
·抗菌肽的作用机制 | 第12-15页 |
2 防御素 | 第15-20页 |
·防御素的分类 | 第16页 |
·防御素的生物学功能 | 第16-18页 |
·应用前景 | 第18-20页 |
第二章 人源β-防御素-6的原核表达 | 第20-37页 |
第一节 化学合成法获取人源β-防御素-6成熟肽编码基因片段 | 第20-23页 |
1 材料与方法 | 第20-21页 |
·材料 | 第20页 |
·方法 | 第20-21页 |
2 结果与分析 | 第21页 |
3 小结 | 第21-23页 |
第二节 原核表达重组载体pET-32a(+)-hDefb6的构建 | 第23-31页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
·材料 | 第23页 |
·方法 | 第23-27页 |
2 结果与分析 | 第27-29页 |
·pUC57质粒和pET-32a(+)质粒的提取 | 第27页 |
·目的基因载体和表达质粒的双酶切鉴定 | 第27-28页 |
·重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第28-29页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第29页 |
3 小结 | 第29-31页 |
第三节 目的基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-32页 |
·材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-36页 |
·重组蛋白的小量诱导表达 | 第32-33页 |
·重组蛋白的可溶性检测 | 第33-34页 |
·重组蛋白质诱导表达条件的优化 | 第34-36页 |
3 小结 | 第36-37页 |
第三章 人源β-防御素-6重组蛋白的纯化 | 第37-46页 |
1 材料和方法 | 第37-40页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-40页 |
2 结果与分析 | 第40-45页 |
·目的蛋白hDe-6的释放 | 第40-41页 |
·Sephadex G-50凝胶层析 | 第41页 |
·抑菌活性检测 | 第41-43页 |
·RP-HPLC分离纯化及活性检测 | 第43-45页 |
·最小抑菌浓度(MIC)测定 | 第45页 |
3 小结 | 第45-46页 |
全文总结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
创新之处 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录 | 第53-57页 |