| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的病原学特征 | 第11-12页 |
| ·PRRSV分子生物学特征 | 第12页 |
| ·PRRSV致病机理 | 第12页 |
| ·PRRSV N蛋白 | 第12-15页 |
| ·PRRSV N蛋白的结构 | 第13-15页 |
| ·PRRSV N蛋白的转定位机制 | 第15页 |
| ·研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法 | 第15-21页 |
| ·蛋白片段互补技术 | 第15-16页 |
| ·荧光能量转移技术 | 第16页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第16-17页 |
| ·表面等离子共振技术 | 第17页 |
| ·免疫共沉淀 | 第17-18页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第18-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-39页 |
| ·材料 | 第21-28页 |
| ·菌株,毒株和细胞 | 第21页 |
| ·载体与质粒 | 第21-23页 |
| ·主要试剂来源 | 第23-24页 |
| ·培养基、抗生素配制 | 第24-25页 |
| ·缓冲液及其他使用溶液 | 第25-28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-39页 |
| ·钓饵质粒pGBKT7-N的构建 | 第29-31页 |
| ·互作蛋白的筛选 | 第31-33页 |
| ·阳性克隆的初步鉴定 | 第33-34页 |
| ·酵母回返试验对蛋白互作的验证 | 第34页 |
| ·荧光共定位试验对蛋白互作的验证 | 第34页 |
| ·GST-pull down试验验证蛋白的相互作用 | 第34-36页 |
| ·SNPRG对PRRSV增殖的影响 | 第36-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-53页 |
| ·钓饵质粒pGBKT7-N的构建 | 第39页 |
| ·PRRSV WuH3 ORF7基因的扩增 | 第39页 |
| ·构建钓饵重组质粒 | 第39页 |
| ·钓饵质粒pGBKT7-N转化Y187酵母菌株及相关检测 | 第39-40页 |
| ·钓饵质粒pGBKT7-N转化Y187酵母菌株后自激活活性的检测 | 第40页 |
| ·钓饵质粒pGBKT7-N转化Y187酵母菌株后对其毒性的检测 | 第40页 |
| ·互作蛋白的筛选及验证 | 第40-51页 |
| ·阳性克隆的营养缺陷型筛选 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆的β-半乳糖苷酶检测 | 第41页 |
| ·阳性克隆的序列分析 | 第41页 |
| ·酵母回返试验对蛋白互作的验证 | 第41-44页 |
| ·荧光共定位试验对蛋白互作的验证 | 第44-47页 |
| ·GST-pull down试验对蛋白互作的验证 | 第47-51页 |
| ·对SNRPG抗PRRSV增殖作用的检测 | 第51-53页 |
| ·不同剂量SNRPG干扰分子的干扰效率的检测 | 第51页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测siRNA处理后细胞中PRRSV增殖的变化 | 第51-52页 |
| ·TCID_(50)检测siRNA处理后细胞中PRRSV的含量 | 第52-53页 |
| 4 讨论与结论 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·酵母双杂交系统的假阳性 | 第53页 |
| ·N蛋白与SNRPG作用的生物学意义 | 第53-54页 |
| ·N蛋白与LGALS1作用的生物学意义 | 第54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
