| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 禽畜血液的理化和功能性质 | 第14-16页 |
| ·禽畜血液的理化性质 | 第14-15页 |
| ·禽畜血液的功能特性 | 第15-16页 |
| ·营养价值 | 第15-16页 |
| ·药用价值 | 第16页 |
| 2 血红蛋白的理化性质 | 第16-17页 |
| ·血红蛋白分子的结构 | 第16-17页 |
| ·血红蛋白的功能特性 | 第17页 |
| 3 微生物降解血红蛋白(Hb)分子机理 | 第17-18页 |
| 4 微生物酶的分离纯化 | 第18-23页 |
| ·降解酶的定位 | 第19-20页 |
| ·粗酶液的制备 | 第19-20页 |
| ·胞内粗酶液的制备 | 第19页 |
| ·胞外粗酶液的制备 | 第19-20页 |
| ·降解酶粗酶液的分离纯化 | 第20-23页 |
| ·盐析沉淀法 | 第20-21页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第21-22页 |
| ·超滤技术 | 第22-23页 |
| ·电泳法 | 第23页 |
| 5 本文研究的目的意义及主要内容 | 第23-26页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·本课题研究内容 | 第24-26页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶的分离纯化研究 | 第24页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶酶学性质的研究 | 第24页 |
| ·Bacillus pumilus CN8菌株降解猪血Hb机制的探讨 | 第24页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶对猪血Hb酶解动力学研究 | 第24-26页 |
| 第二章 Bacillus pumilus CN8蛋白酶的分离纯化研究 | 第26-40页 |
| 1 材料与方法 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·原料 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·药品 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-32页 |
| ·血红蛋白制备 | 第28页 |
| ·培养方法 | 第28页 |
| ·粗酶液的制备 | 第28页 |
| ·酪氨酸标准曲线的绘制和酶的比活力的测定 | 第28-29页 |
| ·酪氨酸标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·酶的比活力的测定 | 第29页 |
| ·蛋白质含量的测定方法 | 第29页 |
| ·蛋白酶分离纯化的步骤 | 第29-30页 |
| ·硫酸铵盐析饱和度的确定 | 第30页 |
| ·硫酸铵盐析沉淀 | 第30页 |
| ·透析脱盐浓缩 | 第30-31页 |
| ·透析袋的前处理 | 第30页 |
| ·酶液透析 | 第30-31页 |
| ·DEAE-Cellulose-52层析纯化 | 第31页 |
| ·DEAE-Cellulose-52的膨胀活化 | 第31页 |
| ·平衡 | 第31页 |
| ·装柱 | 第31页 |
| ·上样 | 第31页 |
| ·洗脱 | 第31页 |
| ·洗脱液的收集 | 第31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·实验试剂的配制 | 第31页 |
| ·电泳准备 | 第31-32页 |
| ·分离胶的配制 | 第32页 |
| ·浓缩胶的配制 | 第32页 |
| ·加样 | 第32页 |
| ·凝胶板剥离、固定、染色 | 第32页 |
| ·脱色 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-38页 |
| ·Flion-酚法测酶活 | 第32-33页 |
| ·Bacillus pumilus CN8酶的分布的确定 | 第33-34页 |
| ·硫酸铵分级盐析曲线 | 第34-35页 |
| ·DEAE-Cellulose-52离子交换层析 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第35-37页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第37页 |
| ·纯化方案的评价 | 第37-38页 |
| 3 结论与讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 Bacillus pumilus CN8蛋白酶酶学性质的研究 | 第40-51页 |
| 1 材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·原料 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·药品 | 第40-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·pH值对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响 | 第41页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶的pH稳定性 | 第41页 |
| ·温度对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·表面活性剂对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响 | 第42页 |
| ·金属离子对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·Bacillus pumilus CN8菌株的产酶情况测定结果 | 第42-43页 |
| ·pH值对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响测定结果 | 第43-44页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶的最适温度测定结果 | 第44-45页 |
| ·Bacillus pumilus CN8蛋白酶的热稳定性测定结果 | 第45-46页 |
| ·表面活性剂对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响结果 | 第46-47页 |
| ·金属离子对Bacillus pumilus CN8蛋白酶活性的影响结果 | 第47-49页 |
| 3 结论与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 Bacillus pumilus CN8菌株降解猪血Hb机制的探讨 | 第51-59页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·原料 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·药品 | 第51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·制备血红蛋白 | 第52页 |
| ·培养方法 | 第52页 |
| ·样品的制备 | 第52页 |
| ·蛋白酶活力的测定 | 第52页 |
| ·氨基酸含量的测定 | 第52-53页 |
| ·可溶性蛋白质含量的测定 | 第53页 |
| ·Hb降解率的测定 | 第53页 |
| ·紫外可见扫描 | 第53页 |
| ·降解过程中氨基酸的种类及含量的比较测定 | 第53页 |
| ·降解过程IR测定 | 第53-54页 |
| ·Bacillus pumilus CN8菌株作用后血红蛋白微观结构的变化 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·Bacillus pumilus CN8菌株降解Hb效果的测定 | 第54页 |
| ·紫外可见扫描结果分析 | 第54-55页 |
| ·Hb降解为氨基酸的种类及含量的比较测定结果 | 第55-56页 |
| ·红外吸收光谱的测定结果 | 第56-57页 |
| ·Bacillus pumilus CN8菌株作用后血红蛋白微观结构的变化结果 | 第57-58页 |
| 3 结论与讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 Bacillus pumilus CN8蛋白酶酶解动力学研究 | 第59-70页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·原料 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·药品 | 第59-60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·制备血红蛋白 | 第60页 |
| ·培养方法 | 第60页 |
| ·粗酶液的制备 | 第60页 |
| ·蛋白质总量测定方法 | 第60页 |
| ·考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量 | 第60页 |
| ·动力学试验的设计 | 第60-61页 |
| ·预处理 | 第60页 |
| ·酶液的配制 | 第60页 |
| ·酶解 | 第60-61页 |
| ·反应初速度的定义 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-68页 |
| ·pH值对Bacillus pumilus CN8蛋白酶酶动力学常数的影响 | 第61-62页 |
| ·温度对Bacillus pumilus CN8蛋白酶酶动力学常数的影响 | 第62-64页 |
| ·pH值对中性蛋白酶酶动力学常数的影响 | 第64-65页 |
| ·温度对中性蛋白酶酶动力学常数的影响 | 第65-66页 |
| ·PH值对胃蛋白酶动力学常数的影响 | 第66-67页 |
| ·温度对胃蛋白酶酶动力学常数的影响 | 第67页 |
| ·三种酶对猪血血红蛋白蛋白酶动力学比较 | 第67-68页 |
| 3 结论与讨论 | 第68-70页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第70-73页 |
| 1 全文总结 | 第70-71页 |
| 2 创新之处 | 第71页 |
| 3 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80页 |
