| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 活性氧与谷胱甘肽的概述 | 第12-22页 |
| 1.1.1 生物体内的活性氧 | 第12-13页 |
| 1.1.2 细胞体内活性氧的清除机制 | 第13-18页 |
| 1.1.2.1 常见的非酶促抗氧化 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 常见的酶促抗氧化 | 第14-18页 |
| 1.1.3 谷胱甘肽 | 第18-20页 |
| 1.1.3.1 谷胱甘肽的结构及分类 | 第18页 |
| 1.1.3.2 植物体内谷胱甘肽清除ROS的催化机制 | 第18-20页 |
| 1.1.4 谷胱甘肽的作用 | 第20-21页 |
| 1.1.4.1 谷胱甘肽的解毒作用-结合反应 | 第20页 |
| 1.1.4.2 清除细胞内的自由基 | 第20页 |
| 1.1.4.3 吸收和转运氨基酸 | 第20-21页 |
| 1.1.5 谷胱甘肽在共生固氮中的作用 | 第21-22页 |
| 1.2 华癸中慢生根瘤菌7653R基因的敲除方法 | 第22页 |
| 1.2.1 pK19mob介导的单交换 | 第22页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 华癸中慢生根瘤菌谷胱甘肽合成酶基因突变体的构建 | 第23-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株以及质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第23-25页 |
| 2.1.3 培养基和抗生素 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 细菌株总DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 革兰氏阴性菌质粒提取 | 第27页 |
| 2.2.3 DH5α感受态制备 | 第27-28页 |
| 2.2.4 转化 | 第28页 |
| 2.2.5 三亲本接合 | 第28-29页 |
| 2.2.6 华癸中慢生根瘤菌gshB突变体的构建 | 第29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-32页 |
| 2.3.1 7653RgshB生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.3.2 gshB基因扩增 | 第30-32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 华癸中慢生根瘤菌gshB基因对于不同碳源和氨基酸的吸收与利用 | 第33-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 菌株 | 第33页 |
| 3.1.2 试剂和仪器 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-34页 |
| 3.2.1 不同碳源下菌株的生长 | 第33-34页 |
| 3.2.2 不同氨基酸下菌株的生长 | 第34页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第34-36页 |
| 3.3.1 不同碳源下菌株的生长 | 第34-36页 |
| 3.3.2 不同氨基酸下菌株的生长 | 第36页 |
| 3.4 小结 | 第36-38页 |
| 第四章 华癸中慢生根瘤菌gshB基因的抗氧化功能 | 第38-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.1 菌株 | 第38页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38页 |
| 4.2.1 氧化物抑菌实验 | 第38页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第38-40页 |
| 4.3.1 氧化物抑菌实验 | 第38-40页 |
| 4.3.1.1 H_2O_2抑菌实验 | 第39页 |
| 4.3.1.2 CuOOH抑菌实验 | 第39-40页 |
| 4.3.1.3 t-BHP抑菌实验 | 第40页 |
| 4.4 小结 | 第40-42页 |
| 第五章 华癸中慢生根瘤菌gshB基因在共生固氮中的功能 | 第42-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 植物种子与菌株 | 第42页 |
| 5.1.2 试剂和仪器 | 第42-43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 5.2.1 盆栽实验 | 第43页 |
| 5.2.2 根瘤石蜡包埋及透射电镜切片 | 第43-44页 |
| 5.2.3 根瘤固氮酶活测定 | 第44页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第44-46页 |
| 5.3.1 植物盆栽实验 | 第44-45页 |
| 5.3.1.1 结瘤数量 | 第44-45页 |
| 5.3.1.2 固氮酶活 | 第45页 |
| 5.3.2 根瘤石蜡及电镜切片图 | 第45-46页 |
| 5.4 小结 | 第46-48页 |
| 第六章 华癸中慢生根瘤菌中相关基因的表达分析 | 第48-54页 |
| 6.1 实验材料 | 第48页 |
| 6.1.1 菌株 | 第48页 |
| 6.1.2 试剂和仪器 | 第48页 |
| 6.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 6.2.1 细菌RNA的提取 | 第48-49页 |
| 6.2.2 去除gDNA | 第49页 |
| 6.2.3 RNA反转录成cDNA | 第49页 |
| 6.2.4 RT-PCR体系及反应 | 第49页 |
| 6.2.5 共生条件下相关基因的表达 | 第49页 |
| 6.2.6 双氧水胁迫下相关基因的表达 | 第49-50页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第50-52页 |
| 6.3.1 H_2O_2胁迫下相关基因的表达 | 第51页 |
| 6.3.2 共生条件下相关基因的表达 | 第51-52页 |
| 6.4 小结 | 第52-54页 |
| 第七章 总结与展望 | 第54-56页 |
| 7.1 总结 | 第54页 |
| 7.2 展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第64页 |
