| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| 1 植物基因功能研究策略 | 第13-20页 |
| ·基因功能缺失 | 第13-18页 |
| ·反义抑制和共抑制 | 第14-15页 |
| ·插入突变 | 第15-16页 |
| ·RNA干扰(RNAi) | 第16-18页 |
| ·基因功能增加 | 第18页 |
| ·过表达(over-expression) | 第18页 |
| ·诱导表达(inducible expression) | 第18页 |
| ·芯片技术 | 第18-19页 |
| ·酵母双杂交 | 第19-20页 |
| 2 Hsf转录因子研究进展 | 第20-25页 |
| ·植物热激转录因子Hsf的种类与结构 | 第21-22页 |
| ·Hsf的功能 | 第22-23页 |
| ·Hsf对Hsp的调控 | 第22-23页 |
| ·Hsf在其他非生物逆境中的作用 | 第23页 |
| ·植物Hsfs基因功能的研究 | 第23-25页 |
| 3 β-胡萝卜素羟化酶的研究进展 | 第25-29页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 水稻12个OsHsfAs基因表达特征分析 | 第30-41页 |
| 1 材料 | 第30页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·酶和其他试剂 | 第30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| ·OsHsfAs基因的进化分析和启动子序列分析 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·表达分析的材料准备 | 第32页 |
| ·水稻组织总RNA提取和半定量RT-PCR分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-38页 |
| ·OsHsfAs基因的系统树和启动子序列分析 | 第32-34页 |
| ·12个OsHsfAs在水稻不同器官中的表达分析 | 第34-35页 |
| ·不同逆境胁迫下12个OsHsfAs基因的表达特征研究 | 第35-38页 |
| 4 小结与讨论 | 第38-41页 |
| ·OsHsfAs顺式元件和逆境胁迫基因表达的关系 | 第38页 |
| ·OsHsfAs表达具有组织特异性 | 第38-39页 |
| ·不同逆境胁迫OsHsfAs的表达特征 | 第39-41页 |
| 第三章 水稻OsHsfA7基因的功能研究 | 第41-64页 |
| 1 试验材料 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌株与质粒 | 第41页 |
| ·工具酶和其它试剂 | 第41-42页 |
| ·常用实验仪器 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| 2 试验方法 | 第43-48页 |
| ·水稻OsHsfA7基因的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·引物设计 | 第43-44页 |
| ·过表达和RNAi表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·过表达载体构建技术路线 | 第44-45页 |
| ·RNAi表达载体构建技术路线 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第46页 |
| ·转基因植株的检测 | 第46页 |
| ·GUS染色 | 第46页 |
| ·DNA的提取和转基因植株的PCR检测 | 第46页 |
| ·RNA提取和半定量RT-PCR分析 | 第46页 |
| ·转基因水稻的形态观察及其相关检测 | 第46-47页 |
| ·转基因水稻的逆境处理和生理生化指标的检测 | 第47-48页 |
| ·转基因水稻的逆境处理 | 第47页 |
| ·生理生化指标的检测 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-61页 |
| ·OsHsfA7的生物信息学分析 | 第48-50页 |
| ·表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·转基因植株的检测 | 第52-53页 |
| ·转基因水稻的形态观察及其相关检测 | 第53-56页 |
| ·转基因水稻的逆境响应和生理生化指标差异 | 第56-60页 |
| ·转基因水稻的高温逆境响应 | 第56-57页 |
| ·转基因水稻的盐逆境响应 | 第57-59页 |
| ·转基因水稻的干旱逆境响应 | 第59-60页 |
| ·OsHsfA7调控的下游基因的鉴定 | 第60-61页 |
| 4 小结与讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 水稻OsHsfAla基因功能的初步研究 | 第64-76页 |
| 1 试验材料 | 第64页 |
| 2 试验方法 | 第64-67页 |
| ·水稻OsHsfAla基因的生物信息学分析 | 第64页 |
| ·引物设计 | 第64页 |
| ·过表达、RNAi和启动子表达载体的构建 | 第64-65页 |
| ·过表达载体构建技术路线 | 第64-65页 |
| ·RNAi表达载体构建技术路线 | 第65页 |
| ·启动子表达载体构建技术路线 | 第65页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第65页 |
| ·转基因植株的检测 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的花粉育性检测和石蜡切片观察 | 第66页 |
| ·高温逆境处理 | 第66-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-74页 |
| ·OsHsfAla的生物信息学分析 | 第67页 |
| ·表达载体的构建 | 第67-71页 |
| ·OsHsfAla-RNAi转基因植株的检测 | 第71-72页 |
| ·转基因植株花粉的育性检测和发育观察 | 第72-74页 |
| ·转基因植株的形态观察和结实率 | 第74页 |
| 4 小结与讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 水稻OsCH2基因的功能分析 | 第76-96页 |
| 1 试验材料 | 第76页 |
| 2 试验方法 | 第76-79页 |
| ·水稻OsCH2基因的生物信息学分析 | 第76页 |
| ·引物设计 | 第76页 |
| ·表达分析的材料准备 | 第76-77页 |
| ·RNA提取和半定量RT-PCR分析 | 第77页 |
| ·OsCH2基因过表达载体的构建 | 第77-78页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第78页 |
| ·转基因植株的检测 | 第78页 |
| ·叶绿体超微结构的观察 | 第78页 |
| ·转基因植株叶片色素的检测 | 第78-79页 |
| ·光合色素含量的检测 | 第78页 |
| ·叶色值的测定 | 第78页 |
| ·类胡萝卜素含量的测定 | 第78-79页 |
| ·叶绿素荧光动力学参数测定 | 第79页 |
| ·光合速率的测定和气孔的扫描电镜观察 | 第79页 |
| ·发芽试验 | 第79页 |
| ·逆境处理 | 第79页 |
| 3 结果与分析 | 第79-93页 |
| ·OsCH2的生物信息学分析 | 第79-81页 |
| ·OsCH2蛋白的同源性比较 | 第79-81页 |
| ·水稻OsCH2蛋白的跨膜结构和序列保守区分析 | 第81页 |
| ·OsCH2基因的表达分析 | 第81-83页 |
| ·OsCH2在水稻不同组织中的表达 | 第81-82页 |
| ·不同逆境胁迫下OsCH2基因的表达特征 | 第82-83页 |
| ·OsCH2基因过表达载体的构建和水稻的遗传转化 | 第83-84页 |
| ·转基因植株的检测 | 第84-85页 |
| ·转基因植株叶片色素的检测及相关基因的表达 | 第85-88页 |
| ·光合色素含量的测定 | 第85-86页 |
| ·叶色值的测定 | 第86页 |
| ·类胡萝卜素含量的测定及相关基因的表达 | 第86-88页 |
| ·光合性能指标检测、荧光动力学分析及气孔结构的观察 | 第88-89页 |
| ·转基因植株的农学性状及相关检测 | 第89-91页 |
| ·转基因水稻种子的发芽试验 | 第91-92页 |
| ·逆境胁迫对OsCH2-OE转基因植株的影响 | 第92-93页 |
| 4 小结与讨论 | 第93-96页 |
| 全文总结、创新点与下一步研究计划 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-111页 |
| 附录 | 第111-115页 |
| 附录1 遗传转化的基本培养基(mg/L) | 第111-112页 |
| 附录2 缩写词(Abbreviation) | 第112-113页 |
| 附录3 农杆菌介导的遗传转化 | 第113-114页 |
| 附录4 CTAB法提取水稻叶片的DNA | 第114页 |
| 附录5 Trizol法提取水稻叶片的RNA | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 作者简介 | 第116-117页 |
