| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 第一章 概论 | 第16-37页 |
| 1 文献综述 | 第16-26页 |
| ·硒对哺乳动物和人体的生物学功能 | 第16-18页 |
| ·硒的抗氧化作用 | 第16页 |
| ·抗癌抗突变作用 | 第16-17页 |
| ·拮抗重金属等有害元素的作用 | 第17页 |
| ·增强免疫功能 | 第17页 |
| ·与内分泌激素的关系 | 第17-18页 |
| ·缺硒与补硒现状分析 | 第18-19页 |
| ·硒的分布和补硒的必要性 | 第18页 |
| ·补硒剂的分类 | 第18页 |
| ·硒的形态与硒的吸收及毒性的关系 | 第18页 |
| ·食物链摄取硒的安全性和有效性 | 第18-19页 |
| ·硒对植物的作用及其在植物中的赋存形式 | 第19-21页 |
| ·硒对植物的生理作用 | 第19页 |
| ·植物吸收硒的机制 | 第19-20页 |
| ·硒在植物中的存在形式 | 第20-21页 |
| ·植物的富硒机理及硒积聚植物的研究 | 第21-22页 |
| ·富硒植物的富硒机理 | 第21页 |
| ·富硒植物在自然界硒循环中的作用 | 第21-22页 |
| ·富硒植物 | 第22页 |
| ·硒存在形态的鉴定及植物含硒蛋白的鉴定分离 | 第22-25页 |
| ·硒存在形态的分析鉴定 | 第22-23页 |
| ·含硒蛋白的鉴定分析 | 第23-24页 |
| ·植物含硒蛋白的分离纯化 | 第24-25页 |
| ·植物硒蛋白的生物活性研究 | 第25-26页 |
| 2 研究内容及意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第26页 |
| ·研究意义 | 第26-27页 |
| 3 技术路线 | 第27-28页 |
| 4 参考文献 | 第28-37页 |
| 第二章 硒对碎米荠生长发育的影响 | 第37-62页 |
| 1 材料、主要仪器和试剂 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| 2 研究方法 | 第39-44页 |
| ·恩施碎米荠的液体培养及样品处理 | 第39页 |
| ·硒的质量分数的测定 | 第39-40页 |
| ·样品消解 | 第39-40页 |
| ·标准曲线的制作及样品测硒 | 第40页 |
| ·光合色素的测定 | 第40页 |
| ·碎米荠叶片中部分有效成分的测定 | 第40-41页 |
| ·可溶性蛋白的测定 | 第40-41页 |
| ·游离氨基酸、可溶性糖的测定 | 第41页 |
| ·总氨基酸的组成分析 | 第41页 |
| ·抗氧化物质及丙二醛的测定 | 第41-43页 |
| ·叶片中GSH、Vc和MDA的测定 | 第41页 |
| ·抗氧化酶活力的测定 | 第41-43页 |
| ·数据处理 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-57页 |
| ·不同硒水平碎米荠叶片和根系中硒质量分数的变化 | 第44页 |
| ·硒对碎米荠光合色素的影响 | 第44-45页 |
| ·硒对碎米荠有效成分的影响 | 第45-47页 |
| ·可溶性蛋白质的变化 | 第45-46页 |
| ·叶片可溶性糖和游离氨基酸的变化 | 第46页 |
| ·不同硒处理组总氨基酸的组成 | 第46-47页 |
| ·硒对碎米荠叶片GSH和Vc的影响 | 第47-48页 |
| ·硒对碎米荠叶片和根系的抗氧化酶的影响 | 第48-55页 |
| ·硒对恩施碎米荠GSH-Px的影响 | 第48-50页 |
| ·碎米荠叶片和根系的APX活力 | 第50-52页 |
| ·碎米荠叶片和根系的CAT活力 | 第52-53页 |
| ·碎米荠叶片和根系的POD活力 | 第53-54页 |
| ·碎米荠叶片和根系的SOD活力 | 第54-55页 |
| ·碎米荠叶片和根系的MDA变化 | 第55-57页 |
| 4 讨论与结论 | 第57-60页 |
| ·硒对恩施碎米荠生长发育的影响及植物的富硒能力 | 第57页 |
| ·硒对恩施碎米荠叶片还原性物质的影响 | 第57-58页 |
| ·硒与碎米荠体内抗氧化酶活性的关系 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| 5 参考文献 | 第60-62页 |
| 第三章 恩施碎米荠叶片蛋白质组学研究 | 第62-86页 |
| 1 实验材料、仪器与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64-65页 |
| 2 研究方法 | 第65-68页 |
| ·样品的制备及蛋白质的定量 | 第65页 |
| ·蛋白质的提取 | 第65页 |
| ·样品蛋白质溶液的定量 | 第65页 |
| ·双向电泳 | 第65-66页 |
| ·等电聚焦 | 第65-66页 |
| ·胶条平衡 | 第66页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第66页 |
| ·染色 | 第66页 |
| ·胶图分析 | 第66页 |
| ·质谱分析 | 第66-68页 |
| ·胶内酶切 | 第66-67页 |
| ·质谱检测及数据库检索 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-82页 |
| ·碎米荠种子和叶片蛋白质组成和分布的比较 | 第68-69页 |
| ·种子蛋白质的分布 | 第68-69页 |
| ·碎米荠幼苗叶片蛋白质的分布 | 第69页 |
| ·不同硒水平的碎米荠叶片蛋白质的双向电泳 | 第69-75页 |
| ·差异表达的蛋白质点的质谱分析 | 第75-82页 |
| ·质谱检测 | 第75-77页 |
| ·蛋白质的鉴定 | 第77-82页 |
| 4 讨论与结论 | 第82-84页 |
| ·种子含硒蛋白的研究 | 第82页 |
| ·叶片蛋白质的分布及差异性表达 | 第82-83页 |
| ·结论 | 第83-84页 |
| 5 参考文献 | 第84-86页 |
| 第四章 碎米荠含硒蛋白的分离纯化及其理化性质 | 第86-108页 |
| 1 实验材料与主要仪器和试剂 | 第88-89页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·仪器与设备 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88-89页 |
| 2 研究方法 | 第89-93页 |
| ·恩施碎米荠叶片可溶性蛋白的分离及含硒蛋白的鉴定 | 第89页 |
| ·可溶性蛋白的提取 | 第89页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第89页 |
| ·蛋白质的相对分子质量分布 | 第89页 |
| ·蛋白质的回收及硒的检测 | 第89页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第89-90页 |
| ·层析柱的制备及上样 | 第89-90页 |
| ·含硒蛋白的提取和粗分离 | 第90页 |
| ·纯化的含硒蛋白的鉴定 | 第90-91页 |
| ·纯化蛋白的含硒量测定 | 第90页 |
| ·PAGE电泳 | 第90页 |
| ·紫外检测 | 第90-91页 |
| ·等电点初步分析 | 第91页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第91-92页 |
| ·氨基酸的水解 | 第91页 |
| ·氨基酸的衍生 | 第91-92页 |
| ·高效液相检测 | 第92页 |
| ·纯化蛋白的结构分析 | 第92-93页 |
| ·红外光谱分析 | 第92页 |
| ·分子圆二色谱分析 | 第92-93页 |
| 3 结果与分析 | 第93-104页 |
| ·恩施碎米荠叶片可溶性蛋白质的分布及含硒蛋白的鉴定 | 第93-94页 |
| ·含硒蛋白的纯化 | 第94-95页 |
| ·含硒蛋白的鉴定 | 第95-101页 |
| ·纯化蛋白质的凝胶电泳 | 第96-97页 |
| ·紫外光谱分析检测 | 第97页 |
| ·等电点的测定 | 第97-98页 |
| ·纯化蛋白质的氨基酸组成分析 | 第98-101页 |
| ·含硒蛋白结构的初步分析 | 第101-104页 |
| ·外光谱检测 | 第101-102页 |
| ·圆二色谱检测 | 第102-104页 |
| 4 讨论与结论 | 第104-106页 |
| ·碎米荠叶片含硒蛋白的分布 | 第104页 |
| ·含硒蛋白的分离纯化、鉴定及性质分析 | 第104-105页 |
| ·纯化的含硒蛋白的二级结构解析 | 第105页 |
| ·结论 | 第105-106页 |
| 5 参考文献 | 第106-108页 |
| 第五章 碎米荠含硒蛋白的抗氧化活性 | 第108-130页 |
| 1 材料、主要试剂和仪器 | 第110-111页 |
| ·实验材料 | 第110页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第110-111页 |
| ·主要试剂 | 第110页 |
| ·主要仪器 | 第110-111页 |
| 2 研究方法 | 第111-115页 |
| ·对非脂质体系的抗氧化作用 | 第111页 |
| ·超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力测定 | 第111页 |
| ·清除自由基活性的热稳定性研究 | 第111页 |
| ·抗脂质过氧化研究 | 第111页 |
| ·体外抗氧化作用 | 第111-113页 |
| ·小鼠组织样品的制备 | 第111-112页 |
| ·硒蛋白的体外抗氧化 | 第112-113页 |
| ·小鼠体内抗氧化作用 | 第113-114页 |
| ·动物分组和给药 | 第113页 |
| ·小鼠血清、溶血液和肝匀浆的制备 | 第113页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和血清总抗氧化能力的测定 | 第113页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和小鼠血清MDA含量测定 | 第113-114页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和小鼠血清中SOD活性测定 | 第114页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和小鼠全血中GSH--Px活力测定 | 第114页 |
| ·硒和蛋白质的测定 | 第114页 |
| ·数据分析 | 第114-115页 |
| 3 结果与分析 | 第115-124页 |
| ·含硒蛋白的一般抗氧化作用 | 第115-117页 |
| ·对非脂质体系的抗氧化 | 第115-116页 |
| ·抗脂质过氧化能力 | 第116-117页 |
| ·含硒蛋白的体外生物活性影响 | 第117-118页 |
| ·含硒蛋白对肝组织MDA的影响 | 第117页 |
| ·含硒蛋白对线粒体MDA生成的抑制作用 | 第117-118页 |
| ·含硒蛋白对叔丁基过氧化氢引起的过氧化消除作用 | 第118页 |
| ·含硒蛋白在小鼠体内的抗氧化作用 | 第118-124页 |
| ·小鼠体重的变化 | 第119页 |
| ·小鼠的血硒水平变化 | 第119-120页 |
| ·含硒蛋白对小鼠肝组织匀浆和小鼠血清MDA的抑制作用 | 第120页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和血清总抗氧化能力 | 第120-121页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和小鼠全血中GSH--PX活力的变化 | 第121-122页 |
| ·小鼠肝组织匀浆和小鼠血清中SOD活性测定 | 第122-124页 |
| 4 讨论与结论 | 第124-127页 |
| ·含硒蛋白清除自由基的能力 | 第124页 |
| ·含硒蛋白的抗脂质过氧化能力 | 第124页 |
| ·含硒蛋白的抗红细胞氧化损伤的作用 | 第124-125页 |
| ·含硒蛋白促进机体的抗氧化酶活力 | 第125页 |
| ·结论 | 第125-127页 |
| 5 参考文献 | 第127-130页 |
| 全文总结 | 第130-132页 |
| 1 已研究的内容和解决的问题 | 第130-131页 |
| 2 论文的创新点及有待进一步研究的问题 | 第131-132页 |
| ·论文的创新 | 第131页 |
| ·有待进一步研究的内容 | 第131-132页 |
| 附录A 不同硒水平碎米荠叶片双向电泳图谱及分析胶图 | 第132-150页 |
| 附录B 不同硒水平碎米荠叶片的蛋白质表达差异 | 第150-161页 |
| 附录C 缩略词表 | 第161-162页 |
| 附录D 碎米荠照片 | 第162-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 作者简历 | 第166页 |
| 攻读博士期间发表的论文目录 | 第166页 |
