摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 表皮生长因子受体基因的研究进展 | 第12-17页 |
1.1 表皮生长因子受体基因的概述 | 第12页 |
1.2 表皮生长因子受体基因的结构分析 | 第12页 |
1.3 表皮生长因子受体基因激活通路的研究 | 第12-13页 |
1.4 表皮生长因子受体基因调控的功能 | 第13-16页 |
1.4.1 EGFR基因调控性腺发育、细胞增殖、幼体发育 | 第13-15页 |
1.4.1.1 EGFR基因调控性腺发育 | 第14页 |
1.4.1.2 EGFR基因调控细胞增殖 | 第14-15页 |
1.4.1.3 EGFR基因调控幼体发育 | 第15页 |
1.4.2 表皮生长因子受体基因突变体功能的研究 | 第15-16页 |
1.5 研究表皮生长因子受体基因的意义 | 第16-17页 |
第二章 缢蛏EGFR基因克隆及两个亚型表达和增殖初探 | 第17-31页 |
2.1 材料 | 第17-23页 |
2.1.1 实验样品 | 第17页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第17-18页 |
2.1.3 实验方法 | 第18-23页 |
2.1.3.1 组织提取 | 第18-19页 |
2.1.3.2 组织、发育期幼虫和HEK293T细胞总RNA的提取 | 第19页 |
2.1.3.3 cDNA合成 | 第19页 |
2.1.3.4 短片段的验证及cDNA全长的克隆 | 第19-20页 |
2.1.3.5 数据统计与分析 | 第20页 |
2.1.3.6 荧光定量PCR | 第20-21页 |
2.1.3.7 HEK293T细胞传代培养及冻存 | 第21-22页 |
2.1.3.8 重组质粒构建与细胞转染 | 第22-23页 |
2.1.3.9 MTT法检测转染后细胞的增殖能力 | 第23页 |
2.2 结果 | 第23-29页 |
2.2.1 缢蛏EGFR基因的序列特征分析 | 第23-24页 |
2.2.2 缢蛏EGFR基因的氨基酸序列特征分析 | 第24-27页 |
2.2.3 缢蛏EGFR基因的系统进化分析 | 第27页 |
2.2.4 缢蛏EGFR基因在发育时期和组织间的表达分析 | 第27-29页 |
2.2.5 缢蛏EGFR基因对293T细胞增殖能力的影响 | 第29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 体内干扰缢蛏EGFR基因后对个体生长影响初探 | 第31-36页 |
3.1 材料 | 第31-33页 |
3.1.1 实验样品 | 第31页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第31页 |
3.1.3 实验方法 | 第31-33页 |
3.1.3.1 体外合成Sc-EGFR dsRNA和GFP dsRNA | 第31-32页 |
3.1.3.2 缢蛏体内注射dsRNA | 第32页 |
3.1.3.3 荧光定量检测注射后Sc-EGFR基因的表达量 | 第32-33页 |
3.1.3.4 体内干扰缢蛏EGFR基因表达后对生长性状的影响 | 第33页 |
3.2 结果 | 第33-35页 |
3.2.1 荧光定量检测Sc-EGFR基因在干扰后的表达量 | 第33-34页 |
3.2.2 检测干扰Sc-EGFR基因表达后对个体生长和存活的影响 | 第34-35页 |
3.3 讨论 | 第35-36页 |
第四章 缢蛏EGFR基因内含子1内SNP位点多态性与生长性状相关性分析 | 第36-45页 |
4.1 材料和方法 | 第36-37页 |
4.1.1 实验样本与数据采集 | 第36页 |
4.1.2 试剂与仪器 | 第36页 |
4.1.3 样本DNA提取 | 第36-37页 |
4.1.4 缢蛏EGFR基因变异位点筛选及验证 | 第37页 |
4.1.5 序列分析与数据处理 | 第37页 |
4.2 结果 | 第37-43页 |
4.2.1 缢蛏EGFR基因内含子1序列SNP筛选 | 第37-40页 |
4.2.2 缢蛏EGFR基因内含子1序列SNP位点的验证及单倍型分析 | 第40页 |
4.2.3 缢蛏EGFR基因内含子1序列SNP位点多态性分析 | 第40-41页 |
4.2.4 SNP位点与生长性状的关联分析 | 第41-43页 |
4.3 讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |