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七彩神仙鱼(Symphysodon aequifasciatus)dmrt1及sox9基因的克隆和表达分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 引言第11-20页
    1.1 七彩神仙鱼概况第11-12页
    1.2 性别相关基因的发展第12-14页
        1.2.1 性别调控机制概述第12页
        1.2.2 性别相关基因的发现第12-13页
        1.2.3 性别相关基因功能研究第13-14页
    1.3 Dmrt基因的研究进展第14-17页
        1.3.1 Dmrt家族基因第14-15页
        1.3.2 dmrt1表达模式第15-16页
        1.3.3 dmrt1应用第16-17页
    1.4 Sox基因研究进展第17-18页
        1.4.1 Sox基因第17页
        1.4.2 sox9表达模式第17-18页
        1.4.3 sox9应用第18页
    1.5 本研究的目的与意义第18-19页
    1.6 本研究的技术路线第19-20页
第二章 七彩神仙鱼dmrt1基因的克隆和表达分析第20-37页
    2.1 .实验材料第20-22页
        2.1.1 实验样品第20-21页
        2.1.2 主要试剂第21页
        2.1.3 主要设备第21页
        2.1.4 引物第21-22页
    2.2 实验方法第22-27页
        2.2.1 总RNA的提取和质量检测第22页
        2.2.2 反转录第22-23页
        2.2.3 RACE扩增数据处理第23-24页
        2.2.4 目的片段的回收及克隆第24页
        2.2.5 全长验证第24页
        2.2.6 序列比对及进化树的构建第24页
        2.2.7 dmrt1基因的组织表达第24页
        2.2.8 荧光定量PCR反应第24-25页
        2.2.9 原位杂交探针的制作第25页
        2.2.10 冰冻切片的制作第25-26页
        2.2.11 原位杂交实验第26-27页
    2.3 实验结果第27-34页
        2.3.1 dmrt1cDNA全长序列第27页
        2.3.2 dmrt1编码的氨基酸结构第27页
        2.3.3 同源性比较第27-31页
        2.3.4 dmrt1基因在各组织中的表达第31-32页
        2.3.5 荧光定量PCR结果第32-33页
        2.3.6 dmrt1mRNA的定位第33-34页
    2.4 讨论第34-35页
        2.4.1 七彩神仙鱼dmrt1基因第34页
        2.4.2 dmrt1在在各组织中的表达第34-35页
        2.4.3 七彩神仙鱼dmrt1基因性别分化时期表达分析及分子调控机制第35页
    2.5 小结第35-37页
第三章 七彩神仙鱼sox9基因的克隆和表达第37-51页
    3.1 实验材料第37-38页
        3.1.1 实验样品第37页
        3.1.2 主要试剂与设备第37-38页
        3.1.3 引物第38页
    3.2 .实验方法第38-41页
        3.2.1 总RNA的提取第38-39页
        3.2.2 反转录第39页
        3.2.3 3’和5’RACE扩增第39页
        3.2.4 目的片段的回收及克隆第39页
        3.2.5 全长验证第39页
        3.2.6 序列比对及进化树的构建第39页
        3.2.7 sox9基因在各组织中表达第39-40页
        3.2.8 荧光定量PCR反应第40页
        3.2.9 原位杂交探针的制作第40页
        3.2.10 冰冻切片的制作第40-41页
        3.2.11 原位杂交第41页
    3.3 实验结果第41-48页
        3.3.1 sox9cDNA全长序列第41-42页
        3.3.2 sox9基因编码的氨基酸结构第42-43页
        3.3.3 同源性比较第43-45页
        3.3.4 sox9基因在各组织中表达第45-46页
        3.3.5 荧光定量PCR分析第46-47页
        3.3.6 七彩神仙鱼sox9mRNA的定位第47-48页
    3.4 讨论第48-49页
        3.4.1 sox9基因在各组织中的表达第48页
        3.4.2 sox9在性腺分化时期表达分析及基因调控机制第48-49页
        3.4.3 sox9与dmrt1基因可能存在的联系第49页
    3.5 小结第49-51页
论文总结与展望第51-53页
    1.结论第51页
    2.创新点第51-52页
    3.展望第52-53页
参考文献第53-60页
硕士在读期间发表的文章第60-61页
致谢第61-62页

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