摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
1.1 七彩神仙鱼概况 | 第11-12页 |
1.2 性别相关基因的发展 | 第12-14页 |
1.2.1 性别调控机制概述 | 第12页 |
1.2.2 性别相关基因的发现 | 第12-13页 |
1.2.3 性别相关基因功能研究 | 第13-14页 |
1.3 Dmrt基因的研究进展 | 第14-17页 |
1.3.1 Dmrt家族基因 | 第14-15页 |
1.3.2 dmrt1表达模式 | 第15-16页 |
1.3.3 dmrt1应用 | 第16-17页 |
1.4 Sox基因研究进展 | 第17-18页 |
1.4.1 Sox基因 | 第17页 |
1.4.2 sox9表达模式 | 第17-18页 |
1.4.3 sox9应用 | 第18页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
1.6 本研究的技术路线 | 第19-20页 |
第二章 七彩神仙鱼dmrt1基因的克隆和表达分析 | 第20-37页 |
2.1 .实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验样品 | 第20-21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要设备 | 第21页 |
2.1.4 引物 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 总RNA的提取和质量检测 | 第22页 |
2.2.2 反转录 | 第22-23页 |
2.2.3 RACE扩增数据处理 | 第23-24页 |
2.2.4 目的片段的回收及克隆 | 第24页 |
2.2.5 全长验证 | 第24页 |
2.2.6 序列比对及进化树的构建 | 第24页 |
2.2.7 dmrt1基因的组织表达 | 第24页 |
2.2.8 荧光定量PCR反应 | 第24-25页 |
2.2.9 原位杂交探针的制作 | 第25页 |
2.2.10 冰冻切片的制作 | 第25-26页 |
2.2.11 原位杂交实验 | 第26-27页 |
2.3 实验结果 | 第27-34页 |
2.3.1 dmrt1cDNA全长序列 | 第27页 |
2.3.2 dmrt1编码的氨基酸结构 | 第27页 |
2.3.3 同源性比较 | 第27-31页 |
2.3.4 dmrt1基因在各组织中的表达 | 第31-32页 |
2.3.5 荧光定量PCR结果 | 第32-33页 |
2.3.6 dmrt1mRNA的定位 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.4.1 七彩神仙鱼dmrt1基因 | 第34页 |
2.4.2 dmrt1在在各组织中的表达 | 第34-35页 |
2.4.3 七彩神仙鱼dmrt1基因性别分化时期表达分析及分子调控机制 | 第35页 |
2.5 小结 | 第35-37页 |
第三章 七彩神仙鱼sox9基因的克隆和表达 | 第37-51页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 实验样品 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂与设备 | 第37-38页 |
3.1.3 引物 | 第38页 |
3.2 .实验方法 | 第38-41页 |
3.2.1 总RNA的提取 | 第38-39页 |
3.2.2 反转录 | 第39页 |
3.2.3 3’和5’RACE扩增 | 第39页 |
3.2.4 目的片段的回收及克隆 | 第39页 |
3.2.5 全长验证 | 第39页 |
3.2.6 序列比对及进化树的构建 | 第39页 |
3.2.7 sox9基因在各组织中表达 | 第39-40页 |
3.2.8 荧光定量PCR反应 | 第40页 |
3.2.9 原位杂交探针的制作 | 第40页 |
3.2.10 冰冻切片的制作 | 第40-41页 |
3.2.11 原位杂交 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-48页 |
3.3.1 sox9cDNA全长序列 | 第41-42页 |
3.3.2 sox9基因编码的氨基酸结构 | 第42-43页 |
3.3.3 同源性比较 | 第43-45页 |
3.3.4 sox9基因在各组织中表达 | 第45-46页 |
3.3.5 荧光定量PCR分析 | 第46-47页 |
3.3.6 七彩神仙鱼sox9mRNA的定位 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-49页 |
3.4.1 sox9基因在各组织中的表达 | 第48页 |
3.4.2 sox9在性腺分化时期表达分析及基因调控机制 | 第48-49页 |
3.4.3 sox9与dmrt1基因可能存在的联系 | 第49页 |
3.5 小结 | 第49-51页 |
论文总结与展望 | 第51-53页 |
1.结论 | 第51页 |
2.创新点 | 第51-52页 |
3.展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
硕士在读期间发表的文章 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |