| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 中英文缩略表 | 第12-15页 |
| 第一部分 引言 | 第15-48页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 1.2 研究现状与进展 | 第17-47页 |
| 1.2.1 类黄酮及银杏类黄酮 | 第17-19页 |
| 1.2.2 类黄酮结构及其药理学作用 | 第19-21页 |
| 1.2.3 植物体内类黄酮生物合成途径 | 第21-24页 |
| 1.2.4 银杏类黄酮生物合成分子生物学研究进展 | 第24-28页 |
| 1.2.5 植物类黄酮O-甲基转移酶 | 第28-39页 |
| 1.2.6 植物类黄酮糖基转移酶 | 第39-46页 |
| 1.2.7 结语与展望 | 第46-47页 |
| 1.3 本研究拟解决的主要问题 | 第47-48页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第48-64页 |
| 2.1 试验技术路线 | 第48页 |
| 2.2 试验材料 | 第48-49页 |
| 2.3 仪器设备 | 第49页 |
| 2.4 试剂药品 | 第49页 |
| 2.5 试验方法 | 第49-64页 |
| 2.5.1 银杏叶片黄酮糖苷和槲皮素、异鼠李素含量测定 | 第49-50页 |
| 2.5.2 银杏叶片基因组DNA提取 | 第50-51页 |
| 2.5.3 银杏叶片总RNA提取 | 第51-52页 |
| 2.5.4 总RNA反转录 | 第52-53页 |
| 2.5.5 目的片段回收 | 第53-54页 |
| 2.5.6 转化 | 第54页 |
| 2.5.7 质粒DNA提取 | 第54-55页 |
| 2.5.8 引物设计与合成 | 第55-57页 |
| 2.5.9 目的基因中间片段扩增和PCR产物回收、测序 | 第57-58页 |
| 2.5.10 3'RACE PCR扩增和PCR产物回收、测序 | 第58-59页 |
| 2.5.11 5'-RACE PCR扩增和PCR产物回收、测序 | 第59-60页 |
| 2.5.12 目的基因cDNA全长和基因组序列克隆 | 第60页 |
| 2.5.13 目的基因生物信息学分析 | 第60-61页 |
| 2.5.14 银杏中GbFOMT和GbUFGT基因家族分析 | 第61页 |
| 2.5.15 GbUFGT和GbFOMT基因表达模式分析 | 第61页 |
| 2.5.16 原核表达载体构建 | 第61-62页 |
| 2.5.17 原核重组蛋白表达产物的诱导和SDS-PAGE检测 | 第62-63页 |
| 2.5.18 重组蛋白体外活性检测 | 第63-64页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第64-96页 |
| 3.1 银杏叶片中黄酮糖苷和槲皮素、异鼠李素含量变化 | 第64-66页 |
| 3.1.1 银杏叶片中类黄酮种类 | 第64页 |
| 3.1.2 不同发育期黄酮糖苷和槲皮素、异鼠李素含量变化 | 第64-66页 |
| 3.2 GbUFGT基因克隆及分析 | 第66-78页 |
| 3.2.1 GbUFGT基因cDNA克隆 | 第66-67页 |
| 3.2.2 GbUFGT基因cDNA序列分析 | 第67-68页 |
| 3.2.3 GbUFGT蛋白特征分析 | 第68-77页 |
| 3.2.4 GbUFGT基因系统进化树分析 | 第77页 |
| 3.2.5 GbUFGT基因组序列克隆 | 第77-78页 |
| 3.2.6 GbUFGT基因家族分析 | 第78页 |
| 3.2.7 银杏叶片不同发育期GbUFGT基因表达模式 | 第78页 |
| 3.3 GbFOMT基因克隆及分析 | 第78-96页 |
| 3.3.1 GbFOMT基因cDNA克隆 | 第78-79页 |
| 3.3.2 GbFOMT基因cDNA序列分析 | 第79-81页 |
| 3.3.3 GbFOMT蛋白特征分析 | 第81-88页 |
| 3.3.4 GbFOMT基因系统进化树分析 | 第88-90页 |
| 3.3.5 GbFOMT基因组序列克隆 | 第90-91页 |
| 3.3.6 GbFOMT基因家族分析 | 第91页 |
| 3.3.7 银杏叶片不同发育期GbFOMT基因表达模式 | 第91-92页 |
| 3.3.8 GbFOMT融合蛋白最佳诱导条件筛选 | 第92-93页 |
| 3.3.9 GbFOMT酶反应特性分析 | 第93-96页 |
| 第四部分 讨论 | 第96-104页 |
| 4.1 GbUFGT糖基供体 | 第96-98页 |
| 4.2 GbUFGT基因表达模式 | 第98-99页 |
| 4.3 GbFOMT基因表达与类黄酮合成 | 第99-100页 |
| 4.4 银杏类黄酮糖基化与类黄酮O-甲基化 | 第100-101页 |
| 4.5 银杏类黄酮与银杏细胞中GbUFGT和GbFOMT蛋白定位 | 第101-104页 |
| 第五部分 结论与创新点 | 第104-106页 |
| 5.1 全文结论 | 第104页 |
| 5.2 创新点 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-127页 |
| 附录 | 第127-131页 |
| 1 常用缓冲液及培养基的配制 | 第127页 |
| 2 SDS-PAGE相关试剂、缓冲液配方 | 第127-129页 |
| 3 克隆及表达载体结构 | 第129-131页 |
| 攻读博士学位期间发表(待发表)的论文 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
