| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 聚谷氨酸简介 | 第11-20页 |
| 1.1.1 聚γ-谷氨酸的结构和性质 | 第11页 |
| 1.1.2 聚γ-谷氨酸合成微生物 | 第11-13页 |
| 1.1.3 聚γ-谷氨酸的微生物合成和机理 | 第13-17页 |
| 1.1.4 基因工程改造菌合成γ-PGA | 第17页 |
| 1.1.5 聚γ-谷氨酸的应用 | 第17-20页 |
| 1.2 芽胞形成关键基因及其基因缺失的影响 | 第20-23页 |
| 1.2.1 芽胞形成初期的关键基因spo0A | 第20-21页 |
| 1.2.2 芽胞形成中期的关键基因spoⅡAC | 第21-22页 |
| 1.2.3 芽胞形成后期的关键基因spoⅣ | 第22页 |
| 1.2.4 芽胞形成基因缺失对细菌生理的影响 | 第22-23页 |
| 1.3 微生物发酵合成聚γ-谷氨酸的发酵工艺优化 | 第23-25页 |
| 1.3.1 碳源对γ-PGA合成的影响 | 第23页 |
| 1.3.2 氮源对γ-PGA合成的影响 | 第23-24页 |
| 1.3.3 柠檬酸对γ-PGA合成的影响 | 第24页 |
| 1.3.4 金属离子对γ-PGA合成的影响 | 第24-25页 |
| 1.3.5 溶氧和pH对γ-PGA合成的影响 | 第25页 |
| 1.3.6 其他因素对γ-PGA合成的影响 | 第25页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 2 材料和方法 | 第27-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 菌种来源 | 第27页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 培养基 | 第28页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 摇瓶发酵条件 | 第29-30页 |
| 2.2.2 发酵过程曲线测定 | 第30页 |
| 2.2.3 发酵优化 | 第30-31页 |
| 2.2.4 5L发酵罐验证实验 | 第31-32页 |
| 2.2.5 RNA操作方法 | 第32-33页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第33页 |
| 2.3 分析方法 | 第33-35页 |
| 2.3.1 聚γ-谷氨酸以及菌体干重测定方法 | 第33-34页 |
| 2.3.2 葡萄糖浓度检测 | 第34页 |
| 2.3.3 发酵液中生物量检测 | 第34页 |
| 2.3.4 乙偶姻和丁二醇检测 | 第34-35页 |
| 2.3.5 有机酸检测 | 第35页 |
| 2.4 数据处理 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-79页 |
| 3.1 芽胞缺失株在不同培养基中合成γ-PGA的能力比较 | 第36-39页 |
| 3.2 芽胞基因缺失对地衣芽胞杆菌γ-PGA合成的影响 | 第39-43页 |
| 3.2.1 芽胞基因缺失对葡萄糖利用速率的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.2 芽胞基因缺失对聚γ-谷氨酸产量的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.3 芽胞基因缺失对培养基pH值变化的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.4 芽胞基因缺失对菌体生长的影响 | 第42-43页 |
| 3.3 WX-02△ spo0F和WX-02△ spoⅣ合成γ-PGA差异分析 | 第43-47页 |
| 3.3.1 乙偶姻和2,3-丁二醇标曲 | 第43-44页 |
| 3.3.2 两种芽胞缺失株在不同培养基中乙偶姻和2,3-丁二醇的检测 | 第44-46页 |
| 3.3.3 WX-02△spoⅣ在甘油为主要碳源的培养基中的发酵过程曲线 | 第46页 |
| 3.3.4 γ-PGA合成的有关基因的转录分析 | 第46-47页 |
| 3.4 WX-02△spoⅣ和WX-02△spo0F合成γ-PGA发酵工艺优化 | 第47-79页 |
| 3.4.1 WX-02△spo0F以葡萄糖为主要碳源的发酵优化 | 第48-62页 |
| 3.4.2 WX-02△spo0F在5L发酵罐验证实验 | 第62-64页 |
| 3.4.3 WX-02△spoⅣ以甘油为主要碳源时发酵优化 | 第64-77页 |
| 3.4.4 WX-02△spoⅣ在5L发酵罐验证实验 | 第77-79页 |
| 4 结论与展望 | 第79-82页 |
| 4.1 结论 | 第79-81页 |
| 4.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
