| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-16页 |
| 英文缩略语 | 第17-21页 |
| 第一部分 ：头部表面外胚层条件性敲除Msx2基因可以导致小眼球畸形及先天性白内障 | 第21-33页 |
| 1 前言 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 实验设备 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 实验主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验小鼠胚胎、眼球标本制作 | 第23页 |
| 2.2.3 鉴定小鼠胚胎及成鼠基因型 | 第23-24页 |
| 2.2.4 免疫荧光方法鉴定Msx2在小鼠眼表面外胚层上被特异性敲除 | 第24-25页 |
| 2.2.5 HE染色观察Msx2条件性基因敲除小鼠眼部表型 | 第25页 |
| 2.2.6 测量小鼠晶状体质量 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| 3.1 PCR法鉴定Msx2基因条件性表面外胚层敲除小鼠基因型 | 第26-27页 |
| 3.2 条件性基因敲除鼠眼球Msx2基因表达改变 | 第27页 |
| 3.3 表面外胚层Msx2基因条件性敲除导致小眼球畸形 | 第27-28页 |
| 3.4 Msx2基因条件性敲除小鼠眼部表型 | 第28-30页 |
| 3.5 Msx2基因条件性表面外胚层敲除小鼠晶状体质量测量 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 ：表面外胚层Msx2基因在晶状体发育中的作用研究 | 第33-50页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 2.1.2 实验细胞及质粒 | 第34页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.4 实验设备 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 2.2.1 实验主要试剂的配制 | 第35页 |
| 2.2.2 实验小鼠胚胎、眼球标本制作 | 第35-36页 |
| 2.2.3 鉴定小鼠胚胎及成鼠基因型 | 第36-37页 |
| 2.2.4 免疫荧光方法观察Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞BrdU标记变化 | 第37页 |
| 2.2.5 TUNEL检测Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞凋亡变化 | 第37页 |
| 2.2.6 统计分析晶状体细胞的增殖与凋亡 | 第37-38页 |
| 2.2.7 小鼠晶状体RNA-seq分析 | 第38页 |
| 2.2.8 质粒制作 | 第38页 |
| 2.2.9 细胞转染 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-47页 |
| 3.1 条件敲除表面外胚层上Msx2基因HE切片小鼠晶状体横径、纵径及角膜厚度改变 | 第39页 |
| 3.2 Msx2基因条件性敲除小鼠晶状体细胞BrdU+标记变化 | 第39-40页 |
| 3.3 Msx2基因条件性敲除小鼠晶状体细胞凋亡变化 | 第40-41页 |
| 3.4 小鼠晶状体的RNA-seq分析结果 | 第41-45页 |
| 3.5 pEGFP-c1-Msx2质粒制作 | 第45-46页 |
| 3.6 细胞转染 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 第三部分 ：表面外胚层Msx2在钙信号通路中影响晶状体发育的机制研究 | 第50-65页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第51页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第51-52页 |
| 2.1.3 实验设备 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-58页 |
| 2.2.1 实验主要试剂的配制 | 第52-53页 |
| 2.2.2 实验小鼠胚胎、对应石蜡标本的制作 | 第53页 |
| 2.2.3 鉴定小鼠胚胎及成鼠基因型 | 第53-54页 |
| 2.2.4 实时定量PCR检测小鼠晶状体mRNA表达量的变化 | 第54-56页 |
| 2.2.5 利用免疫荧光观察Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞差异基因的表达变化 | 第56-57页 |
| 2.2.6 WB方法观察Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞差异基因表达变化 | 第57页 |
| 2.2.7 免疫组化方法观察Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞差异基因表达变化.. | 第57页 |
| 2.2.8 电镜方法观察Msx2基因条件敲除小鼠晶状体细胞缝隙连接变化 | 第57-58页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第58页 |
| 3 实验结果 | 第58-62页 |
| 3.1 Real-TimePCR检测差异基因在小鼠晶状体中的表达情况 | 第58-59页 |
| 3.2 利用免疫荧光检测表达差异基因在小鼠眼球中表达的差异变化 | 第59-60页 |
| 3.3 WesternBlot方法检测表达差异基因在小鼠晶状体上皮细胞中的差异变化 | 第60页 |
| 3.4 免疫组化方法检测表达差异基因在小鼠晶状体中的差异变化 | 第60-61页 |
| 3.5 透射电镜检测Msx2基因敲除小鼠晶状体细胞缝隙连接变化 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 本研究创新性及自我评价 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 综述 | 第71-77页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简介 | 第79页 |
