| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略语 | 第9-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分：伴小眼球的先天性白内障家系(家系一)致病基因筛查及鉴定. | 第17-52页 |
| 1 前言 | 第17-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-40页 |
| 2.1 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验中常用相关试剂及配制 | 第19-24页 |
| 2.2.1 DNA提取 | 第19页 |
| 2.2.2 酶和相关试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
| 2.2.4 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20-21页 |
| 2.2.5 载体构建相关 | 第21-22页 |
| 2.2.6 细胞培养相关 | 第22-23页 |
| 2.2.7 Western-blot相关试剂及缓冲液 | 第23-24页 |
| 2.2.8 免疫荧光相关试剂、缓冲液 | 第24页 |
| 2.3 方法 | 第24-40页 |
| 2.3.1 家系资料 | 第24-25页 |
| 2.3.2 突变筛查 | 第25-28页 |
| 2.3.3 限制性片段长度多态性分析在家系和人群中验证突变 | 第28-29页 |
| 2.3.4 CRYAA基因c.35G>T,p.R12L突变致病性预测 | 第29页 |
| 2.3.5 构建野生型CRYAA表达载体 | 第29-33页 |
| 2.3.6 突变型CRYAA载体构建 | 第33-35页 |
| 2.3.7 细胞培养和转染 | 第35-36页 |
| 2.3.8 Westernblot检测蛋白水平 | 第36-39页 |
| 2.3.9 免疫荧光检测蛋白的细胞定位 | 第39-40页 |
| 3 研究结果 | 第40-48页 |
| 3.1 临床资料及表型分析 | 第40-41页 |
| 3.2 致病基因筛查 | 第41页 |
| 3.3 致病基因在家系和人群验证 | 第41-42页 |
| 3.4 CRYAA基因c.35G>T,p.R12L突变致病性预测 | 第42-45页 |
| 3.4.1 ACMG和AMP指南 | 第42页 |
| 3.4.2 SIFT | 第42-43页 |
| 3.4.3 PlolyPhen-2 | 第43-44页 |
| 3.4.4 CRYAA基因编码的蛋白结构和功能 | 第44-45页 |
| 3.5 CRYAA表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.6 WT-CRYAA与R12L-CRYAA的表达水平 | 第46-47页 |
| 3.7 WT-CRYAA与R12L-CRYAA蛋白的亚细胞定位 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 第二部分：先天性核性白内障家系(家系二)致病基因筛查及鉴定 | 第52-90页 |
| 1 前言 | 第52-54页 |
| 2 材料和方法 | 第54-80页 |
| 2.1 实验仪器 | 第54页 |
| 2.2 实验中常用相关试剂及配制 | 第54-59页 |
| 2.2.1 DNA提取 | 第54页 |
| 2.2.2 酶和相关试剂 | 第54-55页 |
| 2.2.3 高通量测序相关试剂 | 第55-56页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第56-57页 |
| 2.2.5 载体构建相关 | 第57-58页 |
| 2.2.6 细胞培养相关 | 第58页 |
| 2.2.7 荧光素酶报告基因检测 | 第58-59页 |
| 2.3 方法 | 第59-80页 |
| 2.3.1 家系资料 | 第59页 |
| 2.3.2 突变筛查 | 第59-71页 |
| 2.3.3 变异的致病性预测 | 第71页 |
| 2.3.4 表达载体的构建 | 第71-77页 |
| 2.3.5 细胞培养和转染 | 第77-78页 |
| 2.3.6 荧光素酶报告基因检测 | 第78-80页 |
| 3 研究结果 | 第80-86页 |
| 3.1 临床资料及表型分析 | 第80-81页 |
| 3.2 致病基因筛查及验证 | 第81页 |
| 3.3 MAF基因c.812T>A,p.V217E突变致病性预测 | 第81-84页 |
| 3.3.1 ACMG和AMP指南 | 第81-82页 |
| 3.3.2 SIFT | 第82页 |
| 3.3.3 PlolyPhen-2 | 第82-83页 |
| 3.3.4 MAF基因编码的蛋白结构和功能 | 第83页 |
| 3.3.5 MAF基因编码的蛋白结构和功能 | 第83-84页 |
| 3.4 MAF表达载体的构建 | 第84页 |
| 3.5 突变MAFc.812T>A,p.V271E对转录因子活性的影响 | 第84-86页 |
| 4 讨论 | 第86-89页 |
| 5 结论 | 第89-90页 |
| 本研究创新性及局限性的自我评价 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 综述 | 第99-111页 |
| 参考文献 | 第106-111页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 个人简介 | 第114-115页 |
