| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-32页 |
| 1.1 活病毒标记与示踪研究进展 | 第14-22页 |
| 1.1.1 体外活病毒标记与示踪 | 第15-16页 |
| 1.1.2 体内病毒活体示踪技术 | 第16-18页 |
| 1.1.3 细胞代谢工程与生物正交化学 | 第18-19页 |
| 1.1.4 生物正交化学在标记领域中的应用 | 第19-22页 |
| 1.2 抗肿瘤免疫治疗 | 第22-30页 |
| 1.2.1 CAR-T细胞免疫治疗 | 第22-26页 |
| 1.2.2 T细胞基因工程改造技术 | 第26-29页 |
| 1.2.3 T细胞基因工程改造与生物正交化学 | 第29-30页 |
| 1.3 本文立足点和研究内容 | 第30-32页 |
| 第2章 叠氮化衍生物代谢修饰假型流感病毒H5N1p | 第32-50页 |
| 2.1 引言 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-42页 |
| 2.2.1 实验材料与仪器 | 第34页 |
| 2.2.2 培养基及相关溶液配制 | 第34页 |
| 2.2.3 化学合成及其他试剂材料 | 第34-35页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第35页 |
| 2.2.5 胆碱衍生物(AE-Cho)的合成与表征 | 第35-36页 |
| 2.2.6 胆碱衍生物(AE-Cho)的生物安全性评价 | 第36页 |
| 2.2.7 病毒包装质粒的扩增与纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.8 叠氮化流感病毒颗粒(N_3-H51Np)的制备与鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.9 原位生物正交标记叠氮化假型流感病毒(N3-H5N1p) | 第38页 |
| 2.2.10 标记病毒免疫荧光分析 | 第38-39页 |
| 2.2.11 不同标记对病毒侵染活性的影响 | 第39页 |
| 2.2.12 qRT-PCR检测细胞因子mRNA的表达水平 | 第39-42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-48页 |
| 2.3.1 胆碱衍生物(AE-Cho)的合成与鉴定 | 第42-43页 |
| 2.3.2 胆碱衍生物(AE-Cho)的生物安全性评价 | 第43-44页 |
| 2.3.3 胆碱衍生物(AE-Cho)对假型流感病毒的代谢修饰 | 第44-45页 |
| 2.3.4 原位生物正交荧光标记N3-H5N1p | 第45-46页 |
| 2.3.5 原位生物正交荧光标记病毒生物活性的影响 | 第46-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-50页 |
| 第3章 体内原位生物正交标记示踪流感病毒颗粒的侵染过程 | 第50-64页 |
| 3.1 引言 | 第50-52页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第52-55页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第52页 |
| 3.2.2 抗体及其他试剂材料 | 第52-53页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第53页 |
| 3.2.4 小鼠滴鼻感染模型的建立 | 第53页 |
| 3.2.5 体内原位生物正交标记 | 第53页 |
| 3.2.6 病毒活体动态示踪 | 第53-54页 |
| 3.2.7 体内原位生物正交标记对病毒侵染活性的影响 | 第54页 |
| 3.2.8 体内原位生物正交标记对病毒免疫原性的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与分析 | 第55-62页 |
| 3.3.1 小鼠感染模型的建立 | 第55-56页 |
| 3.3.2 体内病毒原位生物正交标记及活体示踪 | 第56-59页 |
| 3.3.3 体内原位生物正交标记对病毒侵染活性的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.4 体内原位生物正交标记对病毒免疫原性的影响 | 第60-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第4章 原位生物正交标记可视化研究不同毒力EV71病毒株的组织趋向与扩散 | 第64-89页 |
| 4.1 引言 | 第64-66页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第66-71页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第66页 |
| 4.2.2 实验动物 | 第66页 |
| 4.2.3 抗体及其他试剂材料 | 第66-67页 |
| 4.2.4 仪器设备 | 第67页 |
| 4.2.5 EV71病毒株的分离与鉴定 | 第67-68页 |
| 4.2.6 EV71病毒的感染性测定 | 第68-69页 |
| 4.2.7 VP1衣壳蛋白的结构与生物信息学分析 | 第69页 |
| 4.2.8 EV71病毒制备和标记 | 第69页 |
| 4.2.9 病毒感染模型与活体成像 | 第69-70页 |
| 4.2.10 共聚焦荧光成像分析 | 第70页 |
| 4.2.11 qRT-PCR定量病毒拷贝数 | 第70-71页 |
| 4.2.12 组织病理学染色 | 第71页 |
| 4.3 结果与分析 | 第71-86页 |
| 4.3.1 不同毒力株EV71病毒的分离与鉴定 | 第71页 |
| 4.3.2 不同EV71病毒株感染及毒力分析 | 第71-73页 |
| 4.3.3 EV71VP1衣壳蛋白的结构分析 | 第73-75页 |
| 4.3.4 EV71病毒的体外原位生物正交标记与示踪 | 第75-76页 |
| 4.3.5 体内原位生物正交标记与预标记EV71病毒的比较 | 第76-81页 |
| 4.3.6 原位生物正交标记研究不同毒力肠道病毒株在体内的扩散 | 第81-82页 |
| 4.3.7 原位生物正交标记揭示不同毒力肠道病毒株的组织趋向 | 第82-86页 |
| 4.4 本章小结 | 第86-89页 |
| 第5章 基于生物正交靶向的病毒-纳米复合物在CAR-T细胞基因改造中的应用 | 第89-112页 |
| 5.1 前言 | 第89-91页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第91-95页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第91页 |
| 5.2.2 实验动物 | 第91页 |
| 5.2.3 抗体及其他试剂材料 | 第91页 |
| 5.2.4 仪器设备 | 第91-92页 |
| 5.2.5 PEI-DBCO纳米聚合物的合成与表征 | 第92页 |
| 5.2.6 PEI-DBCO/慢病毒纳米复合物的制备和表征 | 第92页 |
| 5.2.7 T细胞扩增与糖代谢标记 | 第92-93页 |
| 5.2.8 PEI-DBCO介导的慢病毒对T细胞转染 | 第93页 |
| 5.2.9 生物安全评估 | 第93-94页 |
| 5.2.10 CAR-T细胞靶向性分析 | 第94页 |
| 5.2.11 CAR-T细胞因子释放 | 第94页 |
| 5.2.12 CAR-T细胞毒性分析 | 第94-95页 |
| 5.2.13 肿瘤异种移植小鼠模型 | 第95页 |
| 5.3 结果与分析 | 第95-110页 |
| 5.3.1 PEI-DBCO的合成与表征 | 第95-96页 |
| 5.3.2 PEI-DBCO/慢病毒纳米复合物的制备和表征 | 第96-98页 |
| 5.3.3 T细胞的扩增、活化与糖代谢标记 | 第98-99页 |
| 5.3.4 PEI-DBCO/慢病毒纳米复合物对Jurkat与原代T细胞的转染 | 第99-104页 |
| 5.3.5 PEI-DBCO/慢病毒转染系统的生物安全性评价 | 第104-106页 |
| 5.3.6 PEI-DBCO/慢病毒介导的CAR-T细胞功能评价 | 第106-107页 |
| 5.3.7 PEI-DBCO/慢病毒介导的CAR-T细胞对小鼠肿瘤的清除 | 第107-110页 |
| 5.4 本章小结 | 第110-112页 |
| 全文总结 | 第112-115页 |
| 展望 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-132页 |
| 附录 缩写词(Abbreviation) | 第132-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 作者简历 | 第136-137页 |
| 博士期间发表论文目录 | 第137-139页 |
| 博士期间发表专利目录 | 第139-140页 |
| 博士期间参与的主要基金项目 | 第140-141页 |
| 博士期间所获奖励 | 第141页 |
